如何提高DYCP-36型等电聚焦电泳槽的凝胶制备效率？

作者：六一生物发布时间：2025-10-10 09:04:22 点击：

如何提高DYCP-36型等电聚焦电泳槽的凝胶制备效率？老司机的避坑指南

核心就一句话：把灌胶变成“流水线”，而不是每次都是“艺术创作”。

IEF胶（比如常用的聚丙烯酰胺凝胶）最怕的就是重复性差，今天灌的和明天灌的不一样，那结果根本没法比。提高效率的第一步不是求快，而是求稳。我们实验室的秘诀是：一次性配制足够跑一批胶的母液（比如能灌10块胶的量），按配方精确称量丙烯酰胺、两性电解质、尿素等，然后分装成10个小份，冻在-20℃。每次用的时候拿一管出来化开，加入最后的AP和TEMED。这样能确保你这一批实验的所有胶，起始原料是完全一致的，从源头上杜绝了批间差异，这本身就是最大的效率提升。

“脱水”是隐形杀手：尿素结晶了，一切都白费

配方里动不动就8M尿素的目的是变性蛋白，但尿素这东西特别容易从空气中吸水，或者低温下析出结晶。你肉眼看着溶解了，可能里面还有肉眼看不见的小晶核。我们的土办法是：配溶液时，把所有干粉（尿素、丙烯酰胺等）和两性电解质在烧杯里混合后，别急着加水，先用磁力搅拌器在低速下搅上10分钟，让它们充分混匀。然后再用超纯水定容。之后，溶液一定要用 0.45 μm的滤膜过滤一下！这一步能滤掉那些没溶解完全的微小晶核和杂质，能极大避免灌胶时出现莫名其妙的条纹或空洞。过滤完再分装冷冻。虽然多了两步，但成功率飙升，这才是真效率。

灌胶不是“灌”，是“请”它流进去

DYCP-36的玻璃管又长又细，直接倒着灌胶，百分之百会引入气泡，而且胶面不平。我们用的绝对是“祖传”方法：用一个10mL的注射器（不要针头），吸取化好的胶溶液，然后排空空气。将注射器嘴紧紧抵在玻璃管口的底部，缓缓、匀速地推动活塞，让胶液从管底向上“顶”着灌满。这样，气泡会被自然地推到顶部排出。所有管子灌完后，用微量移液器轻轻在每管顶部加一层水封，确保胶面聚合平整。这个方法，新手练两次就能掌握，一气呵成，几乎从不失手。

聚合温度和时间的“玄学”

别小看聚合过程。AP和TEMED的活性受温度影响巨大。夏天实验室28℃，可能20分钟就凝了；冬天18℃，得等上1个小时。聚合时间不一致，会导致胶的孔径和性能有细微差别。我们的解决方案是：找一个家里淘汰的泡沫盒，灌胶结束后，把所有玻璃管架在盒子里，盖好盖子。这东西保温效果好，能提供一个相对恒温的聚合环境。我们固定在25℃水浴锅里聚合30分钟，这样每次的条件都一模一样，跑出来的胶重复性极高。

最后的效率大招：做好实验记录！

这才是最高级的效率提升。我们有一本专门的IEF灌胶记录本，上面不只记配方。还包括：“今天配的母液批次号、过滤时有没有异常、灌胶时室温多少、用的是哪个批次的AP、聚合了具体多少分钟、最后跑出来的效果如何”。比如有一次条带有点歪，一查记录，发现那天空调坏了，室温31℃，聚合太快了。以后遇到类似情况，我们就知道要把AP量稍微减一点。记录的目的不是为了记流水账，是为了建立你自己的“故障库”和“解决方案库”。下次再出现问题，翻翻本子就能快速定位问题，而不是从头开始瞎猜，这节省的时间是无法估量的。

总之，提高DYCP-36的制胶效率，核心思想是标准化、注重细节、和记录复盘。当你把不可控的因素都变得可控时，你的效率和质量自然就上来了，这才是真正的高级技巧。

本文由北京六一生物编辑整理。

北京六一生物科技有限公司创建于1970年，50多年的历史，公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作，2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。

主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。

如果您对我们的产品有任何问题，欢迎您的来电：400 960 6117

我们的目标是：做生物化学分析仪器行业海尔

标签：