DYCP-31E型电泳仪跑胶条带缺失？

作者：六一生物发布时间：2025-09-17 09:03:57 点击：

用DYCP-31E跑核酸时，最窝火的不是条带歪，而是明明每个孔都点了样，紫外灯下却空了好几格——样本、试剂、时间全白费。之前我和同事对着空胶孔犯愁过无数次，后来发现不同“缺失场景”对应着完全不同的原因。这次不按固定维度分类，而是按“全孔没带”“部分孔没带”“条带中途消失”三种最常见的场景拆解，每个场景都附真实踩坑经历，帮你一眼锁定问题。

一、场景1：所有孔都没条带——大概率是“电路没通”或“样本没进胶”

上周师弟第一次用DYCP-31E，跑完整板胶全是空的，差点以为样本被偷了。这类问题要么是电流没传到凝胶，要么是样本根本没留在胶里，排查起来很简单。

先查“电路传导”：电流没通，再好的样本也白搭

我们先看电泳仪电源，屏幕显示电压100V，但电流始终是0mA——典型的“电路断路”。顺着查发现两个问题：

1. 电极线没接对：DYCP-31E的输出线分红黑两极，必须对应电泳槽的“+”“-”接口，师弟不仅插反了，还没插到底，没听到“咔嗒”的卡扣声，自然不通电；
2. 缓冲液太少：胶槽里的缓冲液只刚没过胶边缘，没达到内侧“MAX”刻度线，电流无法在凝胶中均匀传导。

把电极线重新接好、补够缓冲液再跑，所有条带都清晰出来了。提醒一句：每次开机前一定要确认“电流有读数”，别等跑胶结束才发现白忙活。

再查“样本状态”：样本没沉底，全飘进缓冲液了

之前有次全孔没带，是师妹忘加loading buffer了。loading buffer里的甘油能让样本沉进胶孔，没加的话，样本一进槽就飘在缓冲液里，跑胶时自然留不下痕迹。按“样本5μL+buffer1μL”的比例混匀再点样，问题立马解决。
还有次是样本降解：提取的RNA没放冰盒，室温放了40分钟，酶解后全成了碎片，浓度低到紫外灯都照不出来。现在我们的规矩是：核酸样本要么现提现用，要么放-20℃冷冻，点样前必测浓度（至少50ng/μL才够用）。

二、场景2：部分孔没条带——重点盯“点样操作”和“胶孔问题”

最常见的是“边缘孔没带”或“随机几孔没带”，这几乎都是点样时的疏忽或胶孔本身有缺陷导致的，新手尤其容易踩。

点样手法失误：新手最容易“戳漏孔”或“带跑样本”

我刚用DYCP-31E时，经常出现“隔孔没带”，后来对着镜子练点样才发现问题：

- 戳破胶孔：枪头扎得太深，戳穿了胶孔底部的凝胶，样本直接漏进胶槽，比如第3、5孔没带，就是戳漏了；
- 拔枪太快：推完样本立马拔枪头，样本被枪头“带”出孔外一部分，剩下的量太少，跑不出来。

正确的做法是：枪头斜贴胶孔壁，只伸进去1mm，推液后停2秒再慢慢拔枪，现在我点样的孔几乎不会漏带。

胶孔本身有问题：拔梳子太急，胶屑堵了孔

上个月连续两次“第2孔没带”，拆胶槽一看，第2个胶孔里卡着一小块胶屑——拔梳子时太用力，胶屑掉进去堵了孔，样本加不进去，自然没条带。
DYCP-31E的梳子齿比较细，必须等凝胶完全凝固（至少30分钟，摸起来硬邦邦的），再用镊子轻轻左右晃梳子，等胶孔边缘脱离梳子后再拔，就能减少胶屑残留。如果发现胶孔有堵塞，用枪头轻轻挑出胶屑再点样。

三、场景3：条带中途消失——“凝胶或缓冲液”出了问题

这种情况最诡异：点样孔附近有淡淡的条带，但往正极方向跑着跑着就没了，不是完全缺失，而是“半截消失”。我们折腾了好几次才找到原因。

凝胶有缺陷：密度不均，核酸“卡在路上”

有次跑胶，条带跑到一半就淡没了，把凝胶对着光看，发现中间有一块“云雾状”的不均匀区域——配胶时琼脂糖没煮透。当时微波炉只加热了1分钟，溶液里有细小颗粒，凝固后这块区域密度太高，核酸跑进去就被“卡住”，无法继续迁移，看起来就像条带消失了。
后来配胶必按“加热1分钟→晃匀→再加热30秒”的流程，直到溶液完全透明无颗粒，再倒入胶槽，中途消失的情况再也没出现过。

缓冲液“罢工”：浓度不对或污染，传导力下降

还有次条带跑一半就淡了，是用了反复回收的旧缓冲液。TBE缓冲液反复使用后，离子浓度会降低，导电能力变弱，跑到后半程电流不足，核酸迁移变慢甚至停住，条带自然就“消失”了。换成新配的1×TBE缓冲液，条带就能完整跑到底。
另外要注意：别用错缓冲液浓度，之前有同事把10×浓缩液直接倒进槽里，浓度太高导致核酸变性，条带跑一半就降解没了。

总结：3步快速定位法，避免白跑胶

1. 看缺失范围：全孔没带查电路和样本，部分孔没带查点样和胶孔，中途消失查凝胶和缓冲液；
2. 优先排除“人为失误”：90%的条带缺失不是仪器坏了，而是接线、点样、配胶的细节没做好，别一上来就拆仪器；
3. 留好“排查证据”：点样后拍一张胶的照片，跑胶后再拍，对比能快速看出是“没跑出来”还是“跑丢了”。

其实DYCP-31E算很皮实的电泳仪，条带缺失大多是“细节病”。平时点样多练手法、配胶按规矩来、用完及时清洁电极，能少踩80%的坑。实在解决不了，拍张“点样图+跑胶结果图+仪器接线图”给售后，比空说“条带没了”管用一百倍。

本文由北京六一生物编辑整理。

北京六一生物科技有限公司创建于1970年，50多年的历史，公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作，2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。

主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。

如果您对我们的产品有任何问题，欢迎您的来电：400 960 6117

我们的目标是：做生物化学分析仪器行业海尔

标签：