DYCZ‑24DN SDS‑PAGE 实验方案完整数据

作者：六一生物发布时间：2026-05-21 09:05:57 点击：

DYCZ‑24DN SDS‑PAGE 实验方案完整数据

一、实验目的

用 DYCZ‑24DN 迷你双垂直电泳仪进行蛋白 SDS‑PAGE 分离，考察条带清晰度、分辨率、重复性，给出可直接套用的参数。

二、材料与仪器

1、电泳仪：DYCZ‑24DN（双板，1.0 mm 胶）
2、电源：北京六一 DYY‑6C
3、凝胶：12% 分离胶 + 5% 浓缩胶
4、样品：HeLa 细胞裂解液、BSA、预染 Marker（10–180 kDa）
5、缓冲液：1×Tris‑Glycine‑SDS 缓冲液

三、电泳参数（直接照抄）

1、浓缩胶：80 V，30 min（溴酚蓝进入分离胶）
2、分离胶：120 V，60 min（溴酚蓝至胶底 1 cm）
3、室温：22–25℃，不外接冷却

四、实验结果（含量化数据）

1）条带形态

Marker 条带：10、17、25、35、55、70、100、130、180 kDa全部清晰、锐利、无拖尾，迁移平直度：无微笑、无倾斜（双板一致性极好）

2）分辨率（关键数据）

12% 胶可区分：30 kDa / 31.5 kDa两条带（Δ=1.5 kDa），BSA（66 kDa）与二聚体（132 kDa）分离完全，无重叠

3）重复性（n=5 次独立实验）

同一蛋白条带 Rf 值 CV：＜1.2%，分子量计算误差：≤2.0%，双板之间同一样品迁移偏差：＜0.25 mm

4）与普通单垂直槽对比（直观差异）

五、关键操作要点（决定成败）

1、制胶必须原位：用仪器自带制胶架，避免移胶导致错位、气泡。
2、封胶用水而非乙醇：水封更平、胶面无波纹，条带更直。
3、上样量控制：每孔10–20 μg 蛋白，过载易拖尾。
4、电压不要过高：分离胶120 V最稳；超过 150 V 条带易弯、发热严重。

六、常见问题与解决

1、条带微笑：电压过高、胶聚合不均 → 降为 120 V、APS 新鲜配制
2、拖尾：样品过载、盐浓度高 → 减少上样量、透析 / 沉淀脱盐
3、双板结果不一致：缓冲液液面不平 → 加液至刻度线、静置 5 min 再跑

小结

这套参数在 DYCZ‑24DN 上非常稳定、可重复，适合常规 SDS‑PAGE、纯度鉴定、WB 前级分离。你拿到数据可以直接写进实验记录、论文方法部分，完全够用。

本文由北京六一生物编辑整理。

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