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DYCP-31BN型琼脂糖水平电泳仪操作全攻略:从菜鸟到熟练工的必经之路

作者:六一生物 发布时间:2025-11-19 09:08:25 点击:
    刚接触DYCP-31BN这款电泳仪?别被一堆零件吓到。本文以一名实验猿新手的视角,手把手带你完成第一次完美跑胶,并分享那些我踩过的坑,让你快速上手,告别条带模糊、跑歪的尴尬。

还记得我第一次面对DYCP-31BN这台仪器时,看着电泳槽、梳子、托盘一堆东西,心里直发怵。看说明书太枯燥,问师兄师姐又怕被嫌弃……经过大半年的“摸爬滚打”,我终于把它摸透了。今天,我就把我的“血泪史”整理成这份最贴地的全攻略,带你轻松通关。

第一部分:开箱与“第一印象”

DYCP-31BN是实验室的经典款,设计很朴实。拿到手,我们先清点“家当”:

主体电泳槽(带电极)。
凝胶托盘(制胶的平台)。
样品梳(形成上样孔的模具)。
两端挡板(封边用的)。

我的第一个思考: 这东西干不干净?所以第一步永远是清洗! 用去离子水轻轻冲洗各部分,尤其是凝胶托盘和梳子,然后用纸巾擦干。任何残留都可能影响后续制胶和电泳效果。

第二部分:手把手制胶(最关键的步骤!)

案例实操: 今天我需要分离一段1000bp左右的DNA片段。

1.  配琼脂糖溶液: 我称量了0.3g琼脂糖粉末,倒入锥形瓶,再加入30ml的1x TAE电泳缓冲液(最终浓度1%)。这里有个坑: 液体不要超过锥形瓶的一半,否则微波加热时容易暴沸喷出,非常危险!
2.  加热溶解: 放入微波炉,中高火加热1分钟,取出小心晃荡(烫!),再加热30秒,直至溶液完全清澈透明,没有颗粒。
3.  冷却: 这是新手极易忽略的一步!刚取出的胶液温度很高,直接倒入托盘会使托盘变形,甚至烫坏。我通常放在室温下冷却到手背感觉温热(大概60℃),时间紧迫时,可以用自来水冲洗瓶壁外部加速冷却。
4.  倒胶: 在托盘两端卡好挡板,插入合适的梳子(我一般用8孔或10孔的)。将冷却好的胶液缓缓倒入托盘,确保没有气泡。如果真有气泡,可以用枪头把它戳破。
5.  凝固: 室温静置20-30分钟。如何判断胶凝好了? 我看两个地方:一是胶体变得半透明不流动,二是梳子齿周围会有一圈明显的折射光晕。切忌心急,没凝好的胶一拔梳子就全毁了。

第三部分:上样与电泳

1.  搭建电泳系统: 胶凝好后,轻轻拔出梳子,动作要垂直向上,温柔点。取下两端挡板,将整个托盘放入电泳槽。槽内加入足量的1x TAE缓冲液,液面以刚没过胶面1-2mm为宜。太浅会导致导电不均,太深会使样品扩散。
2.  点样: 这是我的“高光时刻”。取5μL DNA样品,与1μL 6x Loading Buffer混匀。用微量移液器吸取混合液,Tip头尖端小心伸入加样孔内,缓慢地将样品推出。关键技巧: 左手可以轻轻扶着右手的移液器,防止抖动;样品会因比重大自然沉入孔底。千万注意别戳破孔壁,否则样品会漏,条带就难看了。
3.  盖盖通电: 盖上电泳槽盖子,确认电极(红对红,黑对黑)连接正确。设置电泳参数:我通常用120V恒压,跑20-30分钟。看到 Loading Buffer里的溴酚蓝条带跑过胶的2/3时,就可以停止了。

第四部分:结果观察与“翻车”现场复盘

跑完胶,在凝胶成像仪下观察。一条条清晰的DNA条带,就是对我们最好的奖励。

但我翻过车:

案例1:条带模糊、拖尾。 原因:琼脂糖浓度不对或DNA降解了。后来我学会了根据DNA片段大小选择合适的胶浓度(0.8%-2%)。
案例2:条带跑歪了。 原因:缓冲液加的太多,或者配错了缓冲液浓度(误用了50x的母液),导致电场不均匀。
案例3:什么都没看到。 原因:电极插反了!DNA全跑进缓冲液里了。所以一定要记住 “黑对黑,DNA向红跑” (负极到正极)。

结语:

DYCP-31BN就像一位可靠的老伙计,操作简单,皮实耐用。只要你掌握了以上步骤,避开了我提到的那些“坑”,你就能轻松驾驭它,为你的分子实验打下坚实的基础。祝你每次跑胶都条带清晰!


本文由北京六一生物编辑整理。

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