如何判断电泳仪的凝胶是否需要更换？

作者：六一生物发布时间：2025-06-09 09:54:35 点击：

在分子生物学实验中，电泳仪是分离和分析生物大分子的重要工具，而凝胶作为电泳过程的关键介质，其性能直接影响实验结果的准确性和可靠性。然而，不少实验人员常常纠结于同一个问题：如何判断电泳仪的凝胶是否需要更换？用错状态不佳的凝胶，轻则导致条带模糊、数据不准，重则让整个实验前功尽弃。其实，通过观察多个维度的特征，就能轻松做出准确判断。

一、看外观：细微变化藏“玄机”

1. 颜色异常

新制的凝胶通常具有均匀且透亮的外观。以常见的琼脂糖凝胶为例，正常状态下它近乎无色透明；而聚丙烯酰胺凝胶在制备良好时，呈现出均匀的乳白色。一旦凝胶的颜色发生改变，就需要警惕了。如果琼脂糖凝胶出现发黄、发黑的现象，或者聚丙烯酰胺凝胶变得灰暗、失去光泽，这很可能是凝胶发生了化学降解，或者在制备、使用过程中受到了杂质的污染。这些变化会影响凝胶的孔径结构和化学性质，进而干扰样品分子的迁移。

2. 表面形态改变

仔细观察凝胶表面，如果发现干裂、褶皱或者出现明显的孔洞，这是凝胶老化或质量不佳的明显信号。干裂通常是因为凝胶在保存过程中水分过度流失，导致凝胶基质收缩；而褶皱和孔洞可能是由于凝胶在聚合过程中不均匀，或者受到外力挤压、碰撞所致。另外，当凝胶表面变得粗糙、不平整，甚至有絮状物质析出时，也表明凝胶的性能已经受到影响，不再适合继续使用。

二、观实验结果：数据异常是“警报”

1. 条带异常

在电泳完成后，若发现样品条带出现拖尾、模糊、扭曲或者条带分辨率明显降低的情况，排除其他实验因素后，很可能是凝胶的问题。正常情况下，清晰、锐利的条带意味着样品分子在凝胶中能够均匀、稳定地迁移。但当凝胶的孔径大小不一、交联度不均匀时，分子的迁移速度和路径就会受到干扰，从而导致条带异常。例如，分离DNA片段时，原本应该清晰分开的不同大小的DNA条带，却粘连在一起无法分辨，这极有可能是凝胶的质量出现了问题，需要及时更换。

2. 迁移速率偏差

对于已知分子量的标准样品，在相同的电泳条件下，其迁移速率应该是相对稳定的。如果发现标准样品的迁移时间与以往实验结果相比，偏差超过10%以上，并且确认电泳仪的电压、电流等参数设置正确，缓冲液也没有问题，那么就需要考虑凝胶是否已经失效。凝胶的老化会使其内部的阻力发生变化，进而影响分子的迁移速率。

3. 背景染色加深

在对凝胶进行染色处理后，如果发现背景颜色明显加深，出现泛白或者非特异性显色增加的现象，这说明凝胶可能吸附了过多的染料，或者凝胶中的杂质与染料发生了反应。这种情况下，不仅会影响对目标条带的观察和分析，还会导致实验数据的误差增大，此时更换新的凝胶势在必行。

三、算使用情况：次数与时间是“标尺”

1. 使用次数

一般来说，常规的琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶都不建议重复使用。虽然重复使用凝胶可以在一定程度上降低实验成本，但每次使用后，凝胶中的缓冲液成分会发生改变，凝胶的物理和化学性质也会逐渐退化。尤其是对于一些对实验精度要求较高的实验，如基因测序样品的分离、蛋白质纯度鉴定等，即使凝胶外观看起来没有明显变化，也应该坚持单次使用，以确保实验结果的可靠性。

2. 保存时间

如果凝胶制备完成后没有立即使用，而是进行保存，那么需要注意保存时间。未使用的琼脂糖凝胶在4℃的低温环境下保存，一般不超过1周；聚丙烯酰胺凝胶的保存时间更短，通常不建议超过3天。随着保存时间的延长，凝胶会逐渐脱水、变质，微生物也可能在凝胶中滋生，从而影响凝胶的性能。即使在保存期内，再次使用前也需要仔细检查凝胶的外观和状态。

四、凭操作手感：实际体验有“线索”

在制备和使用凝胶的过程中，通过手感也能判断凝胶的质量。正常的凝胶具有一定的弹性和硬度，在将梳子插入凝胶或者取出凝胶进行操作时，能够感觉到凝胶质地均匀，不易破碎或变形。如果在操作过程中，发现凝胶过于柔软、黏腻，像“果冻”一样缺乏弹性，或者轻轻触碰就容易破碎，这表明凝胶在制备过程中可能存在问题，如交联剂用量不足、聚合不完全等，这样的凝胶不适合用于实验，应立即更换。

判断电泳仪的凝胶是否需要更换，需要从外观、实验结果、使用情况和操作手感等多个方面综合考量。在实验过程中，养成仔细观察和记录的习惯，及时发现凝胶的异常变化，果断更换状态不佳的凝胶，才能确保电泳实验顺利进行，获得准确可靠的实验数据。只有每一个细节都做到严谨认真，我们的科研工作才能少走弯路，取得更有价值的成果。

本文由北京六一生物编辑整理。

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