DYCZ-MINI 2 凝胶配方：一份新手避坑指南

作者：六一生物发布时间：2025-10-09 09:10:01 点击：

DYCZ-MINI 2 凝胶配方这机器用的就是最经典的10mL体系，胶不厚不薄，跑起来又快又漂亮。配胶的核心就一个公式：“30%丙烯酰胺母液 + 水 + 缓冲液 + AP + TEMED”。别慌，我刚开始也记不住，实验室冰箱上都贴着一张快摸烂了的配方表。你配个三五回，肌肉记忆就形成了。

浓度怎么选？这事儿得看蛋白分子量！

• 8%胶：这是给大蛋白（＞100 kDa）准备的“宽广大道”。孔径大，分子筛效应弱，让大个子能慢慢挤过去。跑个120kD的蛋白，你用12%的胶它能给你跑一上午，用8%可能一个多小时就到底了。

• 12%胶：万能胶，我们实验室用得最勤。最适合50-100 kDa这个范围的蛋白，比如啥GAPDH（~37kD）、β-actin（~42kD），绝大部分目标蛋白都在这个区间，分辨率杠杠的。

• 15%胶：这是给小蛋白（＜30 kDa）准备的“精密筛子”。孔径极小，能把小分子蛋白分得清清楚楚。但胶脆，倒的时候要更小心，而且跑的时间也长。

别死记硬背！我给你个“万能计算公式”

实验室冰箱上贴的表万一丢了咋办？自己算！记住这个：

你需要丙烯酰胺母液的体积（mL） = 所需浓度 ÷ 30% × 10mL
比如，你要配个10%的胶：10% / 30% * 10mL ≈ 3.33 mL的母液。剩下的体积，用双蒸水、缓冲液去补足到10mL就行了。有了这个心算能力，你就出师了。

最关键的两步：AP和TEMED——胶的“灵魂”

• AP（过硫酸铵）：这是引发剂。必须用现配的！或者最多用一周内4℃保存的。你拿瓶放了大半年的来用，结果就是胶凝不了，或者凝得慢吞吞，全废了。我们习惯把它分装成小管冻在-20℃，用一管拿一管。

• TEMED：这是加速剂。这东西贼猛，一见AP就疯狂干活。它一定要最后加！而且加完之后，动作一定要快！立马混匀，立马灌胶！你要是加完TEMED还在那慢悠悠地吹泡泡，胶就在瓶子里凝固了，哭都来不及。

最后一点，也是血泪教训：灌胶手法！

灌分离胶时，液面加到距矮板顶端1.5cm左右就够了！然后，必须立刻用无水乙醇或异丙醇液封！沿着矮板壁慢慢加，让醇类液体轻轻压在胶面上，这一步能压平胶面并隔绝氧气，让胶凝得平平整整。等个十几分钟胶凝了，把醇倒掉，用滤纸把水吸干，再灌浓缩胶插梳子。这一步做不好，胶面就是斜的，跑出来的条带能歪到姥姥家。

切记：TEMED用量可微调！夏天室温高，少加一点；冬天室温低，多加一点。新手按表操作最稳。

本文由北京六一生物编辑整理。

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