DYCZ-30C双板夹芯垂直电泳仪操作避坑指南：我的血泪史与完美制胶秘籍

作者：六一生物发布时间：2025-11-24 09:17:07 点击：

DYCZ-30C是进行SDS-PAGE和Western Blot的核心装备，但其“双板夹芯”结构对新手极不友好。我至今记得第一次灌胶时，手忙脚乱，最终在实验台上收获了一滩凝固的丙烯酰胺“琥珀”。现在，我把这份用失败换来的“秘籍”倾囊相授。

第一部分：准备工作——洁净是成功的基石

1. 彻底清洗：这是最枯燥也最重要的一步。玻璃板、垫片（Spacer）、梳子必须用实验室专用洗涤剂和软海绵彻底清洗，任何一点蛋白或灰尘残留都会导致脱胶或产生气泡。我的黄金标准：用去离子水冲洗后，玻璃板表面水膜均匀，不挂任何水珠。
2. 正确组装：这是漏胶的头号元凶。

将两块玻璃板（一大一小）对齐，中间夹上两条干净的垫片。

用夹子从两侧和底部牢牢固定。关键检查点：对着光检查玻璃板与垫片的边缘是否紧密贴合，用手轻轻挤压底部，感受是否有错位感。

第二部分：灌胶——与时间赛跑的艺术

配方与催化：根据目标蛋白分子量配制合适浓度的分离胶（如12%）。我的核心教训：务必在所有准备工作（装置组装、试剂摆放）就绪后，再加入最后一种催化剂——TEMED！一旦加入，凝胶聚合的时钟就已启动。

灌胶手法（防漏核心）：

1. 将组装好的玻璃板装置倾斜约30-45度。
2. 用移液器或小烧杯，沿着一侧玻璃板与垫片的缝隙，缓缓地将分离胶溶液注入。秘诀：利用液体的毛细作用和重力让其自然流下，可以极大减少气泡。
3. 当胶液漫过底部并有一定高度后，将其轻轻放平。

封胶与插梳：

在分离胶上轻轻覆盖一层水饱和正丁醇或异丙醇，以压平胶面并隔绝空气。
待分离胶凝固后（通常30-45分钟），倒掉封胶液，用滤纸吸干残留液体。

灌入浓缩胶，然后立即插入梳子。插梳技巧：从一侧倾斜着平稳插入，可以有效避免气泡被困在齿下。如果产生气泡，轻轻拔起梳子再插一次。

“翻车”现场深度复盘：

案例：灌胶中途突然漏液。

原因：夹子未夹紧或垫片有破损、有杂质。
解决：立即用实验室封口膜紧急封堵底部，但成功率不高。最佳策略是预防：组装后，先加入少量水测试是否泄漏，确认无误后再倒掉水进行正式灌胶。

案例：凝胶中出现大量气泡。

原因：灌胶速度太快、太暴力；或灌完后移动了装置。
解决：使用上述的“倾斜缓流法”。如果气泡在非关键区域，可忽略；若在加样孔附近，可用细长的针头在凝胶未完全凝固前将其引出。

结语：操作DYCZ-30C是一项精细手艺，需要耐心和练习。但一旦你掌握了清洗、组装和灌胶这三个核心环节的要点，它就将成为你最可靠的伙伴，为你后续的高质量Western Blot实验打下完美的基础。

本文由北京六一生物编辑整理。

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