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DYCZ-27B型圆盘电泳仪实用指南

作者:六一生物 发布时间:2025-07-17 10:14:19 点击:
    北京六一仪器厂生产的DYCZ-27B型圆盘电泳仪,是我们实验室做管状凝胶电泳的“主力选手”,它既有科研需要的精确性,又适合教学演示,新手也能很快上手。这款仪器最核心的就是那个不连续电泳系统,通过缓冲液成分、pH梯度和凝胶孔径的三重差异,把生物分子分得清清楚楚。名字里的“圆盘”不仅说的是分离出的区带形状,还藏着“disc electrophoresis”(不连续电泳)的技术门道呢。

一、核心特点与结构设计

用了这么多电泳仪,DYCZ-27B的制胶装置最让我惊艳。以前用老式圆盘电泳仪制胶,简直是“噩梦”——灌胶时气泡总冒个不停,12根玻璃管的胶面高低不一,新手经常要重做。但这款仪器优化了灌胶结构,密封得特别好,按步骤灌分离胶、加浓缩胶、插梳子,全程顺顺当当。上次带本科生做实验,他们第一次制胶就成功了,没有一根管子漏胶,气泡也少得可怜。

它的模块化设计特别省空间,上电泳槽、下电泳槽和铂金电极盖组装起来稳稳当当,外形尺寸170mm×170mm×235mm,放在实验台角落一点不占地方,2kg的重量我一个人就能轻松搬到通风橱。标准配的12根玻璃管是5mm内径的,长度有90mm和170mm两种可选。我做常规实验爱用90mm短管,1-2小时就能跑完;要分离复杂样品就换170mm长管,虽然得多跑半小时,但条带分得更开更清晰。

上次测微量蛋白,特意选了1mm内径的微型玻璃管,上样量虽小但信号很清晰,看来选对管子规格太重要了。仪器的缓冲液总容量大概1000ml,我们一直用Tris-Glycine系统,上槽pH8.3、下槽pH8.9,配一次够跑两批实验,挺省试剂的。那对铂金电极质量很好,用了三年多电场分布还很均匀,这可是实验结果重复好的关键——之前用过别的仪器,电极氧化后不同管子的条带跑得乱七八糟。

市场上这款仪器大概2280元,比进口品牌便宜一半多,性能却一点不逊色,对我们这种预算有限的实验室太友好了。

二、标准操作流程

凝胶制备:电泳成功的“第一道关”

每次制胶前,我都会把玻璃管彻底洗干净——用软毛刷蘸去离子水刷两遍,管口内侧的小污渍用棉签擦,洗完倒立晾干。有次图省事没洗干净,残留的缓冲盐让凝胶聚合得坑坑洼洼,条带都跑变形了。

按样品分子量配丙烯酰胺浓度:分离30kDa以下的小蛋白用12%-15%的胶,50kDa左右的用10%,大分子蛋白就用7%-8%。加TEMED和APS时要像调鸡尾酒一样轻轻晃,别用力摇,不然满管子气泡。灌分离胶时用5ml注射器沿管壁慢慢打,液面离管口2cm停手,立刻覆一层0.3-0.5cm的去离子水(千万别用枪头戳胶面),这样胶面能压得平平整整。

等30-60分钟聚合完成,看到胶面和水层间有条清晰的线,就倒掉水,用吸水纸轻轻吸干残留液体。接着灌浓缩胶,插梳子时要垂直插到底,别歪歪扭扭的,不然上样孔会变形。我通常在浓缩胶上也覆一层水,聚合更快更均匀。

三、电泳运行:这些细节别忽视

1. 装管密封:把凝胶管插进下槽的橡胶塞时,要轻轻旋转着推到底,确保底部密封不漏水。有次没插紧,缓冲液漏了一半,电流忽高忽低,条带跑得一塌糊涂。
2. 加缓冲液:先加下槽缓冲液到没过电极,再装上槽,加缓冲液至完全覆盖凝胶顶端,液面要没过电极丝,不然导电不好。
3. 电极连接:红色接正极、黑色接负极,这个千万别搞反!上次新来的师妹接反了,样品全跑到凝胶顶部,白忙活一下午。
4. 电压设置:刚开始用80-100V让样品浓缩,看到溴酚蓝进入分离胶(大概30分钟),就调到150-200V。夏天室温高时,我会在电泳槽外裹个冰袋,防止温度太高胶变形。
5. 进程监控:溴酚蓝是最好的“指示剂”,等它跑到离管底1-2cm时就可以停了,一般1-2小时完成。别跑太久,不然小分子蛋白会跑出胶外。

四、安全操作:这些“红线”不能碰

丙烯酰胺单体有神经毒性,配胶时必须戴手套在通风橱操作,溅到皮肤上要立刻用大量清水冲洗。通电后绝对不能碰电极和缓冲液,上次有个学生没关电源就想调整管子,手一碰到缓冲液就被电了一下,还好电压不高没出事。电泳结束要先把电源调零,再断开连接线,安全第一。

取凝胶有个小技巧:用注射器沿管壁注入少量去离子水,轻轻旋转玻璃管,让凝胶和管壁分离,然后用镊子夹出来立刻染色。考马斯亮蓝染色方便快捷,银染灵敏度高但步骤多,新手建议先从考马斯亮蓝开始练手。

五、应用场景与选购建议

1、适用场景很广泛

在教学实验里,这款仪器特别受欢迎。12根玻璃管刚好够6组学生用,能同时展示不同样品的分离结果,学生能直观看到分子大小、电荷对迁移率的影响,比课本上讲的生动多了。

科研中它也很实用,我们常把它当双向电泳的第一向工具,先做初步分离再进一步分析。抗体纯度检测、酶提取物组分分析这些常规实验用它也足够了,结果可靠又稳定。

2、选购实用小贴士

- 常规分析选5mm内径的标准配置就行,性价比最高;
- 做微量检测就选1-2mm内径的管子,但上样时得更小心;
- 电源配DYY-4C型就够用,稳定且操作简单;
- 教学用选基础配置,科研实验室可以多备几种规格的玻璃管,灵活应对不同实验。

3、日常维护:延长寿命有妙招

每次用完后,电极和电泳槽要用去离子水冲干净,特别是电极上的缓冲盐结晶,不然会腐蚀电极。玻璃管洗完要倒立晾干,长期不用就放进专用试管架垂直存放,别堆在抽屉里被压弯。我还会定期检查电极线有没有破损,接触不良及时处理,这样仪器能用好几年。

总的来说,DYCZ-27B型圆盘电泳仪是款“经济实惠又好用”的设备。它操作不复杂,结果稳定,价格亲民,特别适合预算有限但重视实验质量的教学实验室和基础科研团队。只要掌握制胶和电泳的关键步骤,避开那些常见的“坑”,它能帮你做出不少靠谱的实验结果。


本文由北京六一生物编辑整理。

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