DYCP-36型等电聚焦电泳槽专业操作指南

作者：六一生物发布时间：2026-04-24 09:17:08 点击：

DYCP-36型等电聚焦电泳槽是北京六一生物专为高精度蛋白分离设计的专用设备，适配平板胶、薄层胶等多种等电聚焦（IEF）实验，凭借均匀电场、稳定温控优势，广泛应用于蛋白等电点测定、同工酶分离、蛋白亚型鉴定等科研场景。本文结合该设备专属结构与性能，详细讲解规范操作流程、设备专属操作要点及核心注意事项，确保实验精准、安全、高效，充分发挥设备高分辨率优势。

一、实验前期准备（DYCP-36专属适配）

（一）仪器检查与调试

1. 外观与结构检查：确认DYCP-36槽体无破损、密封胶圈完好，电极丝（高纯铂金材质）无氧化、断裂，冷却平台平整无污渍，电极接口无松动、无腐蚀。
2. 冷却系统调试：该设备支持外接冷却循环装置，连接冷却管路，确保管路通畅、无漏水，开启冷却系统，预设实验所需温度（常规IEF实验建议10-15℃），运行5-10分钟，确认温度稳定后备用。
3. 电源适配检查：将DYCP-36与六一DYY系列电泳仪电源连接，确认正负极对应正确（槽体标注“+”接电源阳极，“-”接电源阴极），开启电源空载测试，确认电流、电压输出稳定，无异常报警。

（二）试剂与耗材准备

1. 试剂配制：根据实验需求，配制适配DYCP-36凝胶尺寸的凝胶液（推荐聚丙烯酰胺凝胶）、两性电解质载体（根据目标蛋白等电点范围选择对应pH梯度，如3-10、4-7），阳极电泳液（如0.01mol/L H3PO4）、阴极电泳液（如0.02mol/L NaOH），所有试剂现配现用，避免pH值偏移。
2. 耗材准备：准备与设备适配的滤纸桥（尺寸匹配凝胶宽度）、加样滤纸片、凝胶板（适配DYCP-36冷却平台，建议尺寸不超过设备标注最大承载范围），以及固定液、染色液、脱色液等后续处理试剂。

二、DYCP-36型等电聚焦电泳槽规范操作流程

步骤1：凝胶制备与铺设

1. 按照常规平板胶制备方法，将配制好的凝胶液注入制胶模具，待凝胶完全凝固后，小心取出凝胶板，去除边缘多余凝胶。
2. 打开DYCP-36槽体上盖，将凝胶板平稳放置在冷却平台上，确保凝胶与平台贴合紧密，无气泡（气泡会导致电场不均，影响聚焦效果），凝胶两端与槽体电极区域对齐。

步骤2：滤纸桥与电极液添加

1. 将滤纸桥分别浸入阳极电泳液、阴极电泳液，充分浸湿后挤出多余液体（避免液体滴落污染凝胶）。
2. 将浸湿阳极液的滤纸桥铺设在凝胶阳极端，浸湿阴极液的滤纸桥铺设在凝胶阴极端，滤纸桥一端与凝胶紧密接触，另一端延伸至槽体对应的电极槽内，确保滤纸桥平整、无褶皱、无气泡，实现电流顺畅传导。
3. 向槽体电极槽内缓慢注入对应电极液，液面高度以刚好没过滤纸桥延伸部分为宜，避免电极液溢出污染凝胶。

步骤3：样品加样（DYCP-36专属操作要点）

1. 该设备支持微量加样，将目标样品稀释至合适浓度（建议样品浓度1-5mg/mL），根据凝胶厚度调整加样量（常规加样量5-20μL），避免样品过载或浓度过低。
2. 将加样滤纸片轻轻放置在凝胶指定加样区域（避开凝胶边缘，距离滤纸桥至少5mm，减少边缘效应），用微量移液器将样品缓慢滴加在滤纸片上，待样品完全渗透后，轻轻移除滤纸片（避免刮擦凝胶表面）。
3. 若为珍贵样品，可直接点样在凝胶表面，点样体积不宜过大，避免样品扩散。

步骤4：电泳运行（核心操作，精准控参）

1. 盖好DYCP-36槽体上盖，确认上盖密封良好（防止电极液挥发、保证实验安全），再次检查电极连接是否正确，冷却系统运行是否正常。
2. 开启电泳仪电源，采用“逐步升压”模式（DYCP-36适配恒压模式，推荐参数：初始电压200V，运行10分钟；逐步升至400V，运行30-60分钟；最终升至600V，运行1-2小时，具体参数根据样品特性调整），避免瞬间高压损坏凝胶或导致蛋白变性。
3. 电泳过程中，实时观察设备运行状态：冷却温度是否稳定在预设范围，电极槽内电极液是否充足，凝胶表面有无异常（如干裂、气泡），若出现异常，立即关闭电源，排查问题后再继续。
4. 当蛋白区带聚焦清晰、无明显迁移时，停止电泳（可通过预实验确定最佳电泳时间）。

步骤5：电泳后处理与仪器清洁

1. 关闭电源与冷却系统，断开电源连接，小心打开槽体上盖，用镊子轻轻取出凝胶板，进行固定、染色、脱色等后续操作，完成蛋白条带观察与分析。
2. 仪器清洁（DYCP-36专属清洁要点）：倒出电极槽内剩余电极液，用纯水冲洗槽体、电极丝、冷却平台，去除残留试剂与杂质；电极丝用软布轻轻擦拭，避免刮伤，确保无试剂残留；密封胶圈用纯水冲洗后晾干，防止老化；清洗完成后，将槽体晾干，盖好上盖，置于干燥通风处存放。

三、DYCP-36型等电聚焦电泳槽专属注意事项

（一）仪器操作专属注意事项

1. 电极丝保护：DYCP-36配备的高纯铂金电极丝为核心部件，禁止用硬物刮擦、碰撞，实验后及时清洁，避免氧化、污染，若电极丝出现断裂、氧化严重，需及时更换，否则会导致电场不均、聚焦效果下降。
2. 冷却系统使用：该设备依赖冷却系统保证实验效果，严禁在未开启冷却系统的情况下进行电泳，否则会导致凝胶温度过高，蛋白扩散、条带模糊，甚至损坏凝胶；冷却管路需定期检查，避免堵塞、漏水。
3. 槽体密封：电泳过程中必须保证上盖密封良好，一方面防止电极液挥发，影响pH梯度稳定，另一方面避免高压触电风险，同时防止灰尘、杂质污染凝胶。
4. 凝胶适配：禁止使用尺寸超过设备最大承载范围的凝胶板，避免凝胶与电极丝接触不良，或导致滤纸桥无法正常铺设，影响电流传导。

（二）实验操作核心注意事项

1. 正负极严禁接反：DYCP-36槽体与电源的正负极连接有明确标注，接反会导致蛋白反向迁移，直接造成实验失败，且可能损坏电极丝，操作前务必反复确认。
2. 试剂与耗材要求：两性电解质载体、电极液必须现配现用，放置过久会导致pH值偏移，影响聚焦效果；滤纸桥、加样滤纸片需洁净无杂质，避免污染样品与凝胶。
3. 加样规范：加样时动作轻柔，避免样品溅出、扩散，加样位置需精准，避开边缘与滤纸桥，防止样品与电极液直接接触，导致蛋白变性。
4. 高压安全：等电聚焦实验需使用较高电压，操作过程中禁止湿手触碰电极、电源接口及槽体内部，电泳运行时严禁开盖，防止高压触电；实验结束后，需关闭电源，等待电压完全降至0后，再进行后续操作。

（三）仪器维护与存放注意事项

1. 日常维护：每次实验结束后，必须彻底清洁槽体、电极丝、冷却平台，避免试剂残留腐蚀设备；定期检查密封胶圈、电极接口，发现老化、松动及时处理。
2. 长期存放：设备长期不用时，需将所有部件清洁晾干，断开冷却管路连接，排空管路内残留液体，盖好上盖，置于干燥、通风、无腐蚀性气体的环境中存放，避免槽体老化、电极腐蚀。
3. 故障处理：若实验过程中出现电流、电压异常，或冷却系统故障，立即关闭电源，排查问题（如电极丝污染、管路堵塞、正负极接反等），不可强行运行，必要时联系厂家售后进行维修。

四、操作总结

DYCP-36型等电聚焦电泳槽的核心操作关键的在于“精准控温、均匀电场、规范加样、安全用电”，其专属的高纯铂金电极与冷却适配设计，需配合规范的操作流程才能充分发挥高分辨率优势。遵循本文操作指南，做好实验前准备、规范每一步操作，严格遵守专属注意事项，可有效避免实验失败，确保蛋白分离清晰、数据可靠，延长设备使用寿命，满足科研与教学中高精度等电聚焦实验的需求。

本文由北京六一生物编辑整理。

北京六一生物科技有限公司创建于1970年，50多年的历史，公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作，2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。

主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。

如果您对我们的产品有任何问题，欢迎您的来电：400 960 6117

标签：