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垂直式电泳槽操作、维护与异常处理规范

作者:六一生物 发布时间:2025-06-19 09:34:28 点击:
    在实验室的<doubaocanvas>里,垂直式电泳槽可是分离样品的“得力干将”。但要是操作不规范,不仅实验结果“打水漂”,还容易把设备搞出毛病。为了让大家用得顺手、设备用得长久,咱们专门定下这套详细规程,每一步都得按规矩来!

一、目的

这套程序就是给垂直式电泳槽的操作、维护和异常处理“立规矩”。一方面能帮大家避开操作雷区,减少人为失误;另一方面,也能让电泳槽始终保持“健康状态”,顺顺利利完成每一次实验任务。

二、适用范围

只要是用到垂直式电泳槽的操作,从组装、灌胶到最后的清理维护,全都得按这套程序来,一点都不能含糊。

三、责任

1. 操作者是第一责任人:垂直式电泳槽怎么用、怎么保养,全靠操作者落实到位。每一个步骤都得严格执行,容不得半点马虎。要是操作出了问题,第一时间就得自查是不是按规程来的。
2. 实验室负责人把好监督关:各实验室负责人得定期“检查作业”,看看大家操作合不合规,维护到不到位。发现问题及时指出来,督促整改,确保这套程序真真正正落到实处。
3. 日常维护全靠操作者:电泳槽每天的运行情况得时刻盯着,定期的维护保养、点检也都是操作者的“分内事”。就像照顾家里的电器一样,多上心才能用得久。

四、内容

1. 清洗部件:干干净净再开工

组装电泳槽之前,所有部件都得彻彻底底清洗一遍。拿刷子把电泳槽槽体、玻璃板、样品梳这些部件里里外外刷干净,尤其注意边角和缝隙,别让残留的缓冲液、凝胶残渣“藏”在里面。洗完用蒸馏水冲几遍,然后倒扣晾干。要是部件没洗干净,残留的杂质会影响凝胶凝固和样品分离,最后实验结果肯定不准确。

2. 组装电泳槽:严丝合缝不出错

清洗好的部件晾干后就可以组装了。先把两块玻璃板对齐卡进胶框里,拧紧螺母固定好,但别拧得太紧,不然容易把玻璃板压裂;也别太松,漏胶可就麻烦了。接着把组装好的胶框稳稳放进电泳槽里,确保上下贮液槽和胶框之间密封严实,不漏水。曾经有同事组装时没注意密封,灌胶的时候缓冲液漏得到处都是,不仅浪费材料,还耽误实验进度,大家可别犯这种错。

3. 灌胶:步步小心等凝固

灌胶可是个技术活,分两步走。先灌分离胶,按照配方配好胶液,沿着玻璃板和梳子的缝隙,用移液枪慢慢注入,别太快,不然容易产生气泡。灌到合适高度后,在胶液上面轻轻加一层水封,让胶液表面平整,然后耐心等它凝固。这个过程大概需要30 - 60分钟,具体时间看室温,温度高凝固快,温度低就慢些。

分离胶凝固好后,倒掉水封,用滤纸吸干残留水分,接着灌浓缩胶。浓缩胶的高度别超过梳子齿的底部,灌完后把梳子轻轻插进去,注意别留气泡,等浓缩胶凝固。在灌胶前,一定要先接通冷却水,这是为了给凝胶降温,防止凝胶在聚合过程中过热;同时夹紧连接上下贮液槽的两根橡胶管,防止缓冲液漏出来。

4. 加样:稳准狠不出岔子

加样前,先松开夹子,把上贮液槽里的蒸馏水放掉,等水流干净了再夹紧。双手小心地把样品梳拔出来,用移液枪把孔里残留的水分吸走。然后在上下贮液槽里加入缓冲液,液体高度一定要超过上贮液槽短玻璃板的上缘,这样才能形成完整的电路。

接下来就可以加样了。用注射器吸取适量样品,针尖贴着凹型样品孔的边缘,慢慢把样品推进去,别把样品溅到孔外面,也别让气泡混进去。要是样品加得不均匀,或者有气泡,跑出来的条带就会歪歪扭扭,影响实验结果分析。

5. 电泳:接好电极别接反

加完样,把上贮液槽导线和电泳仪的负极相连,下贮液槽导线和正极相连,千万不能接反!接反了样品不仅不会往正确方向跑,还可能把电泳槽里的缓冲液弄得一团糟。接好线,检查一遍确认无误后,就可以打开电泳仪,按照实验要求设置电压、电流和时间,开始电泳了。

6. 取出胶板:小心别弄破胶

电泳结束,先关掉电泳仪,然后旋松螺母,轻轻取出胶框。接下来剥出玻璃板是个精细活,用撬板从玻璃板一角轻轻撬开,慢慢把两块玻璃板分开,把胶板完整取出来。要是用力太猛,很容易把胶板弄破,前面的实验就白费了。

7. 关闭电源:收尾工作别忘记

取完胶板,最后一步就是关闭电源,把导线从电泳仪上拔下来,整理好设备和实验台面。别小看这一步,要是电源没关,不仅浪费电,还可能存在安全隐患。

8. 使用时,使用人定期查看

从开始灌胶到电泳结束,使用人得时不时查看一下。看看缓冲液有没有漏,电泳过程中电流、电压是不是稳定,胶板有没有异常。要是发现不对劲,比如电流突然变大、缓冲液颜色变了,得赶紧排查原因,该停机处理就停机,别让小问题变成大麻烦。

这套垂直式电泳槽操作维护规程已经讲得明明白白,大家在实验中一定要严格遵守。要是在操作过程中有任何疑问,或者发现规程有需要补充的地方,随时提出来,咱们一起把实验做得又快又好! 


本文由北京六一生物编辑整理。

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