DYCZ-30C双板夹芯电泳仪如何提升40%电泳速度？

作者：六一生物发布时间：2025-05-16 09:59:06 点击：

DYCZ-30C 双板夹芯式垂直电泳仪常用于蛋白凝胶电泳，特别适宜作种子纯度检测或样品较多的蛋白电泳。要提升其 40% 的电泳速度，可从以下几个关键因素入手

一、优化电场强度：

原理：电场强度是影响电泳速度的重要因素，更高的电场强度会提供更大的推动力，从而加速带电粒子在电泳介质中的运动速度。

操作：在仪器安全和样品可承受的范围内，适当提高电泳仪的输出电压。例如，如果原本使用的电压是 100V，可尝试逐步提高到 140V - 150V ，但需要密切关注样品的电泳情况以及仪器是否有异常发热等现象。不过需要注意的是，过高的电场强度可能会导致发热过度，影响样品质量，所以需要配合良好的散热措施。

二、调整缓冲液条件：

1、离子浓度：

原理：较高的离子浓度可促进带电粒子的迁移，提高电泳速度。但离子浓度过高也会产生过多热量，所以需要找到一个平衡点。

操作：可以在原有缓冲液配方的基础上，适当增加缓冲液中电解质的浓度。比如，对于常用的 Tris - 甘氨酸缓冲体系，如果原来的 Tris 浓度为 0.05M，甘氨酸浓度为 0.384M，可以尝试将 Tris 浓度提高到 0.06M - 0.07M ，甘氨酸浓度相应调整，同时密切观察电泳效果和产热情况。

2、缓冲液 pH 值：

原理：缓冲液的 pH 值会影响样品分子的带电状态，合适的 pH 值能使样品分子带有更多电荷，从而加快电泳速度。对于蛋白质样品，不同的蛋白质等电点不同，需要根据目标蛋白的等电点来选择合适的缓冲液 pH 值，使其带电量增加，提高迁移速率。

操作：根据所电泳的样品性质，准确调整缓冲液的 pH 值。例如，对于等电点为 7.0 的蛋白质样品，如果使用的是 Tris - HCl 缓冲液，可将 pH 值调整到 8.0 - 8.5 左右，以增加蛋白质的负电荷量，加快其向正极的迁移速度。在调整 pH 值时，需使用高精度的 pH 计进行测量，确保准确性。

三、优化凝胶参数：

1、凝胶浓度：

原理：凝胶浓度决定了凝胶的孔径大小，合适的孔径能让样品分子更顺畅地通过，提高电泳速度。对于不同大小的样品分子，需要选择与之匹配的凝胶浓度。

操作：如果要分离的蛋白质分子量较大，可适当降低凝胶浓度，使孔径变大，利于大分子的迁移。例如，原本使用 12% 的聚丙烯酰胺凝胶分离某蛋白质，若发现电泳速度较慢，可尝试将凝胶浓度降低到 10% 。反之，对于小分子样品，可适当提高凝胶浓度，如从 10% 提高到 12% - 15%，以增强分子筛效应，加快小分子的迁移。

2、凝胶厚度：

较薄的凝胶可以减少样品分子迁移的路径长度，从而提高电泳速度。DYCZ - 30C 电泳仪提供了不同厚度的试样格（1.0mm、1.5mm 厚），在满足实验对样品量需求的前提下，尽量选择较薄的凝胶。例如，如果对样品量要求不是特别高，优先选择 1.0mm 厚的试样格来制备凝胶，这样可以缩短样品分子在凝胶中的迁移距离，有助于提升电泳速度。

四、改进电泳程序：

1、采用分步电压法：

在电泳开始时，先使用较低的电压（如 80V - 100V），使样品能够在凝胶中初步分离，确保条带能够因为自身片段大小不同而产生泳动速度差异，将片段分离。这个过程大约持续 10 - 15 分钟。然后，提高电压（如 130V - 150V）进行后续电泳，较高的电压可以加快整体的电泳进程，同时避免过大的片段残存在胶孔不易泳动的情况。通过这种分步电压的方式，可以在保证分离效果的前提下，有效节省电泳时间，有可能实现提升 40% 电泳速度的目标。

2、优化电泳时间设置：

根据样品的特性和预期的分离效果，精确设定电泳时间。如果是常规的蛋白质电泳，原本设定的电泳时间是 60 分钟，可以通过预实验，逐步缩短时间，观察条带的分离情况，找到既能保证分离度又能大幅缩短时间的最佳电泳时长。例如，经过几次实验摸索，发现将电泳时间缩短至 35 - 40 分钟时，依然能够得到清晰且分离良好的条带，从而实现了电泳速度的提升。

五、控制温度：

原理：温度对电泳速度有一定影响，通常较高的温度会增加电泳介质的流动性，从而加快带电粒子的运动速度。但过高的温度会导致蛋白质变性、凝胶变形等问题，所以需要在合适的范围内提高温度。

操作：DYCZ - 30C 电泳仪有冷却装置，可适当降低冷却装置的制冷功率，使电泳过程中的温度略微升高。比如，原本冷却装置将温度控制在 20℃，可以尝试将温度提高到 25℃ - 30℃ ，但要密切观察样品和凝胶的状态，确保不会因温度升高而出现不良影响。同时，要保证电泳仪周围环境通风良好，有助于热量的散发。

本文由北京六一生物编辑整理。

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