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DYCP-32C 跑胶记:从 5 次废胶到条带清晰

作者:六一生物 发布时间:2025-09-04 09:05:09 点击:
    DYCP-32C跑胶记:从5次废胶到条带清晰,我终于摸清了这台仪器的“脾气”

一、周一上午 9:00 第一次废胶:条带拖成“墨痕”,我归咎于胶浓度

帮师妹跑质粒电泳,这是我第一次用实验室新到的DYCP-32C琼脂糖水平电泳仪。按老经验配了1.0%的琼脂糖胶,点样、通电、120V跑30分钟,结果成像图出来差点没认出——条带像被水泡过的墨汁,拖得老长,超螺旋质粒的亮带糊成一团。

师妹急得眼圈发红:“这是我提了三次的质粒,明天就要转染了。”我拍着胸脯说:“肯定是胶浓度不够,我换高点试试。”从1.2%换到2.0%,连着配了4种胶,跑出来的条带还是拖尾,只是拖得长短不一样。最后一次跑2.0%的胶,条带虽然没那么散,但又窄又淡,根本没法分析。

盯着桌上的5块废胶,我有点泄气——难道是这台仪器不好用?

二、周一下午 2:30 意外发现:槽底的水渍暴露了漏液问题

我抱着DYCP-32C的电泳槽准备去洗,刚拿起就感觉底座有点湿。翻过来一看,槽底边缘有一圈水渍,还黏糊糊的。这时候管仪器的陈老师路过,瞥了一眼就说:“密封垫老化了,漏缓冲液能跑好条带才怪。”

我这才注意到,槽体和底座之间有一圈黑色橡胶垫,边缘已经有点开裂。陈老师说:“DYCP-32C的密封垫是易损件,尤其是新仪器刚用的时候,要是搬运时没放稳,很容易压变形。”他从柜子里找出备用密封垫,教我怎么换:先把旧垫抠下来,用酒精擦干净槽体边缘,再把新垫按凹槽对齐,用手沿着边缘压一圈,确保没有缝隙。

换好密封垫,我往槽里倒了20mL清水,静置3分钟,翻过来一看,底座干干净净,没再漏水。陈老师又提醒我:“缓冲液别加太满,没过胶面1mm就行,加太多会给密封垫增加压力,容易再次漏液。”

三、周二上午 10:15 第二次波折:条带缺了一块,竟是梳子插太深

按陈老师的方法,我用1.0%的胶再跑一次。这次条带拖尾的问题明显好了很多,但新的问题又出现了:第3、4、5孔的条带中间缺了一块,像是点样时没加够样本。师妹说:“我明明每个孔都加了5μL,不可能漏加。”

我把胶板举起来对着光看,缺条带的梳孔底部有一道浅浅的划痕。陈老师过来一看就笑了:“你把梳子插到底了吧?”他指着梳齿说:“DYCP-32C的梳子是扁平的,插太深会戳到槽底,胶凝固后,梳孔底部就没胶了,样本直接漏进槽里,条带自然缺一块。”

他教我一个简单的判断方法:插梳子时,看梳齿底部离槽底还有指甲盖那么厚(大概1mm)就停。这次我按他说的插梳子,跑出来的条带果然完整了,没有再缺块。拔梳子的时候,我之前都是硬拽,这次试着左右轻轻晃了晃,再慢慢拔出来,梳孔边缘也光滑了不少,条带边缘不再毛糙。

四、周二下午 4:00 最后调整:条带歪扭,原来胶没凝固透

解决了拖尾和缺块问题,第三次跑胶,条带终于清晰了,但整体有点歪歪扭扭,像蛇一样弯曲。我又开始怀疑电压,把120V降到100V,结果还是歪。陈老师过来摸了摸胶板,问:“你胶倒进去多久就通电了?”

“大概20分钟吧,看着表面不流动了就点样了。”我回答。陈老师说:“这就是问题所在——胶只是表面凝固,内部还没定型,通电后电场力一拉就变形了。DYCP-32C的槽体比较厚,胶凝固得慢,至少要静置30分钟。”

这次我倒完胶后,定了个30分钟的闹钟。等闹钟响了,用手指轻按胶面,硬硬的不凹陷,才开始点样。点样后,陈老师又让我等5分钟再通电:“让样本沉到梳孔底部,不然电流一冲就歪了。”

五、周三上午 9:30 终于成功:清晰条带背后的3个细节

按这个流程跑出来的条带,终于达到了预期——超螺旋质粒的亮带又直又清晰,杂带少,没有拖尾和缺块。师妹拿着成像图高兴地说:“太感谢了,明天终于能按时转染了。”

回头总结这几次跑胶的经历,我发现其实都是小细节没做好:

1.  用前测漏:每次用DYCP-32C前,先倒点清水测漏,密封垫老化就及时换,缓冲液别加太满;
2.  梳子别插太深:留1mm空隙,拔的时候左右晃一晃,避免损坏梳孔;
3.  胶要凝固透:静置30分钟,点样后等5分钟再通电,给胶和样本足够的准备时间。

以前用老仪器时,这些细节都没太在意,总觉得“差不多就行”。现在才明白,每台仪器都有自己的“脾气”,尤其是像DYCP-32C这样的精密仪器,只有摸透这些细节,才能发挥出它的优势。如果你们也在用DYCP-32C跑核酸电泳,遇到条带问题时,不妨先检查一下密封垫、梳子深度和胶的凝固时间,说不定不用换胶、调电压,就能轻松跑出清晰条带。


本文由北京六一生物编辑整理。

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