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- 电泳仪基础入门全解析:从原理到实操避坑指南
- 电泳仪使用与保养全攻略:细节决定实验成败
- 揭秘电泳仪迁移率异常:探寻缓冲液pH的黄金值
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电泳仪使用、注意事项与常见问题解决全攻略
作者:六一生物
发布时间:2025-06-18 09:24:36
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在实验室里,电泳仪可是<doubaocanvas>”,从核酸分离到蛋白质分析,都离不开它提供稳定的外加电场。不过这“得力干将”脾气有点“倔”,用不对方法、摸不清门道,不仅实验结果“翻车”,还可能把仪器搞“罢工”。下面就手把手教你吃透电泳仪,从分类、操作到故障解决,一个不落!
一、电泳仪:实验室里的“电动力心脏”
电泳仪本质上就是个给电泳实验“供电”的直流电源,但可不是普通电源能比的。它输出的电压、电流或功率,要么稳稳当当不波动,要么按照实验要求“有规律地变”。就好比给电动车充电,电压不稳电池容易坏,电泳仪要是输出不稳定,样品在电泳槽里就“瞎跑”,实验数据根本没法用。
二、五花八门的电泳仪“门派”
电泳仪的分类就像一场“武林大会”,依据工作原理、功能、使用方法和用途,能分出好多“门派”:
- 按原理分:毛细管电泳靠着毛细管里的电场和流体“发力”,分子在狭窄空间里快速分离;等电聚焦电泳则是根据分子等电点不同,让它们在pH梯度凝胶里“各回各家”。
- 按用途分:研究DNA用DNA电泳仪,分析血清蛋白就靠血清蛋白电泳仪,医院筛查地中海贫血,血红蛋白电泳仪就是“主力军”。
- 常见类型:琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、醋酸纤维薄膜电泳……每种都有自己的“拿手绝活”,就像不同的工匠用不同的工具,选对电泳仪,实验就成功了一半。
三、电泳仪使用“四步走”,步步都关键
1. 接线路,对极性:用配套的导线把电泳槽电极和电泳仪连起来,这一步最容易“踩坑”!电极分正负极,红色接正极,黑色接负极,接反了样品不仅不跑,还可能把缓冲液搅得一团糟。就像给电器插插头,插反了会跳闸,电极接反了,实验直接“凉凉”。
2. 调参数,定模式:先把电源关掉,电压旋钮拧到最小,再根据实验选稳压或稳流模式。做核酸电泳,常用稳压模式,电压80 - 120V就行;分离蛋白质,稳流模式更合适,电流10 - 20mA。参数设置就像给仪器下“指令”,指令错了,仪器就“乱干活”。
3. 开电源,盯过程:接通电源,慢慢把电压调到设定值,设好电泳时间。实验开始后可不能当“甩手掌柜”,时不时得看看电泳槽,要是条带跑得比平时快很多,或者缓冲液里冒大量气泡,可能是电压过高或线路接触不良,得赶紧排查。
4. 收工收尾有讲究:电泳结束,先关电源,再拔插头。拔插头别拽着线硬拉,要捏住插头轻轻拔,不然容易把接口弄坏。就像拔插座,方法不对容易损坏电器,收尾工作做好,仪器才能“健康长寿”。
四、影响电泳的“幕后黑手”:这些因素得小心
电泳结果好不好,除了仪器和操作,这些外界因素也在“暗中捣乱”:
- 电场强度:强度大,分子跑得就快,但太强容易产热,把分子“烧坏”变性,就像开车速度太快容易失控。
- 溶液pH值:影响分子带电状态,偏离等电点,分子带电越多,跑得越快。蛋白质在不同pH溶液里,带电情况不一样,迁移速度也不同。
- 溶液离子强度:离子强度太高,分子跑不动;太低,条带又容易扩散,得找到合适的“平衡点”。
- 电渗作用:缓冲液在电场下会“乱跑”,带着分子“跑偏”,选对支持物和缓冲液能减少影响。
- 粒子迁移率:和分子大小、形状、带电性质有关,这是分子的“先天条件”,实验设计时得考虑清楚。
- 吸附作用:支持物要是“黏”住分子,条带就会拖尾,选对支持物很关键。
五、使用电泳仪的“六大红线”,碰不得!
1. 安全第一,远离带电体:仪器通电时,电极、电泳物都是“带电老虎”,千万不能直接碰!之前有实验员着急取样品,没断电就伸手,结果被电到,还损坏了仪器。操作前一定要先断电,仪器也要接好地线,防止漏电。
2. 插拔谨慎,防短路:通电时别随意插拔导线插头,虽然有保险丝“兜底”,但短路还是可能烧坏内部零件。就像开车时突然急刹车伤车,乱插拔插头对电泳仪也是“致命伤”。
3. 介质不同,分开做:不同介质支持物电阻不一样,所需电流和时间也不同。把琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶的电泳放同一台仪器做,就像让不同速度的选手在同一条跑道比赛,肯定乱套,分开做结果才准确。
4. 多槽使用,别超载:在仪器额定电流内,可以多槽关联提高效率,但不能“贪多”。就像小轿车硬塞太多人会伤车,超载用仪器会缩短寿命,使用前先算好总电流。
5. 检查操作,按规矩来:检查电泳输入,稳压模式能空载开机,稳流模式得先接好负载,不然电压表指针乱跳,容易损坏仪器。
6. 异常情况,速断电:要是听到仪器噪音大、看到放电,或者闻到怪味,别犹豫,立刻断电!这是仪器在“求救”,赶紧联系专业人员检修,别自己瞎鼓捣。
六、电泳仪常见问题“对症下药”,不慌!
1. 输出达不到设定值:先看电流或功率是不是已经稳定了,没到极限值就把它们调大,电压就能提高。就像给汽车加油,油量足了速度才能提上来。同理,电流或功率不够,调整对应参数就行。
2. 过压报警:检查是不是空载运行,电泳槽有没有加缓冲液,铂金丝电极是不是断了。这些问题就像电路里的“小故障”,排除了报警就解除了。
3. 过流保护:看看电泳槽是不是短路了,或者缓冲液有没有选错。短路就像电路里的“堵车”,找到原因疏通了,仪器就能正常工作。
4. 漏电保护:检查仪器内部或接口有没有进液体、落灰尘,及时清理。液体和灰尘就像电路里的“捣乱分子”,清理干净才能恢复正常。
5. 风机故障:风机停转或异响,直接换个新风机。风机就像仪器的“小风扇”,不转了仪器容易“发烧”。
6. 无电压、电流输出:先查保险管是不是烧坏了,再打开机箱看看前面板输出座、瓷罐变压器的插头有没有脱落,用万用表测瓷罐变压器每组两端是不是通路。这就像给电路“体检”,找到断开的地方连上,仪器就能恢复供电。
把这些电泳仪的知识和操作要点吃透,实验就能少走很多弯路。要是使用过程中还有其他问题,欢迎随时交流,咱们一起把实验做得又稳又好!
本文由北京六一生物编辑整理。
北京六一生物科技有限公司创建于1970年,50多年的历史,公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作,2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。
主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。
如果您对我们的产品有任何问题,欢迎您的来电:400 960 6117
我们的目标是:做生物化学分析仪器行业海尔
一、电泳仪:实验室里的“电动力心脏”
电泳仪本质上就是个给电泳实验“供电”的直流电源,但可不是普通电源能比的。它输出的电压、电流或功率,要么稳稳当当不波动,要么按照实验要求“有规律地变”。就好比给电动车充电,电压不稳电池容易坏,电泳仪要是输出不稳定,样品在电泳槽里就“瞎跑”,实验数据根本没法用。
二、五花八门的电泳仪“门派”
电泳仪的分类就像一场“武林大会”,依据工作原理、功能、使用方法和用途,能分出好多“门派”:
- 按原理分:毛细管电泳靠着毛细管里的电场和流体“发力”,分子在狭窄空间里快速分离;等电聚焦电泳则是根据分子等电点不同,让它们在pH梯度凝胶里“各回各家”。
- 按用途分:研究DNA用DNA电泳仪,分析血清蛋白就靠血清蛋白电泳仪,医院筛查地中海贫血,血红蛋白电泳仪就是“主力军”。
- 常见类型:琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、醋酸纤维薄膜电泳……每种都有自己的“拿手绝活”,就像不同的工匠用不同的工具,选对电泳仪,实验就成功了一半。
三、电泳仪使用“四步走”,步步都关键
1. 接线路,对极性:用配套的导线把电泳槽电极和电泳仪连起来,这一步最容易“踩坑”!电极分正负极,红色接正极,黑色接负极,接反了样品不仅不跑,还可能把缓冲液搅得一团糟。就像给电器插插头,插反了会跳闸,电极接反了,实验直接“凉凉”。
2. 调参数,定模式:先把电源关掉,电压旋钮拧到最小,再根据实验选稳压或稳流模式。做核酸电泳,常用稳压模式,电压80 - 120V就行;分离蛋白质,稳流模式更合适,电流10 - 20mA。参数设置就像给仪器下“指令”,指令错了,仪器就“乱干活”。
3. 开电源,盯过程:接通电源,慢慢把电压调到设定值,设好电泳时间。实验开始后可不能当“甩手掌柜”,时不时得看看电泳槽,要是条带跑得比平时快很多,或者缓冲液里冒大量气泡,可能是电压过高或线路接触不良,得赶紧排查。
4. 收工收尾有讲究:电泳结束,先关电源,再拔插头。拔插头别拽着线硬拉,要捏住插头轻轻拔,不然容易把接口弄坏。就像拔插座,方法不对容易损坏电器,收尾工作做好,仪器才能“健康长寿”。
四、影响电泳的“幕后黑手”:这些因素得小心
电泳结果好不好,除了仪器和操作,这些外界因素也在“暗中捣乱”:
- 电场强度:强度大,分子跑得就快,但太强容易产热,把分子“烧坏”变性,就像开车速度太快容易失控。
- 溶液pH值:影响分子带电状态,偏离等电点,分子带电越多,跑得越快。蛋白质在不同pH溶液里,带电情况不一样,迁移速度也不同。
- 溶液离子强度:离子强度太高,分子跑不动;太低,条带又容易扩散,得找到合适的“平衡点”。
- 电渗作用:缓冲液在电场下会“乱跑”,带着分子“跑偏”,选对支持物和缓冲液能减少影响。
- 粒子迁移率:和分子大小、形状、带电性质有关,这是分子的“先天条件”,实验设计时得考虑清楚。
- 吸附作用:支持物要是“黏”住分子,条带就会拖尾,选对支持物很关键。
五、使用电泳仪的“六大红线”,碰不得!
1. 安全第一,远离带电体:仪器通电时,电极、电泳物都是“带电老虎”,千万不能直接碰!之前有实验员着急取样品,没断电就伸手,结果被电到,还损坏了仪器。操作前一定要先断电,仪器也要接好地线,防止漏电。
2. 插拔谨慎,防短路:通电时别随意插拔导线插头,虽然有保险丝“兜底”,但短路还是可能烧坏内部零件。就像开车时突然急刹车伤车,乱插拔插头对电泳仪也是“致命伤”。
3. 介质不同,分开做:不同介质支持物电阻不一样,所需电流和时间也不同。把琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶的电泳放同一台仪器做,就像让不同速度的选手在同一条跑道比赛,肯定乱套,分开做结果才准确。
4. 多槽使用,别超载:在仪器额定电流内,可以多槽关联提高效率,但不能“贪多”。就像小轿车硬塞太多人会伤车,超载用仪器会缩短寿命,使用前先算好总电流。
5. 检查操作,按规矩来:检查电泳输入,稳压模式能空载开机,稳流模式得先接好负载,不然电压表指针乱跳,容易损坏仪器。
6. 异常情况,速断电:要是听到仪器噪音大、看到放电,或者闻到怪味,别犹豫,立刻断电!这是仪器在“求救”,赶紧联系专业人员检修,别自己瞎鼓捣。
六、电泳仪常见问题“对症下药”,不慌!
1. 输出达不到设定值:先看电流或功率是不是已经稳定了,没到极限值就把它们调大,电压就能提高。就像给汽车加油,油量足了速度才能提上来。同理,电流或功率不够,调整对应参数就行。
2. 过压报警:检查是不是空载运行,电泳槽有没有加缓冲液,铂金丝电极是不是断了。这些问题就像电路里的“小故障”,排除了报警就解除了。
3. 过流保护:看看电泳槽是不是短路了,或者缓冲液有没有选错。短路就像电路里的“堵车”,找到原因疏通了,仪器就能正常工作。
4. 漏电保护:检查仪器内部或接口有没有进液体、落灰尘,及时清理。液体和灰尘就像电路里的“捣乱分子”,清理干净才能恢复正常。
5. 风机故障:风机停转或异响,直接换个新风机。风机就像仪器的“小风扇”,不转了仪器容易“发烧”。
6. 无电压、电流输出:先查保险管是不是烧坏了,再打开机箱看看前面板输出座、瓷罐变压器的插头有没有脱落,用万用表测瓷罐变压器每组两端是不是通路。这就像给电路“体检”,找到断开的地方连上,仪器就能恢复供电。
把这些电泳仪的知识和操作要点吃透,实验就能少走很多弯路。要是使用过程中还有其他问题,欢迎随时交流,咱们一起把实验做得又稳又好!
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北京六一生物科技有限公司创建于1970年,50多年的历史,公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作,2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。
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