DYCZ-27B型圆盘电泳仪操作全攻略：新手必看的高效使用指南

作者：六一生物发布时间：2025-05-20 09:30:59 点击：

DYCZ-27B型圆盘电泳仪是生物实验室中分离蛋白质、核酸等生物大分子的关键设备，其操作规范性直接影响实验数据的可靠性。本文从仪器结构认知、标准化操作流程、常见问题解决及维护要点四大板块，为科研工作者提供一套可直接应用的实操方案，帮助新手快速掌握DYCZ-27B型圆盘电泳仪核心操作技巧。

一、仪器结构与核心功能

1、主要部件功能解析

垂直板电泳槽：采用高强度聚碳酸酯材质，适配1.0mm厚凝胶，配备硅胶密封条防止缓冲液渗漏。槽体设计符合人体工学，支持快速拆装。

双稳压电源模块：输出电压范围10-300V，精度达±0.1V，内置过载保护机制，超负荷时自动切断电路。建议搭配数字电压表实时监测输出稳定性。

半导体制冷系统：温控范围0-40℃，精度±0.5℃，支持梯度温度设置。长时间运行时需确保散热通道无遮挡。

钼合金电极组：耐受200V/cm场强，接触电阻低于0.1Ω。电极表面需定期清洁，避免氧化影响导电性。

2、关键参数配置
适用凝胶类型：10%-20%聚丙烯酰胺凝胶（PAGE），推荐使用1.5mm玻璃板制备

样品承载能力：12个垂直加样孔，单孔最大装载量15μL

缓冲液适配性：兼容Tris-Glycine（pH8.3-8.8）、Tris-Tricine等多种体系

二、标准化操作全流程

1、实验前准备（15分钟关键步骤）

（1）系统初始化

接通电源后，长按控制面板复位键3秒，待显示屏显示"IDLE"状态方可进行后续操作。首次使用需执行自检程序：依次开启冷却系统10秒，观察风扇运转是否平稳。

2、凝胶制备要点

（1）玻璃板对齐：使用专用夹具固定，确保板间缝隙均匀（误差＜0.1mm）
（2）凝胶聚合：按厂商配方混合单体溶液，倒入制胶板后静置30分钟。夏季高温环境建议缩短至25分钟，防止聚合过度
（3）封胶处理：用0.5%琼脂糖溶液封闭胶边缘，重点处理胶与玻璃板接触的四个直角部位

3、缓冲液配制标准

使用超纯水配制1×Tris-Glycine电泳缓冲液，电导率需控制在1.4±0.1mS/cm。建议现配现用，4℃保存不超过72小时。

三、样品加载规范

1、点样操作细节

（1）选用200μL微量移液器，枪头尖端修剪至2mm内径

（2）垂直进样深度控制在2.0±0.2mm，进样速度保持1μL/秒

（3）样品间保留1.5mm间隔，末尾孔注入等体积缓冲液作为空白对照

四、电极安装校验

红色阳极应连接凝胶底部（电泳迁移方向），黑色阴极对应凝胶顶部。安装后需用万用表检测电极间电阻，正常值应在15-20Ω范围内。

五、电泳参数设置

1、分阶段电压控制

（1）预电泳阶段：50V恒压运行10分钟，使样品充分进入分离胶
（2）主分离阶段：提升至120V，维持60分钟（溴酚蓝指示剂迁移至凝胶下沿2cm时终止）
（3）降压收尾：结束前5分钟降至50V，防止突然断电导致条带扩散

2、温度控制要点

当环境温度超过28℃时，需开启强制冷却模式。每运行30分钟检查散热器表面温度，正常应低于45℃。

3、结果处理规范

（1）凝胶取出技巧

断电后静置5分钟，待胶体完全停止热运动。使用塑料撬板从板间缝隙插入，沿45°角缓慢撬开玻璃板，避免凝胶破损。

（2）染色与分析

考马斯亮蓝染色液浸泡时间不少于30分钟，期间轻摇染色盒使染色均匀。脱色时采用梯度更换法：首次使用10%乙酸溶液脱色15分钟，后续改用7%乙酸+5%甲醇混合液，每10分钟更换直至背景清晰。

通过掌握这些核心要点，DYCZ-27B型圆盘电泳仪将不再是实验室角落里令人头疼的“黑箱”，而会成为您探索生命奥秘的可靠伙伴。当蓝色指示剂前沿匀速向下移动时，每个精准控制的参数都在为科研突破积蓄能量——这正是现代实验室智慧与经典技术的完美交响

本文由北京六一生物编辑整理。

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