DYCZ-25E型P4垂直电泳仪实战指南

作者：六一生物发布时间：2025-07-21 09:33:35 点击：

第一次用DYCZ-25E跑胶时，我差点因为没卡紧玻板漏了半槽胶。但现在它成了我最信赖的实验伙伴——4块胶同时运行的效率，让我再也不用为赶数据通宵守在实验室。这份DYCZ-25E型P4垂直电泳仪实战指南汇总了我们实验室三年来的操作经验，从新手必知的基础操作到高手才懂的优化技巧，帮你快速掌握这款"劳模设备"的使用精髓。

一、为什么实验室都在用这款电泳仪？

第一次见到DYCZ-25E时，我正在为毕业论文的20组样本发愁。师兄笑着说："试试这个四胶联跑神器，保证你三天出结果。"这款北京六一生物研发的垂直电泳仪，确实凭实力征服了我们实验室：

它的高通量设计太适合批量实验了。以前用单胶电泳仪跑32个样品，得分4批跑两天，现在4块胶一次搞定，从制胶到出结果只要6小时。临床组的老师更离不开它，批量检测血清样本时效率比以前提升70%，还能保证结果一致性。

对新手特别友好的是它的玻板设计。传统凹形玻板我平均每月碎两块，而DYCZ-25E把封边垫条直接固定在玻板上，三年来我只不小心摔碎过一块。上次带本科生实验，连最手笨的同学都没出现玻板破损。

二、实验前的准备：细节决定成败

1. 安全第一，这些坑别踩

戴手套护目镜不是小事！有次师妹没戴手套直接倒缓冲液，Tris-甘氨酸溅到手上起了红疹。电极槽积水也是隐患，上次保洁阿姨擦桌子时没注意，差点因为漏电跳闸。每次用前务必检查电源线是否有破损，特别是接头处。

2. 耗材选择的门道

凝胶厚度选对事半功倍：分离小分子蛋白或做精细分析，1.0mm厚度的胶条带更锐利；处理大样本量或需要回收蛋白，1.5mm厚度承载量更大。我们做肿瘤组织蛋白分析时，用1.0mm胶能清晰分开45kDa和50kDa的蛋白亚型。

缓冲液必须新鲜配制！重复使用三次以上的缓冲液跑出来的条带会模糊发虚。SDS-PAGE的缓冲液里SDS浓度一定要准，上次配液时少加了一半，结果蛋白跑成了" smear"状，重新配液才解决问题。

3. 设备组装的关键步骤

玻板安装有个小技巧：两块玻板对齐后要听到"咔嗒"声才算卡紧，没卡到位灌胶必漏。我第一次操作时没卡紧，分离胶顺着缝隙流了一槽，清理了半小时还耽误了实验。

缓冲液用量要精准：4块胶模式需加1200ml，液面必须没过电极丝2cm以上，否则会影响电流传导。加液时用漏斗沿槽壁缓慢倒入，别冲起底部的杂质。

三、实战操作：避坑指南

1. 灌胶——从"翻车"到稳定输出

分离胶灌装要像"倒红酒"一样轻柔，用1ml枪头沿玻板内侧缓慢注入，速度快了容易产生气泡。有气泡别慌，用枪头轻轻戳破，或者倾斜玻板让气泡浮到液面。浓缩胶要等分离胶完全凝固（至少30分钟），倒去表面的水层后，用滤纸吸干水分再灌，否则两层胶会分层。

灌胶时间可以这样安排：第一块胶灌完分离胶后，马上组装第二块胶的玻板，利用等待凝固的时间准备下一块，4块胶全部灌完只需1小时，效率超高。

2. 上样——精准度决定条带质量

样品预处理不能偷懒：95℃变性5分钟后，一定要12000g离心5分钟，取上清上样，否则沉淀会堵塞加样孔。上样时枪头要垂直对准样品槽底部，缓慢推出液体，太快会导致样品扩散。新手建议先用预染Marker练习，掌握力度后再上珍贵样品。

加样量要根据胶厚度调整：1.0mm胶每孔别超过20μl，1.5mm胶可加到30μl，但都不能溢出，否则相邻样品会交叉污染。上次做临床血清样本时，有个孔加太满，结果两条带连在了一起，只能重新实验。

3. 电泳参数设置的黄金法则

我们经过多次测试，总结出最佳参数：恒压300V跑25分钟，条带最清晰整齐。夏天室温高时，可降到250V跑35分钟，避免温度过高导致条带扩散。电泳过程中如果发现槽体发烫，摸起来超过40℃，要及时暂停散热。

遇到紧急情况别慌：若发现缓冲液泄漏，立即按电源开关断电，检查玻板是否错位，重新卡紧后补充缓冲液再继续。上次跑胶时听到"滋滋"声，断电后发现是电极丝接触不良，用砂纸打磨后恢复正常。

四、那些说明书没告诉你的技巧

"偷时间"秘籍

利用凝固时间差高效操作：当第一块胶的分离胶开始凝固时（约15分钟），开始灌第二块胶的分离胶；等最后一块胶的分离胶凝固时，刚好可以开始准备浓缩胶，整个制胶过程无缝衔接，比按部就班节省1小时。

条带模糊？这些原因要排查

缓冲液重复使用别超过3次，离子强度下降会导致条带模糊。电极接触不良也是常见问题，每月用砂纸打磨电极接口一次，保证导电良好。还有个隐藏原因：胶没完全凝固就开始电泳，条带会出现"波浪纹"，一定要等浓缩胶完全凝固（至少20分钟）。

切胶回收的隐藏技能

紫外照射前先用冷光源定位目标条带，减少DNA损伤。切胶时用新的手术刀，每切一个样品换一次刀片，避免交叉污染。回收的胶块立即放入裂解液，别在紫外下暴露过久，否则会影响后续实验。

五、保养与故障排查

日常维护要做好

每次实验结束后，用去离子水冲洗电极槽，特别要清理电极丝上的结晶，否则会影响导电性。玻板用完后用软布擦干，竖直放在玻板架上，别叠放挤压，防止变形。

每月做一次深度保养：用70%乙醇擦拭玻板卡槽和电极接口，去除氧化层；检查封边垫条是否有磨损，发现老化及时更换，避免漏胶。

六、写在最后：你的实验伙伴

DYCZ-25E型P4垂直电泳仪就像实验室里默默付出的伙伴，你对它用心，它就给你稳定的回报。从新手到高手的路上，难免会遇到漏胶、条带模糊这些问题，但每次解决后都是经验的积累。

如果你刚入手这台仪器，建议先从单胶模式练手，熟悉操作后再尝试四胶联跑。记住：规范操作+定期保养，能让它陪你完成更多实验，发表更多论文。

本文由北京六一生物编辑整理。

北京六一生物科技有限公司创建于1970年，50多年的历史，公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作，2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。

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