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电泳仪跑歪条?激光校准神操作
作者:六一生物
发布时间:2025-06-10 09:20:25
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在实验室的电泳实验中,当满怀期待地等待电泳结果,却发现条带歪歪扭扭,无法正常分析数据,这无疑是实验人员的噩梦。电泳仪跑歪条不仅会导致实验结果偏差,甚至可能让整个实验前功尽弃。别着急,今天就为大家带来一项“黑科技”——激光校准神操作,让电泳条带重回正轨,助力实验顺利进行。
一、条带跑偏:这些“隐形杀手”在作祟
在探究激光校准方法前,我们得先搞清楚电泳条带为什么会跑歪。只有找准根源,才能对症下药。
- 凝胶制备不规范:凝胶是电泳的“跑道”,如果“跑道”质量不过关,条带自然跑不好。制胶时,凝胶溶液混合不均匀,会导致凝胶内部的孔径大小不一,样品分子在其中迁移的速度就会有差异,从而出现条带歪斜。比如,琼脂糖凝胶在加热溶解后,若没有充分搅拌,局部浓度过高或过低,就会造成这种情况。此外,制胶板不水平,也是常见原因。即使有轻微的倾斜,在电泳过程中,也会使条带向低的一侧偏移。有实验表明,制胶板倾斜5°,条带偏移量可达3 - 5mm 。
- 电泳槽异常:电泳槽相当于条带奔跑的“赛场”,“赛场”出问题,条带岂能正常发挥。电泳槽内的缓冲液分布不均,会形成不同的电场强度区域,样品分子在迁移时就会受到影响,偏离正常路径。比如,缓冲液添加量不一致,或者电泳槽内有杂质堵塞,都会导致这种情况。另外,电极放置不垂直或位置偏移,会改变电场方向,使条带朝着电极异常的方向跑歪。
- 样品上样失误:上样环节是条带“起跑”的关键,如果“起跑”就出问题,后续自然跑偏。上样时,移液器操作不规范,如枪头插入加样孔的角度倾斜、深度不一致,或者加样速度过快,都会使样品在凝胶中分布不均匀,进而造成条带歪斜。还有,样品浓度过高,会使样品在凝胶中迁移时相互干扰,也容易出现条带扭曲、跑歪的现象。
二、激光校准:让条带“走直线”的魔法
激光校准是利用激光的直线性和高准度,对电泳过程中的关键部件进行精准定位和调整,从而确保条带能够沿着正确的方向迁移。
1. 准备工作:校准前的必备条件
- 工具准备:需要用到激光校准仪(可选择专业的光学仪器,也有适用于实验室的简易款)、水平仪、直尺、扳手等工具。激光校准仪能发射出高精度的激光束,作为校准的基准线;水平仪用于检测制胶板和电泳槽的水平度;直尺和扳手则用于辅助调整部件位置和紧固螺丝。
- 设备检查:在进行校准前,先对电泳仪进行全面检查。查看电泳槽是否有裂缝、变形,电极是否氧化、损坏,制胶板是否平整、干净。确保设备本身没有严重的物理损坏,否则校准后也难以达到理想效果。同时,清理电泳槽和制胶板,去除残留的缓冲液、凝胶碎屑等杂质,保证校准环境的清洁。
2. 校准步骤:一步步让条带归位
- 制胶板校准:将制胶板放置在工作台上,用水平仪检测其水平度。如果不水平,通过调节制胶板底部的螺丝进行调整,直到水平仪显示水平。然后,打开激光校准仪,将激光束对准制胶板的长边,调整制胶板的位置,使激光束与制胶板的边缘完全重合,确保制胶板处于垂直且水平的状态。这样可以保证凝胶凝固后,其内部的电场方向均匀一致,为条带的正常迁移奠定基础。
- 电泳槽校准:将电泳槽安装到合适的位置,同样用水平仪检测其水平度,并进行调整。将激光校准仪放置在电泳槽的一侧,使激光束穿过电泳槽的中心,照射到另一侧。检查电极的位置,确保电极与激光束垂直,并且位于电泳槽的中心线上。如果电极位置偏移,使用扳手松开固定电极的螺丝,小心调整电极位置,直至符合要求,然后拧紧螺丝固定。电极的准确位置能保证电场均匀分布在电泳槽内,使条带沿着正确方向迁移。
- 综合调试:完成制胶板和电泳槽的校准后,进行一次综合调试。在制胶板上制备凝胶,加入样品进行电泳实验。观察条带的迁移情况,同时用激光校准仪监测电场方向和条带迁移路径。如果条带仍然有轻微跑偏,再次微调电极位置或制胶板角度,直到条带能够沿着激光束的方向,笔直地迁移到预期位置。
三、校准后的维护:让条带持续“稳跑”
完成激光校准后,并非一劳永逸,还需要做好日常维护工作,才能保证电泳仪持续稳定地运行,让条带始终保持“走直线”。
- 定期检查校准:建议每周对电泳仪进行一次简单的校准检查。使用水平仪检测制胶板和电泳槽的水平度,观察电极是否有移位迹象。每月进行一次全面的激光校准,确保设备始终处于精准状态。尤其是在进行高精度实验前,一定要进行校准,避免因设备偏差影响实验结果。
- 规范操作流程:严格按照电泳仪的操作手册进行实验操作。在制胶、上样、电泳等环节,保持规范的动作和手法。比如,上样时,枪头垂直插入加样孔,缓慢匀速地推出样品;电泳过程中,避免碰撞电泳仪,防止设备位置发生变动。规范的操作能减少因人为因素导致的条带跑偏问题。
- 设备清洁保养:每次实验结束后,及时清理电泳槽和制胶板。用蒸馏水冲洗电泳槽,去除残留的缓冲液和样品杂质,防止这些物质对设备造成腐蚀或影响电场分布。定期对电极进行清洁和保养,去除表面的氧化层,保证电极的导电性良好。良好的设备状态是条带正常迁移的重要保障。
电泳仪跑歪条不再是无解难题,通过激光校准神操作和后续的维护,就能让电泳实验重回正轨。希望以上内容能帮助大家解决实验中的困扰。如果你在使用激光校准过程中有新的经验或问题,欢迎在评论区分享交流,让我们一起攻克电泳实验中的重重难关!
本文由北京六一生物编辑整理。
北京六一生物科技有限公司创建于1970年,50多年的历史,公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作,2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。
主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。
如果您对我们的产品有任何问题,欢迎您的来电:400 960 6117
我们的目标是:做生物化学分析仪器行业海尔
一、条带跑偏:这些“隐形杀手”在作祟
在探究激光校准方法前,我们得先搞清楚电泳条带为什么会跑歪。只有找准根源,才能对症下药。
- 凝胶制备不规范:凝胶是电泳的“跑道”,如果“跑道”质量不过关,条带自然跑不好。制胶时,凝胶溶液混合不均匀,会导致凝胶内部的孔径大小不一,样品分子在其中迁移的速度就会有差异,从而出现条带歪斜。比如,琼脂糖凝胶在加热溶解后,若没有充分搅拌,局部浓度过高或过低,就会造成这种情况。此外,制胶板不水平,也是常见原因。即使有轻微的倾斜,在电泳过程中,也会使条带向低的一侧偏移。有实验表明,制胶板倾斜5°,条带偏移量可达3 - 5mm 。
- 电泳槽异常:电泳槽相当于条带奔跑的“赛场”,“赛场”出问题,条带岂能正常发挥。电泳槽内的缓冲液分布不均,会形成不同的电场强度区域,样品分子在迁移时就会受到影响,偏离正常路径。比如,缓冲液添加量不一致,或者电泳槽内有杂质堵塞,都会导致这种情况。另外,电极放置不垂直或位置偏移,会改变电场方向,使条带朝着电极异常的方向跑歪。
- 样品上样失误:上样环节是条带“起跑”的关键,如果“起跑”就出问题,后续自然跑偏。上样时,移液器操作不规范,如枪头插入加样孔的角度倾斜、深度不一致,或者加样速度过快,都会使样品在凝胶中分布不均匀,进而造成条带歪斜。还有,样品浓度过高,会使样品在凝胶中迁移时相互干扰,也容易出现条带扭曲、跑歪的现象。
二、激光校准:让条带“走直线”的魔法
激光校准是利用激光的直线性和高准度,对电泳过程中的关键部件进行精准定位和调整,从而确保条带能够沿着正确的方向迁移。
1. 准备工作:校准前的必备条件
- 工具准备:需要用到激光校准仪(可选择专业的光学仪器,也有适用于实验室的简易款)、水平仪、直尺、扳手等工具。激光校准仪能发射出高精度的激光束,作为校准的基准线;水平仪用于检测制胶板和电泳槽的水平度;直尺和扳手则用于辅助调整部件位置和紧固螺丝。
- 设备检查:在进行校准前,先对电泳仪进行全面检查。查看电泳槽是否有裂缝、变形,电极是否氧化、损坏,制胶板是否平整、干净。确保设备本身没有严重的物理损坏,否则校准后也难以达到理想效果。同时,清理电泳槽和制胶板,去除残留的缓冲液、凝胶碎屑等杂质,保证校准环境的清洁。
2. 校准步骤:一步步让条带归位
- 制胶板校准:将制胶板放置在工作台上,用水平仪检测其水平度。如果不水平,通过调节制胶板底部的螺丝进行调整,直到水平仪显示水平。然后,打开激光校准仪,将激光束对准制胶板的长边,调整制胶板的位置,使激光束与制胶板的边缘完全重合,确保制胶板处于垂直且水平的状态。这样可以保证凝胶凝固后,其内部的电场方向均匀一致,为条带的正常迁移奠定基础。
- 电泳槽校准:将电泳槽安装到合适的位置,同样用水平仪检测其水平度,并进行调整。将激光校准仪放置在电泳槽的一侧,使激光束穿过电泳槽的中心,照射到另一侧。检查电极的位置,确保电极与激光束垂直,并且位于电泳槽的中心线上。如果电极位置偏移,使用扳手松开固定电极的螺丝,小心调整电极位置,直至符合要求,然后拧紧螺丝固定。电极的准确位置能保证电场均匀分布在电泳槽内,使条带沿着正确方向迁移。
- 综合调试:完成制胶板和电泳槽的校准后,进行一次综合调试。在制胶板上制备凝胶,加入样品进行电泳实验。观察条带的迁移情况,同时用激光校准仪监测电场方向和条带迁移路径。如果条带仍然有轻微跑偏,再次微调电极位置或制胶板角度,直到条带能够沿着激光束的方向,笔直地迁移到预期位置。
三、校准后的维护:让条带持续“稳跑”
完成激光校准后,并非一劳永逸,还需要做好日常维护工作,才能保证电泳仪持续稳定地运行,让条带始终保持“走直线”。
- 定期检查校准:建议每周对电泳仪进行一次简单的校准检查。使用水平仪检测制胶板和电泳槽的水平度,观察电极是否有移位迹象。每月进行一次全面的激光校准,确保设备始终处于精准状态。尤其是在进行高精度实验前,一定要进行校准,避免因设备偏差影响实验结果。
- 规范操作流程:严格按照电泳仪的操作手册进行实验操作。在制胶、上样、电泳等环节,保持规范的动作和手法。比如,上样时,枪头垂直插入加样孔,缓慢匀速地推出样品;电泳过程中,避免碰撞电泳仪,防止设备位置发生变动。规范的操作能减少因人为因素导致的条带跑偏问题。
- 设备清洁保养:每次实验结束后,及时清理电泳槽和制胶板。用蒸馏水冲洗电泳槽,去除残留的缓冲液和样品杂质,防止这些物质对设备造成腐蚀或影响电场分布。定期对电极进行清洁和保养,去除表面的氧化层,保证电极的导电性良好。良好的设备状态是条带正常迁移的重要保障。
电泳仪跑歪条不再是无解难题,通过激光校准神操作和后续的维护,就能让电泳实验重回正轨。希望以上内容能帮助大家解决实验中的困扰。如果你在使用激光校准过程中有新的经验或问题,欢迎在评论区分享交流,让我们一起攻克电泳实验中的重重难关!
本文由北京六一生物编辑整理。
北京六一生物科技有限公司创建于1970年,50多年的历史,公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作,2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。
主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。
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