电泳仪光源革新怎样改变实验安全与观测体验

    去年夏天，我在普通电泳仪前盯了 20 分钟，眼睛又酸又胀，摘下护目镜时，眼前还残留着紫色光斑 —— 为了看清楚胶里的条带，不得不凑近紫外灯，哪怕戴了护目镜，长时间照射还是不舒服。直到组里换了带蓝光光源的新电泳仪，第一次用就惊到了：不用戴护目镜，隔着半米都能看清条带，眼睛再也没出现过不适。现在用了半年，从 “怕伤眼” 到 “放心用”，慢慢摸清了光源革新带来的改变，也总结出不少实用技巧，今天就跟大家聊聊，这看似简单的 “换灯”，到底让实验方便了多少。

一、先说说老问题：紫外光源的 2 个安全隐患，以前总被忽略

用普通紫外光源电泳仪时，大家总把注意力放在 “条带清不清” 上，却很少注意那些隐藏的安全问题，我之前就因为没在意，吃了两次亏。

1. 紫外辐射伤眼：盯 10 分钟就酸胀，还得戴厚重护目镜

普通电泳仪的紫外灯波长多在 254nm，属于短波紫外线，哪怕是微弱的泄漏，长时间照射也会伤眼睛。有次赶实验，我没戴护目镜就凑过去看条带，盯了大概 5 分钟，当天下午眼睛又红又痛，医生说这是 “紫外光性角膜炎”，得滴眼药水休息 3 天，实验直接停了。
后来每次用紫外光源，都得戴厚重的护目镜，镜片还容易起雾，看胶时得反复摘戴，特别麻烦。有次护目镜起雾，我没看清胶的位置，手不小心碰到紫外灯，手背立马红了一片，疼了好几天 —— 现在想起来还后怕，要是碰到脸就更糟了。

2. 样品降解：紫外照久了，珍贵样品白忙活

紫外光不仅伤人，还会破坏核酸样品。上次做病毒 DNA 检测，样品特别珍贵，我用紫外灯照了 15 分钟找条带，结果后续 PCR 扩增时，样品全失败了 —— 后来才知道，紫外光会让 DNA 链断裂，照得越久，降解越严重。
那时候每次用紫外光源，都得速战速决，照 30 秒就赶紧关，生怕样品坏了，条带没看清楚也不敢多照，只能凭感觉判断，好几次因为没看清条带，白跑了胶。

二、蓝光光源的 2 个惊喜：安全又好认，体验翻了倍

换成蓝光光源电泳仪后，之前的麻烦全没了，最直观的就是 “不用再小心翼翼”，实验时轻松了不少，连师妹都说 “现在跑胶再也不用紧张了”。

1. 不用护目镜，眼睛再也不酸胀

蓝光光源的波长在 450-480nm，属于可见光，对眼睛没有伤害，哪怕长时间盯着看，也不会有不适感。第一次用的时候，我特意没戴护目镜，盯着胶看了 10 分钟，眼睛一点都不酸，也没有残留光斑，当天就把厚重的护目镜收起来了。
更方便的是，蓝光的穿透力比紫外光强，不用凑很近就能看清条带。以前用紫外灯，得把脸凑到离胶 10cm 的地方，现在隔着半米，都能清楚看到 100bp 的小条带，再也不用担心手碰到光源。有次本科生做实验，不小心把胶槽拉出来一点，蓝光直接照在手上，也没出现红肿，要是紫外灯，肯定就伤着了。

2. 样品不降解，珍贵样品也敢多照

蓝光不会破坏核酸和蛋白样品，我做过对比实验：用蓝光照了 30 分钟的 DNA 样品，和没照过的样品一起做 PCR，扩增结果一样好；而用紫外光照 10 分钟的样品，扩增条带明显变弱。现在跑珍贵样品，再也不用 “速战速决”，可以慢慢看条带，甚至能对着蓝光调整成像角度，直到拍出清晰的图。
上次做 CRISPR 编辑实验，样品花了两周才准备好，用蓝光光源照了 20 分钟确认条带，后续实验一切顺利，要是换以前的紫外灯，肯定不敢照这么久，说不定就得重新准备样品，又得等两周。

三、实操技巧：用蓝光光源，这 3 件事要注意

虽然蓝光光源好用，但刚开始用也踩过坑，后来总结出 3 个技巧，能让条带看得更清，还能保护仪器。

1. 配专用染料：普通 EB 不行，得用蓝光兼容染料

第一次用蓝光光源时，我还是加的 EB 染料，结果条带根本不亮，还以为仪器坏了。后来才知道，蓝光需要搭配专用染料，比如 GoldView、SYBR Green，这些染料在蓝光下会发出绿色荧光，条带特别明显。现在每次配胶，都会加 1μL/mL 的 GoldView 染料，不用额外染色，灌胶后直接跑，跑完就能看，比以前用 EB 染色省了 10 分钟。
新手提醒：别用 EB 染料！EB 在蓝光下不发光，白跑一次胶。要是不小心加了 EB，也别慌，可以把胶泡在蓝光染料里 10 分钟，再放到仪器上，条带也能亮，就是多花点时间。我上次加错染料，用这个方法救回来了，没浪费样品。

2. 调亮度：根据胶浓度调整，条带更清晰

蓝光光源有 3 档亮度，跑不同浓度的胶，得调不同的亮度，不然条带可能看不清楚。我总结出一个规律：

1. 跑 1.0-1.5% 的胶（小片段），用中档亮度，条带又亮又细，不会糊；
2. 跑 0.8% 的胶（大片段），用高档亮度，穿透力强，能看清深层的条带；
3. 跑 2.0% 的胶（超小片段），用低档亮度，避免条带太亮看不清边界。

第一次跑 0.8% 的胶时，我用的中档亮度，条带有点暗，调到高档后，立马清晰了，连 5kb 的大片段都能看清。

3. 及时清理：染料会粘在胶槽上，用完要擦

蓝光染料容易粘在胶槽内壁，要是不清理，下次跑胶时，残留的染料会发出荧光，干扰条带观察。每次用完仪器，我都会用湿抹布擦一下胶槽，特别是光源附近，擦干净后，下次跑胶条带更干净，没有杂光。
有次忘了清理，下次跑胶时，胶槽里的残留染料发出绿色光斑，差点把杂光当成条带，后来擦干净后，就再也没出现过这个问题。

四、谁该换？这 2 类实验室，换了绝对值

1. 每天跑胶的实验室：保护眼睛，长期受益

如果每天都要跑胶，长时间用紫外灯，眼睛很容易受损。我们组以前有个老师，用了 5 年紫外光源电泳仪，后来查出慢性结膜炎，医生说和长期接触紫外光有关。换成蓝光光源后，大家再也没出现过眼睛不适，长期下来，对身体的保护不是一点半点。

2. 做珍贵样品的实验室：避免浪费，减少返工

要是经常处理珍贵样品，比如临床样本、难培养的微生物样品，蓝光光源能避免样品降解，减少返工。之前用紫外灯，平均每 10 个珍贵样品，就有 1 个因为紫外照射降解，得重新准备，换成蓝光后，半年都没出现过一次样品降解，省了不少时间和成本。

结尾：光源革新，不只是 “换个灯”

用了半年蓝光光源电泳仪，最大的感受是：这不是简单的 “换个灯”，而是让实验从 “危险又麻烦” 变成 “安全又轻松”。以前跑胶，总担心伤眼睛、样品坏，实验时紧张兮兮；现在不用再小心翼翼，能更专注于实验本身，甚至觉得 “跑胶变成了一件轻松的事”。
如果你们实验室还在用力紫外光源电泳仪，尤其是每天跑胶、经常处理珍贵样品，真的可以试试蓝光光源的，它带来的不只是安全和方便，更是实验体验的提升 —— 毕竟做实验已经够累了，能少点麻烦、多点轻松，不是很好吗？


本文由北京六一生物编辑整理。

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