蛋白电泳仪的分离原理究竟是什么呢？

作者：六一生物发布时间：2023-12-21 09:20:49 点击：

蛋白电泳是一种在电场作用下，根据分子大小和带电性质的不同，使蛋白质按照一定顺序迁移的技术。它在生物化学、免疫学、分子生物学等领域具有广泛的应用。那么，蛋白电泳仪的分离原理究竟是什么呢？本文将从电泳的原理和方法两个方面进行详细阐述。

一、电泳原理

电泳的基本原理是利用电场对带电粒子(如离子、分子等)的作用力，使其发生定向移动。在蛋白电泳中，主要涉及到两种电场：内部电场和外加电场。

1. 内部电场：由于细胞膜具有一定的选择性通透性，细胞内的带电物质会受到一种称为“屏蔽”的作用，使得细胞内外的电荷分布不均。这种不均匀的电荷分布会在细胞膜上形成一个内部电场。当细胞受到外部电场的作用时，内部电场会产生一个与外部电场方向相反的力，使细胞发生位移。因此，在蛋白电泳过程中，细胞内外的电荷分布不均会导致蛋白质在细胞内发生迁移。

2. 外加电场：外加电场是指通过电极施加在凝胶或琼脂糖等固相载体上的电场。外加电场的作用会使蛋白质分子产生迁移速度，从而实现蛋白质的分离。不同大小的蛋白质分子在不同的迁移速度下被分离出来。

二、电泳方法

蛋白电泳方法主要有两种：等电聚焦法和琼脂糖凝胶电泳法。

1. 等电聚焦法：等电聚焦法是在高浓度盐溶液中进行的。在这种方法中，蛋白质首先与高浓度盐溶液中的离子交换，使蛋白质带上同种电荷。然后，将带有相同电荷的蛋白质溶液加入到低浓度盐溶液中，使蛋白质再次发生迁移。最后，通过改变电压和时间参数，使带负电的蛋白质分子向阳极移动，而带正电的蛋白质分子向阴极移动，从而实现蛋白质的分离。

2. 琼脂糖凝胶电泳法：琼脂糖凝胶电泳法是在低浓度盐溶液中进行的。在这种方法中，首先将蛋白质溶液与低浓度盐溶液混合，使蛋白质分子带有一定的负电荷。然后，将混合液注入琼脂糖凝胶中，通过改变电压和时间参数，使带负电的蛋白质分子向阳极移动，而带正电的蛋白质分子向阴极移动，从而实现蛋白质的分离。

总之，蛋白电泳仪的分离原理主要是利用电场对带电粒子的作用力，使蛋白质按照一定顺序迁移。通过不同的电泳方法和参数调整，可以实现对不同大小和带电性质的蛋白质的有效分离和检测。

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