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行业知识
降低DYCZ-30C双板夹芯式垂直电泳仪耗材成本的方法
作者:六一生物
发布时间:2025-05-16 10:00:11
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我将为你介绍一些能降低DYCZ-30C双板夹芯式垂直电泳仪耗材成本的方法,包括兼容试剂清单及胶板复用技巧,助你实现实验室耗材成本直降50%的目标。
一、DYCZ - 30C双板夹芯式垂直电泳仪兼容试剂清单
1. 缓冲液
- Tris - 甘氨酸缓冲体系:这是蛋白电泳常用的缓冲液体系。对于DYCZ - 30C电泳仪,可使用以下配方来降低成本。以1L为例,Tris(三羟甲基氨基甲烷)5.8g,甘氨酸28.8g,SDS(十二烷基硫酸钠)1g,加去离子水溶解后定容至1L。该配方与原装试剂效果相近,且原料成本较低。许多生化试剂公司如Sigma - Aldrich、Solarbio、Amresco等均有销售Tris、甘氨酸和SDS等原料,采购方便,可批量购买以获取更优惠价格。
- Tris - 硼酸 - EDTA(TBE)缓冲液:适用于核酸电泳。配方为:Tris 10.8g,硼酸5.5g,0.5M EDTA(pH 8.0)40mL,加去离子水定容至1L。在核酸电泳实验中,此缓冲液能提供稳定的pH环境,保证核酸分子的有效迁移。像生工生物、碧云天等公司提供的TBE缓冲液原料,质量可靠且价格实惠。
2. 凝胶制备试剂
- 聚丙烯酰胺凝胶:是蛋白电泳常用的凝胶材料。制备聚丙烯酰胺凝胶的主要原料为丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺。以配制10%的聚丙烯酰胺凝胶(100mL)为例,需要丙烯酰胺30g,甲叉双丙烯酰胺0.8g,去离子水定容至100mL,制成30%的丙烯酰胺母液。使用时,再根据所需凝胶浓度进行稀释。例如,制备10%的分离胶(30mL),需取10mL 30%丙烯酰胺母液,Tris - HCl缓冲液(pH 8.8)7.5mL,10% SDS 0.3mL,10%过硫酸铵0.3mL,TEMED(四甲基乙二胺)10μL,然后加水补足至30mL。Solarbio、Sigma - Aldrich等品牌的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺,性价比高,可满足大量制备凝胶的需求。
- 琼脂糖凝胶:常用于核酸电泳。对于DYCZ - 30C电泳仪,可选择不同浓度的琼脂糖凝胶来分离不同大小的核酸片段。如分离较大的DNA片段(>1kb),可使用0.8% - 1%的琼脂糖凝胶;分离较小片段(<500bp),则用1.5% - 2%的琼脂糖凝胶。普通琼脂糖可从国产的一些品牌如康为世纪、全式金等购买,价格相对进口品牌如Invitrogen的低很多,但电泳效果并不逊色。若进行高分辨率的核酸分离,可选择低熔点琼脂糖,虽价格稍高,但可通过合理规划实验用量来控制成本。
3. 染色试剂
- 考马斯亮蓝染色液:常用于蛋白质染色。自制考马斯亮蓝染色液可大幅降低成本。配方为:考马斯亮蓝R - 250 0.25g,甲醇45mL,冰醋酸10mL,去离子水定容至100mL。染色时,将凝胶浸泡在染色液中,在摇床上缓慢振荡染色1 - 2小时,然后用脱色液(甲醇:冰醋酸:水 = 45:10:45)脱色至背景清晰。该染色方法操作简单,成本低廉,能清晰显示蛋白质条带。
- 核酸染料:在核酸电泳中,可使用一些安全且经济的核酸染料替代昂贵的EB(溴化乙锭)。例如,GelRed染料,其灵敏度与EB相当,但毒性更低。它可直接添加到琼脂糖凝胶或电泳缓冲液中,使用方便。虽然GelRed价格相对国产一些不知名染料略高,但考虑到其安全性和染色效果,性价比还是较高的。另外,一些国产的核酸染料如赛百盛的核酸染料,价格更为亲民,也能满足常规核酸电泳的染色需求。
二、胶板复用技巧
1. 拆卸与清洗
- 电泳结束后,小心拆卸胶板。将胶板从电泳槽中取出,用刀片或专用的胶板拆卸工具,轻轻分离两块玻璃板,注意不要刮伤胶板表面。对于DYCZ - 30C电泳仪配备的1.0mm或1.5mm厚的胶板,操作时需更加谨慎。
- 用去离子水冲洗胶板,去除表面残留的凝胶和缓冲液。然后将胶板浸泡在含有洗洁精的温水中,浸泡15 - 30分钟,使残留杂质充分溶解。使用柔软的海绵或纱布轻轻擦拭胶板两面,去除顽固污渍,但要避免使用硬质刷子,以免损坏胶板。最后,用大量去离子水冲洗干净,确保胶板表面无洗洁精残留。
2. 检查与修复
- 清洗后的胶板,需仔细检查表面是否有划痕、破损或变形。若发现轻微划痕,可使用细砂纸轻轻打磨平整,但要注意不要过度打磨,以免影响胶板的平整度。对于较深的划痕或破损,若在胶板边缘且不影响电泳区域,可使用硅胶或环氧树脂胶进行修补,待胶水干燥固化后,用砂纸将修补处打磨光滑。若胶板变形严重,可能会影响凝胶的灌注和电泳效果,此时需谨慎评估是否继续复用。
3. 硅化处理(可选)
- 为了提高胶板的复用次数,可对胶板进行硅化处理。将清洗干净并干燥后的胶板浸泡在硅化试剂(如二氯二甲基硅烷的甲苯溶液)中,浸泡5 - 10分钟。取出胶板,用甲苯冲洗,去除多余的硅化试剂,然后在通风橱中晾干。硅化处理可在胶板表面形成一层疏水的硅烷膜,使凝胶在灌注和剥离时更顺畅,减少凝胶与胶板的粘连,从而延长胶板的使用寿命。但需注意,硅化试剂具有一定毒性,操作时要做好防护措施。
4. 储存
- 复用的胶板在储存时,要避免胶板之间相互摩擦和碰撞。可将胶板垂直放置在专门的胶板架上,或用柔软的纸巾或塑料薄膜隔开,然后放入干燥、洁净的盒子中。储存环境要保持干燥,防止胶板受潮发霉。在下次使用前,再次检查胶板的状态,确保其表面干净、无杂质,且无新的损坏。
通过合理选择兼容试剂和掌握胶板复用技巧,有望实现实验室在使用DYCZ - 30C双板夹芯式垂直电泳仪时耗材成本直降50% ,同时不影响实验结果的准确性和可靠性。
本文由北京六一生物编辑整理。
北京六一生物科技有限公司创建于1970年,50多年的历史,公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作,2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。
主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。
如果您对我们的产品有任何问题,欢迎您的来电:400 960 6117
我们的目标是:做生物化学分析仪器行业海尔
一、DYCZ - 30C双板夹芯式垂直电泳仪兼容试剂清单
1. 缓冲液
- Tris - 甘氨酸缓冲体系:这是蛋白电泳常用的缓冲液体系。对于DYCZ - 30C电泳仪,可使用以下配方来降低成本。以1L为例,Tris(三羟甲基氨基甲烷)5.8g,甘氨酸28.8g,SDS(十二烷基硫酸钠)1g,加去离子水溶解后定容至1L。该配方与原装试剂效果相近,且原料成本较低。许多生化试剂公司如Sigma - Aldrich、Solarbio、Amresco等均有销售Tris、甘氨酸和SDS等原料,采购方便,可批量购买以获取更优惠价格。
- Tris - 硼酸 - EDTA(TBE)缓冲液:适用于核酸电泳。配方为:Tris 10.8g,硼酸5.5g,0.5M EDTA(pH 8.0)40mL,加去离子水定容至1L。在核酸电泳实验中,此缓冲液能提供稳定的pH环境,保证核酸分子的有效迁移。像生工生物、碧云天等公司提供的TBE缓冲液原料,质量可靠且价格实惠。
2. 凝胶制备试剂
- 聚丙烯酰胺凝胶:是蛋白电泳常用的凝胶材料。制备聚丙烯酰胺凝胶的主要原料为丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺。以配制10%的聚丙烯酰胺凝胶(100mL)为例,需要丙烯酰胺30g,甲叉双丙烯酰胺0.8g,去离子水定容至100mL,制成30%的丙烯酰胺母液。使用时,再根据所需凝胶浓度进行稀释。例如,制备10%的分离胶(30mL),需取10mL 30%丙烯酰胺母液,Tris - HCl缓冲液(pH 8.8)7.5mL,10% SDS 0.3mL,10%过硫酸铵0.3mL,TEMED(四甲基乙二胺)10μL,然后加水补足至30mL。Solarbio、Sigma - Aldrich等品牌的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺,性价比高,可满足大量制备凝胶的需求。
- 琼脂糖凝胶:常用于核酸电泳。对于DYCZ - 30C电泳仪,可选择不同浓度的琼脂糖凝胶来分离不同大小的核酸片段。如分离较大的DNA片段(>1kb),可使用0.8% - 1%的琼脂糖凝胶;分离较小片段(<500bp),则用1.5% - 2%的琼脂糖凝胶。普通琼脂糖可从国产的一些品牌如康为世纪、全式金等购买,价格相对进口品牌如Invitrogen的低很多,但电泳效果并不逊色。若进行高分辨率的核酸分离,可选择低熔点琼脂糖,虽价格稍高,但可通过合理规划实验用量来控制成本。
3. 染色试剂
- 考马斯亮蓝染色液:常用于蛋白质染色。自制考马斯亮蓝染色液可大幅降低成本。配方为:考马斯亮蓝R - 250 0.25g,甲醇45mL,冰醋酸10mL,去离子水定容至100mL。染色时,将凝胶浸泡在染色液中,在摇床上缓慢振荡染色1 - 2小时,然后用脱色液(甲醇:冰醋酸:水 = 45:10:45)脱色至背景清晰。该染色方法操作简单,成本低廉,能清晰显示蛋白质条带。
- 核酸染料:在核酸电泳中,可使用一些安全且经济的核酸染料替代昂贵的EB(溴化乙锭)。例如,GelRed染料,其灵敏度与EB相当,但毒性更低。它可直接添加到琼脂糖凝胶或电泳缓冲液中,使用方便。虽然GelRed价格相对国产一些不知名染料略高,但考虑到其安全性和染色效果,性价比还是较高的。另外,一些国产的核酸染料如赛百盛的核酸染料,价格更为亲民,也能满足常规核酸电泳的染色需求。
二、胶板复用技巧
1. 拆卸与清洗
- 电泳结束后,小心拆卸胶板。将胶板从电泳槽中取出,用刀片或专用的胶板拆卸工具,轻轻分离两块玻璃板,注意不要刮伤胶板表面。对于DYCZ - 30C电泳仪配备的1.0mm或1.5mm厚的胶板,操作时需更加谨慎。
- 用去离子水冲洗胶板,去除表面残留的凝胶和缓冲液。然后将胶板浸泡在含有洗洁精的温水中,浸泡15 - 30分钟,使残留杂质充分溶解。使用柔软的海绵或纱布轻轻擦拭胶板两面,去除顽固污渍,但要避免使用硬质刷子,以免损坏胶板。最后,用大量去离子水冲洗干净,确保胶板表面无洗洁精残留。
2. 检查与修复
- 清洗后的胶板,需仔细检查表面是否有划痕、破损或变形。若发现轻微划痕,可使用细砂纸轻轻打磨平整,但要注意不要过度打磨,以免影响胶板的平整度。对于较深的划痕或破损,若在胶板边缘且不影响电泳区域,可使用硅胶或环氧树脂胶进行修补,待胶水干燥固化后,用砂纸将修补处打磨光滑。若胶板变形严重,可能会影响凝胶的灌注和电泳效果,此时需谨慎评估是否继续复用。
3. 硅化处理(可选)
- 为了提高胶板的复用次数,可对胶板进行硅化处理。将清洗干净并干燥后的胶板浸泡在硅化试剂(如二氯二甲基硅烷的甲苯溶液)中,浸泡5 - 10分钟。取出胶板,用甲苯冲洗,去除多余的硅化试剂,然后在通风橱中晾干。硅化处理可在胶板表面形成一层疏水的硅烷膜,使凝胶在灌注和剥离时更顺畅,减少凝胶与胶板的粘连,从而延长胶板的使用寿命。但需注意,硅化试剂具有一定毒性,操作时要做好防护措施。
4. 储存
- 复用的胶板在储存时,要避免胶板之间相互摩擦和碰撞。可将胶板垂直放置在专门的胶板架上,或用柔软的纸巾或塑料薄膜隔开,然后放入干燥、洁净的盒子中。储存环境要保持干燥,防止胶板受潮发霉。在下次使用前,再次检查胶板的状态,确保其表面干净、无杂质,且无新的损坏。
通过合理选择兼容试剂和掌握胶板复用技巧,有望实现实验室在使用DYCZ - 30C双板夹芯式垂直电泳仪时耗材成本直降50% ,同时不影响实验结果的准确性和可靠性。
本文由北京六一生物编辑整理。
北京六一生物科技有限公司创建于1970年,50多年的历史,公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作,2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。
主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。
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