刚用电泳仪那半年，我几乎每周都要遇到一次故障：跑胶到一半突然断电、条带歪得没法看、甚至仪器直接报错黑屏，每次都手忙脚乱找说明书，耽误实验不说，还浪费了好多样品和胶。后来跟着实验室的老技术员学了不少 “应急技巧”，现在遇到故障，5 分钟内基本能解决，连师妹都说 “你处理电泳仪问题比修电脑还快”。今天把这些踩坑总结的实用技巧分享出来，新手遇到问题不用慌，照着做就能少走弯路。

一、跑胶时没条带？别慌，先查这 3 个地方

第一次跑胶没出条带时，我以为仪器坏了，差点联系厂家售后，后来才发现是自己漏了小步骤。现在遇到没条带的情况，我会按这 3 步排查，基本都能找到问题。

1. 先看样品加没加 loading buffer，比例对不对

最容易犯的错就是忘加 loading buffer！我第一次跑 PCR 产物，没加 buffer 就上样，样品直接沉到胶槽底部，跑了半天没条带，还以为是引物出了问题，重新做 PCR 白浪费了 3 小时。后来才知道，loading buffer 不仅能让样品沉在梳孔里，还能指示跑胶进度。现在只要没条带，我先看离心管里有没有加 buffer，比例是不是 “样品:buffer=5:1”—— 有次师妹图省事按 10:1 加，buffer 不够，样品扩散，条带淡得几乎看不见，补加 buffer 重新上样后，条带立马清晰了。

2. 再检查电极接反没，别搞反正负极

电极接反是新手高频错误！有次本科生跑胶，把红色电极线接在负极接口上，结果 Marker 往反方向跑，跑到胶槽外面去了，整板胶白跑。现在我上样前都会看一眼：电泳仪上红色是正极，黑色是负极，胶槽的 “+”“-” 标识要和仪器对应，接好后再扯一下线，确保没松。如果接反了，赶紧断电重接，只要没跑太久，胶还能继续用 —— 上次我接反了 5 分钟，断电换过来后，条带还是能跑出来，就是位置有点偏。

3. 最后看染料加没加，是不是蓝光 / 紫外对应染料

染料加错或漏加，条带也不会亮！第一次用蓝光电泳仪时，我还加的 EB 染料，跑出来啥都看不见，以为仪器光源坏了，后来才知道 EB 要配紫外灯，蓝光得用 GoldView、SYBR Green 这类专用染料。现在没条带，我会检查胶里有没有加染料，加的是不是和光源匹配 —— 有次借了隔壁实验室的紫外电泳仪，用了自己的蓝光染料，结果没条带，换 EB 染料后重新跑，条带立马出来了。

二、条带跑歪、模糊？问题多在胶和参数上

条带歪歪扭扭、边缘模糊，不仅影响结果分析，还得重跑胶。我以前总觉得是胶的质量不好，后来才发现是灌胶和参数设置出了问题。

1. 条带整体歪？先看胶槽平不平，缓冲液够不够

有次跑胶条带全往一边歪，我以为是电极坏了，后来发现是实验台不平，胶槽倾斜了，缓冲液一边多一边少，电流不均匀导致条带歪。现在我灌胶前会把胶槽放在水平仪上调平，加缓冲液时看刻度线，确保液面没过胶面 2mm，左右液面一样高 —— 上次实验台有点斜，我垫了张纸巾把胶槽调平，条带就跑直了。
如果是部分条带歪，可能是梳孔没插正！新手灌胶后立马插梳子，胶没凝住，梳子歪了，上样时样品往一边流，条带就歪。现在我会等胶半凝固（灌胶后等 3 分钟，摸起来黏但不粘手）再插梳子，插的时候垂直往下，别左右晃，梳孔正了，条带自然直。

2. 条带模糊扩散？大概率是电压太高或胶浓度不对

电压太高会让条带 “跑糊”！有次跑 500bp 的小片段，我用 150V 跑，比平时高了 30V，结果条带宽得像 “面条”，根本分不清楚。现在跑小片段（100-1000bp）我用 120-130V，大片段（1kb 以上）用 80-100V，电压降下来后，条带又细又清晰。如果电压没问题，再看胶浓度：跑小片段用 1.5% 的胶，大片段用 0.8% 的胶，浓度不对也会模糊 —— 上次跑 200bp 用了 0.8% 的胶，胶太稀，条带扩散，换 1.5% 的胶后就好了。

三、仪器突然断电 / 报错？先排查这 2 个关键

跑胶到一半断电或报错，最让人崩溃，尤其是赶实验的时候。我遇到过 3 次这种情况，总结出 2 个应急方法，能快速恢复实验。

1. 突然断电？先看电源插头和保险丝，别慌着重启

第一次断电时，我直接拔插头重启，结果仪器报错 “电压不稳”，后来才知道要先查原因。现在断电后，我先看插座有没有电 —— 有次是插线板跳闸，推上去就恢复了；再看仪器电源插头松没松，有没有被人碰掉；如果都没问题，打开仪器侧面的保险丝盒，看保险丝有没有烧断（烧断的话会变黑），实验室备几个备用保险丝，换一个就能用，比等电工来快多了。

2. 仪器报错 “过热保护”？先关电源散热，别堆杂物

夏天容易出现过热报错！去年暑假跑胶，仪器突然弹出 “温度过高” 提示，自动关机，我以为是仪器坏了，后来发现是胶槽周围堆了太多试剂瓶，挡住了散热口。现在遇到过热，我先关电源，把仪器周围的东西清走，留 10cm 以上的散热空间，用风扇吹 5 分钟，温度降下来就能重启。如果室温超过 30℃，我会在胶槽旁边放个冰袋，上次这么做，仪器没再过热，跑胶也更稳定。

四、上样时漏液、加错孔？2 个小技巧避免浪费

上样时手一抖，样品漏了或加错孔，珍贵样品就浪费了。我以前上样漏过好几次，现在用这 2 个技巧，上样又快又准。

1. 漏液？先看梳孔有没有裂，胶凝没凝好

梳孔裂了肯定漏液！有次灌胶后没等胶凝好就插梳子，把胶戳出小裂缝，上样时样品顺着裂缝漏到胶槽里，跑出来没条带。现在我插梳子前会检查胶面有没有裂缝，上样时用移液器慢慢推活塞，别太快 —— 如果漏液了，赶紧用吸水纸吸走胶槽里的样品，补加一点缓冲液，只要漏得不多，其他孔的样品还能继续跑。

2. 加错孔？用 “标记法” 定位，别凭记忆

20 个孔的胶槽，很容易加错孔！以前用单道移液器，加着加着就数错了，有次把阴性对照加到阳性样品孔里，结果数据全乱了，得重新做实验。现在我会在离心管架上贴标签，按 “1-20” 编号，上样时盯着胶槽的孔位，用排枪一次加 8 个，加完一列划掉一列，再也没加错过 —— 上次带本科生上样，用这个方法，20 个样品没一个加错孔。

结尾：故障不可怕，怕的是慌了手脚

做电泳实验这么久，我发现大多数故障都不是仪器本身的问题，而是操作时的小疏忽。以前遇到问题就慌，现在知道 “先排查简单原因，再找复杂问题”，5 分钟内基本能解决。
现在我带新手做实验，都会教他们这些技巧，看着他们遇到没条带、条带歪的情况，能自己找到问题并解决，比帮他们处理更有成就感。其实电泳仪没那么 “娇气”，多遇到几次问题，多总结经验，新手也能变成 “故障处理高手”—— 毕竟实验已经够累了，能快速解决问题，就能多省点时间做更重要的事，你们说对吧？


本文由北京六一生物编辑整理。

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