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DYCZ-30C电泳仪使用避坑指南:资深用户总结的20个关键注意事项

作者:六一生物 发布时间:2025-10-24 09:10:42 点击:
   在实验室摸爬滚打多年,我发现90%的电泳问题都不是仪器本身的质量问题,而是源于一些容易被忽视的操作细节。今天就以DYCZ-30C这款经典电泳仪为例,总结一份"避坑指南",希望能帮大家少走弯路。

一、实验前的准备工作:细节决定成败

1. 组件检查要仔细

玻璃板边缘是否有缺口?哪怕0.5毫米的缺口都可能导致漏液

垫片是否平整无弯曲?变形的垫片等于漏液的"定时炸弹"

梳子齿是否完整?缺齿会导致上样孔变形

2. 清洁工作要彻底

玻璃板清洗后建议用压缩空气吹干,避免纤维残留

重点检查密封条凹槽,这里最容易藏匿凝胶碎片

3. 组装顺序要规范

推荐操作流程:

① 垫片放置 → ② 薄玻璃板对齐 → ③ 从下往上卡紧夹子 → ④ 垂直插入电泳槽 → ⑤ 安装压力夹

二、配胶环节的常见误区

4. 丙烯酰胺溶液要现用现配

存放超过3个月的溶液聚合效果会变差

建议标注配制日期,过期坚决不用

5. 催化系统比例要精确

AP和TEMED的量不是越多越好,过量会导致胶脆易裂

温度低时适当增加TEMED,温度高时相应减少

6. 灌胶技巧要掌握

分离胶灌至距梳齿下端1厘米处最佳

水封层要轻柔缓慢,避免冲散凝胶界面

7. 拔梳时机要恰当

聚合完成后放置30分钟再拔梳,效果更佳

拔梳前用缓冲液润洗上样孔,可有效去除残留

三、上样和电泳过程中的关键点

8. 上样技巧要注意

枪头尖端不要插入上样孔太深

样品要缓慢推出,避免冲散邻孔样品

空白孔用等体积上样缓冲液填充

9. 电泳参数设置要合理

常规SDS-PAGE建议采用恒压模式

浓缩胶电压80-100V,进入分离胶后调至120-150V

预染蛋白marker可作为迁移指示剂

10. 异常情况处理要及时

遇到以下情况请立即停止电泳:

缓冲液大量漏液

电流异常升高(可能是短路)

泡沫大量产生(说明极性接反)

四、日常维护的注意事项

11. 清洁保养要定期

每次用完必须立即清洗,避免凝胶干涸

电极丝用乙醇棉签轻轻擦拭,避免用力拉扯

12. 存放环境要合适

组件要晾干后存放,避免潮湿环境

建议专用收纳盒分类存放各组件

13. 耗材更换要及时

密封条出现老化裂纹立即更换

垫片使用50次后建议更新

五、特殊实验的特别注意事项

14. 磷酸化蛋白检测

需要使用专用的磷酸化蛋白电泳缓冲液

建议在冰浴条件下进行电泳

15. 大分子量蛋白分离

可适当降低丙烯酰胺浓度

电泳时间需要相应延长

16. 二维电泳样品制备

需要使用高纯度的试剂

建议加入适量的蛋白酶抑制剂

六、实验室安全须知

17. 个人防护要做好

配制丙烯酰胺溶液必须戴手套

电泳操作时建议佩戴防护眼镜

18. 废液处理要规范

电泳缓冲液需收集后统一处理

凝胶要作为危险废弃物处理

19. 用电安全要注意

确保电泳槽干燥后再连接电源

不要在电泳过程中移动仪器

20. 应急措施要掌握

缓冲液溅入眼睛立即用大量清水冲洗

发现漏电立即切断电源

七、实用小技巧分享

1、快速检测方法:

组装完成后可先用去离子水试漏

每次记录电泳参数,建立实验室标准流程

2、常见问题自检:

条带歪斜:检查凝胶是否均匀聚合

条带扩散:降低上样量或优化电泳条件

背景过高:考虑膜转移条件或抗体浓度

结语

使用DYCZ-30C电泳仪是个技术活,但更是个细心活。记住:标准化的操作流程+细致的日常维护=漂亮的实验结果。希望这份总结能帮助大家提高实验效率,让电泳不再成为科研路上的绊脚石。

温馨提示:建议将本指南打印出来贴在实验室醒目位置,方便随时查阅。也欢迎大家分享自己的使用心得,共同完善这份指南。


本文由北京六一生物编辑整理。

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