使用电泳仪时，凝胶无法电泳的原因与解决办法汇总

作者：六一生物发布时间：2025-08-25 09:17:36 点击：

做分子实验这些年，最崩溃的不是样本提不出来，而是好不容易处理好样品，凝胶却一动不动——有次赶临床样本的电泳，盯着胶看了10分钟，Marker连个影子都没挪，差点急得把胶槽掀了。后来跟着实验室老周摸清了规律，才发现这些问题大多是“低级错误”，只要按步骤排查，5分钟就能解决。今天把我踩过的坑、试过的招儿整理出来，每个问题都带实战细节，新手照着做，能少浪费好几板胶。

一、先查「接线」：90%的问题出在这，我曾接反电极白跑1小时

1. 正负极接反：Marker往反方向跑，再晚就跑出胶了

我的坑：第一次跑PCR电泳，边聊天边接线，红色正极线插了负极接口。10分钟后抬头一看，Marker不仅没往前跑，反而往胶边缘挪，再等会儿就要跑出去了！断电换线时还洒了缓冲液，重新上样多花1小时，错过测序送样时间。

解决办法：

- 接线前看三遍标识：红色接“+”，黑色接“-”，接好后扯一下确认没松；
- 开机先观察1分钟：Marker不动/反向跑，立马断电换线，别等样品废了。

2. 电极线没插紧：电流为0，胶根本不跑

我的坑：跑Western blot时，电压显示120V，但电流一直0A，样品纹丝不动。以为仪器坏了要报修，老周过来一看：“线没插到底！”原来电极线是卡扣式的，我只插了一半，没卡紧。

解决办法：

- 插线要听到“咔嗒”声，插完轻轻拽一下；
- 旧线接口氧化？用砂纸磨掉黑锈，露出亮银色再插，接触就好了。

二、再看「缓冲液」：别省试剂，我因反复用旧缓冲液白跑2板胶

1. 浓度配错：太浓电阻大，太稀不导电

我的坑：把50×TAE浓缩液错按10×稀释，配出来的缓冲液浓度太高，pH值偏了1.5，电流上不去，样品半天没动静。

解决办法：

- 配液时贴配方便签，配完用移液管核对体积；
- 不确定浓度？直接用新配的，比浪费样品划算。

2. 量不够：没没过凝胶，导电通路断了

我的坑：为省缓冲液只加了“刚没过胶底”的量，电流忽高忽低，20分钟样品只挪1cm。老周笑我：“没没过凝胶，怎么导电？”

解决办法：

- 加液到“没过凝胶1cm”，看胶槽刻度线把控；
- 漏液先修再用：检查卡扣是否扣紧，密封垫破损就涂凡士林补漏。

三、接着查「凝胶」：我因胶没凝透，熬了通宵重跑

1. 没凝透就上样：电阻太大，样品推不动

我的坑：赶报告时灌胶只等15分钟，胶面软乎乎就上样，结果样品几乎不动。只能重新灌胶，熬到凌晨3点才出结果。

解决办法：

- 等25-30分钟，用两个方法判断：①按胶边缘不凹陷；②滴10μL水在胶上，水不渗透能流走；
- 着急用？放37℃培养箱烘5分钟，别超40℃，胶会变形。

2. 胶里有气泡：阻断通路，样品卡着不动

我的坑：倒胶太快裹了黄豆大的气泡，样品跑到气泡处就停了，只能重灌。

解决办法：

- 倒胶慢一点：烧瓶嘴贴胶槽壁，让胶液“流”进去，别“冲”；
- 有小气泡？用牙签尖戳破，纸巾吸掉表面水，不用重灌。

四、最后看「仪器设置」：选错模式，浪费珍贵样本

1. 恒压/恒流搞混：选恒流，电压不够推不动

我的坑：跑临床样本时随便选了“恒流模式”，电流固定50mA，电压跟着电阻降，最低到60V，30分钟样品挪一点点。

解决办法：

- 跑胶必选“恒压模式”，固定电压让电流自适应；
- 仪器贴便签：“跑胶用恒压！”不确定就看说明书，90%实验都用恒压。

2. 触发过载保护：电压设太高，仪器自动限流

我的坑：想快点跑完5kb质粒，把电压从100V调到150V，仪器报警“过载”，电流降到30mA，样品直接停了。

解决办法：

- 先看仪器参数：侧面贴了最大电压（我这台120V），别超范围；
- 要提速？分阶段跑：100V跑15分钟，再120V跑10分钟，不触发保护。

总结：排查顺序记好，5分钟解决问题

遇到凝胶不跑，别慌别乱拆仪器，按“接线→缓冲液→凝胶→仪器设置”的顺序查，90%的问题都能解决。我现在帮师妹排查，基本看一眼接线、摸一下胶，就能找到原因——其实实验里的“卡壳”，大多是没注意小细节，踩过一次坑，下次就再也不会错了。

本文由北京六一生物编辑整理。

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