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DYCP-36型等电聚焦电泳槽使用全攻略

作者:六一生物 发布时间:2025-07-04 09:13:26 点击:
    咱们实验室那台DYCP-36型等电聚焦电泳槽,从买回来用到现在快两年了,每次做蛋白质分离实验都得靠它。这设备不算特别起眼,但做起实验来是真靠谱,今天就把我这两年攒的使用心得好好说道说道,给刚接触它的小伙伴们当个参考。

一、产品基本信息

DYCP-36这型号的电泳槽,市面上好几个厂家都做,咱们实验室用的是北京六一的,当时选它是因为同实验室师兄说这牌子的电泳设备皮实。后来跟用上海添时同款设备的朋友聊,发现虽然外壳细节有点不一样,但核心功能都差不多。

它的个头我得好好形容下,长335mm差不多是半张A4纸的长度,宽150mm比我的手掌张开略宽点,高75mm也就一个马克杯的高度。平时往实验台角落一放,旁边还能放下移液枪架,一点不占地方。最让我满意的是重量才2kg,上次实验室搬家,我一个人抱着它走了老远都不费劲。

配套的凝胶板是90mm×215mm的,厚度0.4mm,这点得特别注意。有次新来的师妹买成1mm厚的凝胶,往槽里一放根本卡不住,最后只能重新买。建议大家每次订凝胶的时候,备注里一定写上"适配DYCP-36",省得麻烦。

二、核心功能特点

1. 高效冷却系统:这功能真是帮了我大忙。记得第一次用没经验,跑等电聚焦的时候没开冷却,才一个小时凝胶边缘就开始发皱,蛋白条带都糊了。后来搞明白,这设备的冷却装置是藏在槽体两侧的,通上循环水之后,能把温度稳稳控在20-25℃。上次做一个需要连续跑6小时的实验,中途摸槽体也就比体温稍高点,跑完的凝胶平整得很,条带边缘锋利得像用尺子画的。

2. 水平调节功能:刚用那会儿我总觉得这功能多余,直到有次跑胶发现条带往一边歪,才知道水平有多重要。它底部那四个调节腿是带螺纹的,拧起来很顺滑。我现在养成习惯,每次用之前都把那个小水平仪放在槽盖上,盯着气泡慢慢调,直到气泡稳稳待在正中间才开始实验。自从认真调水平,条带再也没出现过歪斜,连最边上的样品都跑得整整齐齐。

3. 多功能应用:我们组主要用它做双向电泳的第一向分离,每次把样品跑完,再拿到第二向电泳槽里,出来的蛋白点又多又清晰。有次隔壁实验室借去做同工酶分析,回来跟我说分离效果比他们自己的老设备好多了。偶尔我还会用它做蛋白质纯度检测,把纯化后的样品跑一遍,看是不是单一条带,比跑SDS-PAGE更能说明问题。

三、配套电源选择

这电泳槽本身不带电源,得另配。我们试过三种电源,最后固定用DYY系列了。

DYY-10C是最常用的,屏幕大得像个小平板,电压、电流、功率三个参数能同时显示。上次带本科生做实验,我在旁边看着,学生们对着屏幕调参数,一点没出错。之前用的老电源是旋钮调节的,总有人把200V调成2000V,吓出一身冷汗。

DYY-12C就更高级点,能设程序升温似的调电压。上次做血清蛋白分离,需要先200V跑1小时,再自动升到500V跑3小时,用它设置好之后根本不用管,到点还会滴滴响,特别省心。就是价格比10C贵不少,要是实验室经费紧张,10C完全够用。

四、操作使用指南

1. 准备工作:

   - 调水平的时候别着急,我一般分三步:先把四个腿拧到差不多高度,再把水平仪放中间,最后逐个微调。记得顺时针拧是升高,逆时针是降低,别弄反了。
   - 冷却系统连接有个小窍门:进水管接槽体左侧接口,出水管接右侧,这样水流更顺畅。有次接反了,水温半小时才降下来。还有冷却剂最好用去离子水加防冻液(比例3:1),冬天不容易结冰。
   - 载体两性电解质选pH3-10的最常用,要是分离酸性蛋白多就选pH3-7,碱性蛋白多选pH7-10。我通常会多备几种,上次有个样品在3-10里分不开,换了5-8的马上就出结果了。

2. 制胶与上样:

   - 配胶的时候,丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的比例得严格按配方来。我试过一次图省事少放了0.5ml交联剂,结果凝胶软得像豆腐,根本没法从板上取下来。搅拌的时候用磁力搅拌器挡到低速,搅10分钟就行,太快容易起泡。
   - 上样枪最好用10μl的,枪头斜着45度插进加样孔,慢慢推。有次赶时间推得太快,样品溅到旁边孔里,最后两条带都没法用。现在我上样的时候,眼睛盯着枪头尖,确保液体顺着孔壁流到底部再松手,虽然慢点但稳当。

3. 电泳过程:

   - 电压设置我有个独家配方:开始用200V跑30分钟,让样品慢慢散开;再调到500V跑2小时,这时候大部分蛋白开始按等电点分离;最后用800V跑1小时,把那些难分离的蛋白彻底分开。上次有个师姐不信,非要用1000V直接跑,结果蛋白都跑到凝胶外面去了。
   - 电泳时得时不时瞟一眼电流,正常情况下应该慢慢下降。要是电流突然飙升,大概率是电极片上沾了凝胶碎屑,这时候别慌,断电后用镊子夹出来就行。
   - 停电泳有讲究,不能直接拔电源,得先把电压降到0,等30秒再关电源。有次直接断电,凝胶里的蛋白突然扩散,条带边缘就模糊了。

五、维护与保养

设备就像养宠物,你对它好,它才给你好好干活。每次用完我都用去离子水冲三遍槽体,特别是电极槽里的缓冲液残留,得用棉签蘸水擦干净。有次偷懒没擦,过几天发现电极上长了层绿毛,后来用细砂纸打磨半天才恢复导电。

那个调节水平的螺丝得定期保养,我每个月会往螺纹上滴一滴甘油,不然拧起来咯吱响。上次借设备给别的实验室,还回来发现螺丝锈住了,费老大劲才弄好,现在谁借设备我都先叮嘱这点。

存放的时候得垫个泡沫垫,我们实验室的仪器柜里专门给它留了位置,旁边放着硅胶干燥剂,南方梅雨季的时候,还会放一小包防潮剂在槽里,两年下来设备里一点霉斑都没有。

六、注意事项

1. 不同厂家的设备真不一样,上次去合作实验室用他们的DYCP-36,发现电源接口在后面,我们的在北京六一的在侧面,差点把插头插错。所以换设备用的时候,第一步必须看说明书,别觉得长得像就随便用。

2. 买设备前一定问清楚是不是停产型号。我师弟去年想买台备用,问了好几家都说老款停产了,新款要等一个月,最后差点耽误实验。建议大家买的时候多囤点易损件,比如电极片和密封圈。


这台DYCP-36现在成了我们实验室的"明星设备",不光我们组用,别的组做实验也总来借。其实只要掌握了它的脾气,用起来特别顺手。要是你在使用过程中发现什么新技巧,别忘了在评论区告诉我,咱们互相学习呀。


本文由北京六一生物编辑整理。

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