DYCZ-24A双垂直电泳仪实验实战：那些年踩过的坑与实用技巧

作者：六一生物发布时间：2025-07-25 09:19:29 点击：

用DYCZ-24A做电泳快两年，从第一次连玻璃板都装不对，到现在能带着师弟师妹顺利完成实验，这台仪器教会我的可不止是跑胶那么简单。今天就掏心窝子分享些DYCZ-24A双垂直电泳仪实战经验，全是日常操作里攒下的干货，尤其是那些说明书没写但超实用的细节。

一、制胶环节的血泪教训

1. 玻璃板组装的隐藏技巧

新手最容易栽在组装玻璃板这步。记得第一次装的时候，密封垫没卡到位就灌胶，分离胶顺着缝隙漏了半槽，实验台都被胶糊住了。后来才发现，必须把大玻璃板的密封垫凹槽擦干净，套密封垫时要听到"咔嗒"声才算卡紧。现在每次组装完，我都会轻轻拽一下两块玻璃板，纹丝不动才放心。

告诉你们个防漏小妙招：用手指沿着密封垫摸一圈，确保每个角落都贴紧。有次发现右下角有点松，用牙签轻轻往里推了推，灌胶时果然一滴没漏。别小看这几秒钟的检查，能帮你省下清理漏胶的半小时。玻璃板边缘的水渍一定要擦干，不然胶会粘在上面，拆的时候容易碎。

2. 配胶时的精准把控

丙烯酰胺这东西得按顺序加，先加水再加其他试剂，不然容易结块。我师妹第一次配胶就乱加顺序，结果溶液里全是小颗粒，跑出来的条带坑坑洼洼。加TEMED的时候手要稳，尤其是夏天，气温高胶凝得快，加完赶紧倒，别慢悠悠晃。

灌胶速度是个技术活，太快会出气泡，太慢胶都快凝了。我练了十几次才找到感觉：移液管贴着玻璃板内壁，像水流过石壁那样自然流下，每分钟大概加2ml刚好。有次灌胶时出现小气泡，急中生智用针尖轻轻划了下，气泡居然顺着划痕跑出去了，这个小技巧救过我好几次。

二、上样操作的实用窍门

1. 样品处理的关键细节

样品煮沸时间一定要掐准，普通蛋白5分钟刚好，核蛋白最多6分钟。上次有个师弟煮了8分钟，条带直接跑没了，气得导师让他重新做样本。煮完立刻冰浴特别重要，就像给蛋白"定型"，能让条带更清晰。离心后取上清时，枪头别插太深，离管底留1mm，不然会吸到沉淀。

上样量真的别贪多，1.5mm厚的胶每孔20μl足够了。有次为了看低丰度蛋白，硬加了35μl，结果样品溢出污染了旁边三个孔，白忙活一下午。样品管提前做好标记很重要，我习惯用不同颜色的记号笔标组别，上样时对着实验本念一遍，再也没搞错过样品顺序。

2. 上样时的手感培养

上样枪头要斜着插进样品孔，大概1mm深就行，太深容易戳破胶，太浅样品会飘出来。推枪的时候要慢，就像给蛋糕裱花那样均匀用力，20μl样品推2秒刚好。新手可以先用染料练手，看着染料沉到孔底不扩散，就算掌握诀窍了。

加完样一定要检查孔底有没有气泡，有次没注意， Marker孔里藏了个小气泡，结果条带跑出来中间缺了一块。对付气泡有个好办法：用枪头轻轻沾一下，气泡就会被吸到枪头上。上槽缓冲液要加够，刚好没过样品孔1mm最好，太少会导电不良，太多样品容易飘走。

三、电泳过程的实时监控

1. 电源设置的实战经验

电源接线千万别搞反！红对红、黑对黑这个口诀要刻在脑子里。有次师妹接反了线，跑了半小时发现溴酚蓝没动，才发现样品往反方向跑了，气得她直拍大腿。电压用"两步法"最靠谱：开始80V让样品在浓缩胶里压成一条线，溴酚蓝过界后调120V加速分离。

夏天做实验一定要给电泳槽降温，我专门准备了冰袋围着槽子放，温度控制在25℃以下，条带会特别直。没降温的时候跑出来的条带像波浪，降温后立马变笔直，这个细节对结果影响太大了。电泳时别总盯着看，20分钟看一次就行，频繁开盖会让温度波动。

2. 异常情况的紧急处理

电泳时要留意缓冲液里的气泡，均匀上升说明一切正常，气泡突然变多或变少就得警惕。有次发现左边气泡明显比右边少，赶紧断电检查，原来是电极丝松了，拧紧后再跑就正常了。溴酚蓝跑到离胶底1cm时就得盯着，千万别等跑出胶外，小分子蛋白会跟着流失。

遇到突然断电别慌，先看时间：如果跑了不到20分钟，来电后重新开始；超过20分钟就接着跑，总时间别变。上次停电半小时，我抱着主机等来电，还好最后条带没受影响。但千万别频繁开关电源，电压波动容易让条带变形。

四、拆胶与后续处理的技巧

1. 拆胶时的温柔操作

拆胶就像拆礼物，得轻手轻脚。用塑料铲从玻璃板顶端轻轻插进去，左右晃一晃，听到"啵"的一声就说明胶分开了。有次胶粘得特别紧，我把玻璃板泡在去离子水里5分钟，胶自己就脱下来了，比硬撬强多了。

胶板边缘要留2mm别切，尤其是新手，不然容易把边缘的条带切掉。切胶的时候刀要锋利，一刀切到底，别来回锯，不然条带会被压变形。我专门备了把新刀片切胶，比用旧刀片切出来的条带整齐多了。

2. 染色脱色的省时方法

着急看结果可以用热染法：60℃水浴染20分钟，比室温染色快三倍，但条带会稍浅一点。珍贵样品建议4℃过夜染色，条带更清晰。脱色时换液别太勤，第一次30分钟，第二次1小时，第三次过夜，背景会特别干净。

染好的胶用保鲜膜包好放4℃冰箱，能存一周不变样。拍照时垫张白纸当背景，条带会更清楚。重要的条带要及时标记，我习惯用记号笔在保鲜膜上画圈，免得转膜时找不到位置。

五、仪器保养的续命技巧

1. 日常清洁的关键部位

每次实验完一定要立刻洗槽子，电极丝上的结晶用软布擦，千万别用硬东西刮，我见过有人把电极丝刮断的。密封槽里的胶渣要用棉签蘸水抠干净，不然下次装玻璃板会漏。有次偷懒没洗干净，结果密封垫上结了层硬壳，换个新的花了50块。

玻璃板用完要竖直放，别叠着压，不然会变形。我专门买了个玻璃架，每块板都立着放，用的时候拿取也方便。样品梳要拆开洗，齿缝里的胶渣用软毛刷清理，不然下次插胶会歪。

2. 长期存放的注意事项

放假前保养仪器特别重要，槽体要用去离子水冲三遍，电极丝擦干后涂一层薄凡士林防氧化。密封垫拆下来泡在蒸馏水里，不然会变硬开裂。上次暑假回来，发现没泡的密封垫硬得像塑料，只能花钱换新的。

电源接口要定期检查，松了会接触不良。我每月都会拔插一次电源线，用酒精擦擦接口，确保导电良好。仪器别放在通风口或空调底下，温度变化太大会影响寿命，我们实验室那台放窗边的，用了一年就有点接触不良了。

用DYCZ-24A双垂直电泳仪越久越觉得，好仪器就像好搭档，你对它用心，它就给你靠谱的结果。这些技巧看着琐碎，但都是保证实验顺利的关键。其实新手不用怕犯错，我刚开始也漏过胶、跑错过方向，但每次错了记下来，下次改进，慢慢就成高手了。记住，最好的实验结果，永远藏在那些不起眼的细节里。

本文由北京六一生物编辑整理。

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