DYCZ - MINI4型电泳仪上样后样品在孔内发生串样怎么办？

作者：六一生物发布时间：2025-03-07 09:10:52 点击：

DYCZ - MINI4型电泳仪上样后样品在孔内发生串样会影响实验结果的准确性，以下是可能的原因及解决办法：

一、凝胶方面

- 凝胶孔损坏

- 原因：在制胶过程中，由于操作不当，如梳子插入或拔出时用力过猛，可能会导致凝胶孔变形、破裂或边缘不整齐，使相邻孔之间的样品容易串样。
- 解决方法：重新制备凝胶，在插入和拔出梳子时要小心操作，保持动作轻柔、垂直，避免对凝胶孔造成损伤。如果发现凝胶孔有损坏，应废弃该凝胶，重新制作。

- 凝胶凝固不均匀

- 原因：凝胶在凝固过程中，温度不均匀或凝胶溶液混合不充分，可能导致凝胶凝固不均匀，部分区域的凝胶孔径过大或过小，为样品串样提供了通道。
- 解决方法：确保凝胶在配制过程中充分搅拌均匀，使各成分混合均匀。在凝胶凝固时，将凝胶置于水平、温度恒定的环境中，让其缓慢、均匀地凝固。

二、上样方面

- 上样量过大

- 原因：上样量超过了凝胶孔的承载能力，样品溶液会溢出凝胶孔，流入相邻的孔中，造成串样。
- 解决方法：根据凝胶孔的大小和样品的浓度，合理控制上样量。一般来说，上样量应使样品溶液在凝胶孔内形成清晰的液柱，不溢出孔外。可通过预实验确定合适的上样量。

- 上样操作不规范

- 原因：上样时移液器枪头插入凝胶孔过深或角度不当，可能会破坏凝胶孔的边缘，或者使样品溶液在孔内分布不均匀，导致样品串样。
- 解决方法：上样时将移液器枪头垂直缓慢插入凝胶孔，插入深度以刚好进入孔内为宜，避免过深插入或倾斜插入。同时，缓慢、均匀地将样品溶液注入孔内，确保样品在孔内均匀分布。

三、缓冲液方面

- 缓冲液液位过低

- 原因：电泳槽中的缓冲液液位过低，无法完全覆盖凝胶孔，会使样品在孔内的扩散不受限制，容易发生串样。
- 解决方法：在电泳前，确保电泳槽中的缓冲液液位足够高，能够完全覆盖凝胶孔。在电泳过程中，注意观察缓冲液液位，如有下降，及时补充缓冲液。

- 缓冲液对流

- 原因：缓冲液在电泳槽内存在对流现象，可能会带动样品在凝胶孔内移动，导致串样。
- 解决方法：检查电泳槽的密封性，确保缓冲液不会因外部因素产生对流。在加入缓冲液时，要缓慢倒入，避免产生漩涡和对流。如果电泳槽内有搅拌装置，应确保其处于关闭状态或调整到合适的搅拌速度。

四、电泳仪方面

- 电场不均匀

- 原因：电泳仪的电极安装不规范、电极老化或电泳槽内的电极位置不正确，都可能导致电场不均匀，使样品在凝胶孔内受到不均匀的力，从而发生串样。
- 解决方法：检查电极的安装是否正确，确保电极与电泳槽接触良好，位置对称。如果电极老化，应及时更换新的电极。在每次使用前，对电泳仪进行校准，保证电场均匀。

本文由北京六一生物编辑整理。

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