DYY-6D核心操作与常见问题排查：一位实验员的实战记录

作者：六一生物发布时间：2025-12-02 09:08:46 点击：

我们实验室这台DYY-6D电泳仪，算得上是位“老伙计”了。这么多年用下来，它确实皮实耐用，但就像任何精密仪器一样，偶尔也会闹点小脾气。今天不聊说明书上那些干巴巴的参数，就结合我和同事们踩过的几个“坑”，来分享一份实战记录，希望能帮新手朋友们少走点弯路。

一、核心操作：用好“三恒”是稳定输出的关键

DYY-6D的“三恒”（恒压、恒流、恒功）是它的核心。用对了，条带漂亮重复性好；用错了，结果可能千奇百怪。

恒压（Constant Voltage, CV）：这是我们最常用的模式。电压固定，电流和功率会随着缓冲液电阻的变化（比如产热导致离子强度变化）而自动调整。

何时用：常规的DNA/蛋白琼脂糖凝胶、PAGE胶。比如跑DNA琼脂糖凝胶，我们习惯设置80-120V，跑一个多小时，条带分离效果好。

老李心得：恒压模式跑出来的条带最平整。但要注意，如果缓冲液量少或离子强度很低，起始电流可能会很大，仪器容易因为超限报警。

恒流（Constant Current, CA）：电流固定，电压会随着电阻升高而自动增加。

何时用： SDS-PAGE的浓缩胶阶段，或者需要严格控制发热的实验。因为电流恒定，产热相对稳定，可以有效防止凝胶在电泳过程中过热变形。

老李心得：跑蛋白SDS-PAGE时，我们通常在浓缩胶用恒流（比如20mA），进入分离胶后再切换到恒压（比如120V）。这样既保证了浓缩效果，又让分离胶的条带更锐利。

恒功率（Constant Power, CW）：功率固定，电压和电流的乘积不变。这个模式用得相对较少。

何时用：当体系电阻可能在电泳过程中发生较大变化，但你又不希望产热有剧烈波动时。比如某些形式的电泳，其介质导电性会随时间变化。

老李心得：除非实验方案特殊要求，否则新手可以优先考虑恒压和恒流。

核心要点就一句：摸清你的实验方案，选择最合适的模式。不确定时，参考成熟文献里的参数设置。

二、常见问题排查：从“抓狂”到“淡定”的实战案例

下面分享两个让我印象深刻的真实案例。

案例一：开机报警“OVER LOAD”，电流瞬间飙升

问题现象：去年带一个新来的师妹做蛋白电泳。她接好电泳槽，设置好恒压100V，一按“Start”，仪器就“嘀嘀”报警，屏幕显示“OVER LOAD”，输出电流瞬间达到极限值，然后切断输出。

新手常见反应：师妹的第一反应是“仪器坏了！”。她反复开关机，问题依旧。

我的排查思路与过程：

1. 心态放平：我告诉她，99%的情况下不是仪器本身坏了，而是电泳回路出了问题。DYY-6D的自我保护功能很灵敏。
2. 由外向内，化繁为简：

第一步：断开连接。我把电泳槽的连接线从仪器后端拔掉，然后重新开机，空载（不接任何东西）设置一个低电压（比如50V）并启动。这时仪器运行正常，无报警。这说明仪器主机大概率是好的，问题出在外部回路。

第二步：检查“外部回路”。外部回路就是“仪器 -> 导线 -> 电泳槽 -> 缓冲液 -> 凝胶 -> 缓冲液 -> 导线 -> 仪器”这个圈。

第三步：重点怀疑“短路”。 “OVER LOAD”报警通常意味着回路电阻太小，电流太大。最可能的原因就是短路。

第四步：肉眼检查。我让师妹把电泳槽里的缓冲液倒掉，取出内槽。一眼就看到问题所在：她不小心把一块短路用的连接条（俗称“小帽子”或“小杠铃”）留在了两个内槽电极之间！这相当于用一根金属条直接连接了正负极，电阻几乎为零，一开机电流当然会爆表。

解决方法：取出多余的短路连接条，重新倒入缓冲液，问题解决。

经验总结：遇到报警别慌，学会“隔离法”排查。先确定是主机问题还是外部问题。OVER LOAD大概率是短路，要仔细检查电泳槽内部是否有异物、导线插头是否插错或短路。

案例二：电泳条带“哭脸”（两侧向下弯曲），重复性差

问题现象：我自己早期做Western Blot时，同一块胶跑出来，中间的条带挺直，两边的条带却像“哭脸”一样向下弯曲，而且每次弯曲程度还不一样，重复性非常差。

排查思路与过程：

1. 初步判断：条带弯曲通常与电场不均匀有关。而电场不均匀，多半是导电不良。
2. 逐一排查导电回路：

缓冲液：首先排除了缓冲液过期或重复使用次数过多的问题。

凝胶：制胶过程没问题，凝固良好。

电泳槽：重点来了！我仔细检查了电泳槽的铂金电极丝。由于常年使用，又疏于清洗，电极丝上附着了一层不明显的白色氧化膜和杂质。

恍然大悟：问题就出在这里！电极氧化导致电阻增大，电流通过不均匀。特别是电泳槽两侧的电极，可能因为位置关系，氧化更严重，导致两侧的电场强度比中间弱，迁移速度慢，条带自然就向下弯曲了。

3. 验证：我用棉签蘸取少量酒精，轻轻擦拭铂金电极丝，直到恢复金属光泽。然后重新实验。
解决方法：定期（比如每月一次）用酒精棉签清洁电泳槽的铂金电极丝。如果氧化严重，可以用稀硝酸浸泡几分钟（注意安全！），然后用水和酒精彻底冲洗干净。

经验总结：电泳仪工作正常不代表结果就一定好。要养成定期维护电泳槽的习惯，特别是清洁电极。这就像汽车保养一样，平时多爱护，关键时刻不掉链子。

三、给新手的几条“保命”锦囊

1. 先接线，后通电；先关电，后拔线。这个顺序一定要养成肌肉记忆，能有效保护仪器和人身安全。
2. 参数设置宁低勿高。如果不确定合适的电压/电流，先从低参数开始，慢慢摸索。高压不仅可能破坏样品，还会让凝胶过热。
3. 保持接口干燥。仪器后端和导线接口一定要保持干燥清洁，一旦受潮或沾上缓冲液，很容易引起腐蚀和短路。
4. 遇到问题先看“回路”。把电泳系统想象成一个闭环的电路，任何一点出问题都会影响全局。耐心、仔细地检查每一个环节。

希望这份来自一线的“实战记录”能对你有所帮助。实验科学就是这样，仪器是死的，但人是活的。多动手，多思考，你也会成为驾驭设备的“老司机”。如果大家有其他有趣的案例，欢迎一起交流！

本文由北京六一生物编辑整理。

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