DYCP-32A的跨界应用：从严谨的RNA检测到炫酷的荧光蛋白筛选

作者：六一生物发布时间：2025-11-21 09:12:54 点击：

在常规DNA实验之外，我们经常会遇到一些“小麻烦”：抽提的RNA质量如何？转染了荧光蛋白的细胞是否成功？送测序太慢，有没有快速初筛的办法？有一天我盯着DYCP-32A突发奇想：它能不能搞定这些？答案是：能！

跨界应用一：可靠的RNA完整性检测

背景： RNA非常脆弱，极易降解。在进行qPCR、转录组测序等高级实验前，必须评估RNA质量。

方案改造核心：创造无RNase的环境并使用变性胶（虽然不是完全变性，但方法正确足以判断完整性）。

我的实战流程：

1. 去RNA酶处理：这是成败关键！我将制胶和电泳的所有器材（托盘、梳子、电泳槽）用0.1% DEPC水浸泡过夜，然后高温烘烤。同时，配制1x MOPS缓冲液替代TAE/TBE。
2. 制胶：配制1.2%的琼脂糖凝胶，但在熔胶冷却后，我向每40ml胶液中加入了4μL 的GoodView™ 或同等安全的核酸染料（染料耐高温且对RNA无影响）。这样可以避免后续染色步骤带来的RNA降解风险。
3. 电泳：上样RNA后，在低电压（80-100V）下进行电泳，时间不宜过长，看到溴酚蓝跑出约2/3即可。
结果判读：在凝胶成像仪下，完整的真核生物总RNA会显示出清晰的三条带：28S， 18S 和5S。如果28S和18S条带清晰、亮度比约为2:1，且背景干净，说明你的RNA质量非常好。如果条带弥散或比例失常，则说明有降解。

跨界应用二：荧光蛋白阳性克隆的快速初筛

背景：构建了荧光蛋白（如GFP）表达载体并转染细胞后，需要筛选阳性细胞池。用流式细胞仪当然好，但如果样本多或设备不便，电泳初筛是绝佳选择。

方案核心：直接检测细胞裂解液中的荧光蛋白。

我的实战流程：

1. 样本处理：收取部分转染后的细胞，用PBS重悬，然后进行反复冻融或加入少量裂解液以释放胞内蛋白。
2. 制胶与电泳：配制普通的1%琼脂糖凝胶（用TAE即可）。关键点：不加任何染料！将细胞裂解液离心后，取上清直接上样。
3. 电泳与观察：在普通电泳槽（如DYCP-32A）中跑胶，但不需要接通电源太久，只需低压（50V）短时间（5-10分钟），让样品进入凝胶即可。然后，在暗室或避光条件下，用专用的蓝光或紫外激发光源照射凝胶！
神奇的一幕：如果细胞成功表达了GFP，你会在凝胶的加样孔附近或迁移路径上看到清晰的绿色荧光条带！而未转染的对照组则没有。这个方法能让你在几分钟内，从几十个样本中快速锁定阳性样本，大大节省了时间和成本。

思考与总结：

仪器是死的，但人的思维是活的。DYCP-32A作为一个稳定的电泳平台，其应用边界远不止于DNA分析。通过理解实验原理并巧妙改造方案，我们完全可以让它发挥“一机多用”的最大效能。下次当你的实验遇到非常规检测需求时，不妨先想想：我手边的DYCP-32A，能不能帮上忙？

本文由北京六一生物编辑整理。

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