第一次独立碰电泳仪那天，我站在实验台跟前，手里攥着说明书直冒汗。玻璃板怎么卡进架子里？缓冲液加多少才算够？电压调 100V 还是 120V？光琢磨这些就耗了快一小时，最后好不容易启动仪器，跑出来的条带歪得像条蚯蚓。后来跟师兄吐槽，他笑着说："谁第一次用不手忙脚乱？我当年还把电极接反过呢！"

其实电泳操作真没那么玄乎，就像学系鞋带，练几次就顺了。这篇文章把我踩过的坑、记的笔记全掏出来，每个步骤都带着实验室的烟火气，新手照着做，保准能少熬几个通宵。

一、实验前准备：这些东西千万别少

1. 耗材清单（附我踩过的采购坑）

 

物品	我用的型号	新手一定要注意的事
电泳槽	六一 DYCZ-24K 双板	买的时候认准 "红正黑负" 标识，我室友那台没标，接反三次才发现
电源	DYY-6C	必须能调电压，别买那种固定 100V 的，灵活度太差
琼脂糖	生工的分子级	别贪便宜买分装的，有次买到掺了杂质的，条带全是毛刺
缓冲液	10×TAE 浓缩液	提前一天稀释成 1×，别临上场才弄，手忙脚乱容易配错
上样缓冲液	6×Loading Buffer	记得看保质期，我用过过期的，指示剂跑着跑着就没色了
核酸染料	GoldView	放 4℃冰箱！夏天没放冰箱，一瓶全失效了，心疼死
玻璃板	配套 10×8cm 的	用完赶紧擦，留着指纹下次制胶准漏
梳子	10 孔 1.0mm 的	千万别买错厚度！我第一次买成 0.7mm 的，上样时样品全溢了

采购小故事：第一次买耗材，我在网上搜 "电泳梳子"，看图片长得都一样就随便下单了。结果收到货才发现，孔深只有 2mm（正常得有 5mm），上样时稍微多加点就流到隔壁孔，白瞎了我熬了一晚上提的样品。后来才知道，得跟卖家说清楚 "要核酸电泳用的厚梳子"。

2. 试剂配制（附我记在本子上的步骤）

（1）1×TAE 缓冲液（500mL）

我一般提前一天配，50mL 10× 浓缩液倒进烧杯，再倒 450mL 超纯水（别用自来水，里面的杂质能让条带变形）。用玻璃棒搅一分钟，拿 pH 试纸测测，8.0 左右正好，高了滴两滴盐酸，低了就加点点氢氧化钠。装在那种棕色瓶子里，放 4℃冰箱，用一个月没问题。

（2）1% 琼脂糖凝胶（50mL）

称 0.5g 琼脂糖，我总怕称不准，每次都多称一点点，比如 0.51g，反正误差不大。倒进 50mL 1×TAE 里，用保鲜膜把烧杯口封上（不然微波炉加热时容易溅出来，烫过一次才长记性）。
微波炉中高火转 1 分钟，拿出来晃晃，再转 30 秒，直到里面没颗粒。放实验台上凉一会儿，用手摸摸烧杯壁，不烫手但还温热（大概 55℃）的时候，加 5μL GoldView，慢慢晃匀 —— 千万别使劲摇，容易出气泡。
温度小技巧：凉胶的时候我总盯着手机计时，5 分钟摸一次，差不多 10 分钟就到 55℃了。第一次没经验，胶刚烧开就倒，结果把梳子烫变形了，孔全粘在一起。

二、核心操作步骤：从制胶到上样的黄金 40 分钟

1. 装板与制胶（15 分钟）

玻璃板擦干净，对齐了卡进黑色的制胶架里。两边的夹子别拧太死，上次我使劲拧，咔嚓一声碎了块玻璃，师兄说 "差不多就行，太紧反而容易漏"。
对着光看看玻璃板底部，要是有透光的缝，就剪条透明胶带贴上。倒胶的时候慢慢沿着板壁倒，别咕咚一下子倒进去，容易出气泡。倒到离顶部还有一指宽就停，赶紧把梳子插进去 —— 记得要垂直插，歪了孔就斜了，条带也会跟着歪。

我一般插完梳子就搬个凳子坐在旁边守着，20 分钟胶才凝固。有次跑去玩手机忘了看，胶都干硬了，梳子拔不出来，硬拽把胶扯碎了。

2. 装槽与加缓冲液（10 分钟）

胶凝固后，用手捏住梳子两边轻轻晃，晃松了再拔，别硬拔！第一次我直接往上提，把孔道扯得乱七八糟，样品全跑混了。
把玻璃板放进电泳槽里，记得胶要朝下。加缓冲液的时候，我总先用洗瓶沿槽壁慢慢倒，加到液面没过胶面 1mm 就行 —— 别加太多，上次倒太满，上样的时候样品一进去就漂起来了。
省钱小窍门：缓冲液可以回收，跑完样倒回瓶子里，下次还能再用一次（别超过两次，不然条带会拖尾）。

3. 样品处理与上样（15 分钟）

样品管拿出来，先在手心搓几下解冻，然后加 Loading Buffer——5μL 样品加 1μL buffer，比例别错。用枪轻轻吹打几下，放离心机里甩 10 秒，让液体都沉到底部。
上样是最考验手稳的活儿。我第一次拿移液器，手抖得跟筛糠似的，枪头刚对准孔就把样品洒外面了。后来师兄教我："把胳膊肘搁在实验台上，枪头离孔 1 毫米，慢慢按按钮。" 练了三次才找准感觉，现在 10 个孔三分钟就能上完。

关键提醒：每个样品换个枪头！千万别图省事重复用，污染了哭都来不及。我见过有人这么干，结果所有样品都跑出一样的条带，白忙活三天。

三、电泳运行：参数设置与实时监控

电源插上电，红色电线接电泳槽的 "+"，黑色接 "-"—— 这个一定要看清楚！上次隔壁组的师妹接反了，跑了半小时才发现，样品全沉在孔里没动。
我一般设 120V，30 分钟。记得第一次想快点出结果，设了 200V，跑的时候听见滋滋响，胶都发烫了，条带跑成一团糊。后来问师兄，他说："核酸电泳就认 120V，这是老祖宗传下来的数，别瞎改。"
启动后盯着看 30 秒，电极那里冒小气泡就对了。中间每隔 10 分钟瞅一眼，溴酚蓝（蓝色的指示剂）慢慢往下跑，速度大概 10 分钟跑 1cm。要是跑不动，可能是缓冲液不够，赶紧断电补点。

四、收尾与结果分析：从拆胶到拍照的正确姿势

看到指示剂跑到胶的三分之二处，就可以关电源了。戴着手套把玻璃板取出来，用塑料铲从边缘慢慢撬开 —— 千万别用金属的，容易刮坏玻璃。
把胶滑到托盘里，拿去成像仪拍照。第一次用成像仪，不知道怎么调曝光，拍出来要么太亮要么太暗，后来师兄说："就用自动模式，新手别瞎调参数。"
胶拍完照就扔专用垃圾桶，记得洗手！染料有毒，上次我没洗手就拿东西吃，拉了一下午肚子。

五、新手常见问题（附我踩过的坑）

 

问题现象	我怎么搞砸的	后来怎么解决的
条带拖尾	琼脂糖放少了，0.5% 的胶太稀	改成 1% 的胶，电压降到 100V 慢慢跑
孔道撕裂	梳子插太深，快戳到底了	插的时候留 0.5cm 空隙，拔的时候左右晃着拔
没条带（啥都没有）	忘加染料了，跑完啥也看不见	现在制胶时旁边放张便签，写 "加染料"
条带歪向一边	电泳槽没放平，一边高一边低	垫了本厚厚的书把低的那边垫平，条带立马直了
背景太亮	染料加太多，想让条带清楚点	严格按比例加，50mL 胶加 5μL 就够了

六、实战心得：师兄师姐没教的 6 个小窍门

1. 玻璃板擦的时候用镜头纸：普通卫生纸会留毛絮，上次胶里的小杂质就是这么来的
2. 梳子用完泡在水里：不然残留的胶会粘住，下次用的时候孔里全是疙瘩
3. 上样前把样品离心：底部的杂质别吸进去，不然孔会堵
4. 缓冲液别用太久：夏天最多用两次，天热容易长菌，条带会出杂带
5. 记个实验小本本：把每次的电压、时间、条带情况记下来，下次出问题能对比
6. 别怕问人：我当初硬撑着不请教，结果一个简单的漏胶问题，自己捣鼓了两小时

结尾：其实你比自己想的更厉害

现在还记得第一次跑出清晰条带那天，我拿着成像图跟师兄炫耀，他笑着说："你看，不难吧？刚开始我还以为你得练一个月呢。"
真的，电泳仪没那么娇气，它就是个帮你干活的工具。别害怕，准备好东西，一步步做，你会发现：原来自己也能把实验做得这么漂亮。下次再有人问你 "电泳难不难"，你可以笑着说："就那样吧，比做饭简单多了。"


本文由北京六一生物编辑整理。

北京六一生物科技有限公司创建于1970年，50多年的历史，公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作，2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。

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