DYCZ-24DN电泳仪原位制胶保姆级教程

作者：六一生物发布时间：2025-09-22 09:12:45 点击：

DYCZ-24DN电泳仪原位制胶保姆级教程：从配胶到拔梳，避坑技巧全做蛋白电泳快三年，现在制胶能闭眼操作，但刚上手那阵子，简直是“漏液专业户”。这台迷你电泳仪看着精巧，制胶时却藏着一堆“小陷阱”——胶槽密封没做好，灌完胶眼睁睁看着漏光；梳子插歪了，胶孔全是斜的；甚至试剂加错顺序，刚配好的胶在烧杯里就凝了。后来踩着无数次失败的坑，总算摸透了它的“脾气”，这些全是带血带泪的实战经验，新手照着做能少浪费半箱试剂。

一、制胶前：别嫌麻烦！三步检查避开“开局杀”

刚开始制胶我总急着配丙烯酰胺，觉得准备工作太啰嗦，结果每次都栽跟头。印象最深的一次，师妹借我的仪器制胶，灌完没两分钟就喊“漏了”，我跑过去一看，胶液顺着胶槽往下淌，操作台全是黏糊糊的液体，刚配的试剂全白费了。拆胶槽检查才发现，密封胶条上粘了一大块干胶，没清理就直接装了。

从那以后，我制胶前必做“三步检查”：先摸胶条，要是硬邦邦的就用去离子水泡5分钟软化，表面有残留就冲干净，再按原位置嵌回槽边，用手指沿边缘压一圈，确保没有凸起；然后擦玻璃板，用镜头纸蘸乙醇擦两遍，再用去离子水冲净擦干，对着光看没有光斑才放心，不然胶里容易有气泡；最后选梳子，常规WB用10齿、1.0mm的刚好，样本多就用15齿，但得提醒自己加样时别溢出来。

二、配试剂：精准量取是关键，TEMED别加多！

配试剂更是个“精细活”，一点都不能马虎。丙烯酰胺、Tris缓冲液这些量大的还好，APS和TEMED真是“差一点就翻车”。上周配胶时手抖，TEMED加多了半管，结果刚摇匀就感觉溶液变稠，赶紧往胶槽里倒，倒到一半就凝住了，只能整槽倒掉，心疼得我半天没说话。

后来学乖了，每次都用移液枪精准量取，严格按“丙烯酰胺→Tris缓冲液→去离子水→APS→TEMED”的顺序加。TEMED必须最后加，加完立马摇匀灌胶，不敢有半点耽搁——这玩意儿催化凝固的速度太快，多放几秒都可能在烧杯里结块。

三、灌胶：慢工出细活，水封是胶面平整的秘诀

灌胶的手感得靠练，刚开始我总倒得太快，胶液里全是气泡，挑都挑不完。DYCZ-24DN的胶槽比较轻，灌胶时容易歪，我就在底下垫张防滑垫，双手扶着胶槽两侧固定住。胶液要顺着玻璃板内壁慢慢流，像倒水一样轻柔，倒到距离顶端1cm左右停手。

这里有个救了我无数次的小技巧：用移液枪吸点去离子水，沿另一侧玻璃板轻轻滴在胶液表面，形成水封。这样凝出来的胶面平得像镜子，点样时不会漏。之前没加水封，胶面坑坑洼洼，样本直接溢到隔壁孔，跑出来的条带全混在一起，白白浪费了一批细胞样本。

四、插梳：别用蛮力！对准刻度慢插才不裂胶

插梳是最考验耐心的，我曾因为太用力，把刚凝好的胶戳裂过。等胶液和水封层之间出现清晰界限（大概20多分钟），先倒掉水封，用吸水纸吸干残留水分，再拿起梳子对准玻璃板上的刻度，垂直、缓慢地插到底，全程别左右晃。

DYCZ-24DN的梳子有定位槽，对准了插刚好露出1mm梳齿顶端，点样时不容易漏。凝固时间也不能省，室温25℃得等30分钟，冬天温度低就放37℃孵箱，不然胶孔没定型，一拔就塌。有次赶实验，20分钟就拔梳，结果胶孔软塌塌的，样本根本没法点，只能重新配胶，反而更浪费时间。

五、拔梳：先泡缓冲液！抽丝式拔出保胶孔完好

拔梳是最后一关，很多人前面都做好了，偏偏在这里功亏一篑。我刚开始硬往上拽，把胶孔边缘的胶带下来一大块，跑出来的条带歪歪扭扭，连marker都没法比对。

后来老实验员教我个妙招：先把制胶槽放进电泳槽，加少量缓冲液没过胶孔，双手捏住梳子两端轻轻往上提，同时稍微左右转一下，像抽丝一样慢，感觉松动了再匀速拔出。要是梳子卡得紧，别用蛮力，往胶孔里滴两滴缓冲液，等1分钟再拔，立马顺畅。拔完我都会对着光看一眼胶孔，确保每个都完好无损才放心。

六、收尾检查：冲洗胶孔！别让碎胶毁了样本

拔完梳别急着点样，得先检查胶孔。用移液枪吸点缓冲液，挨个冲洗胶孔，把碎胶冲出来，不然会堵塞孔道，样本跑不下去。有次我嫌麻烦没冲洗，结果有个胶孔堵了，样本全积在表面，跑出来只有一条模糊的带，白瞎了珍贵的磷酸化蛋白样本，只能重新提蛋白再来一次。

要是发现胶孔变形或漏液，别将就用。DYCZ-24DN一次能制两块胶，弃用坏的那块，总比跑废样本强。我现在都养成习惯，检查没问题才敢点样，这一步看似多余，却能少走很多弯路。

总结：三个致命坑，我全踩过，别再犯！

这三年踩过的坑总结下来，就三个最致命：胶条没装对漏液、试剂加错顺序、玻璃板没擦干净有气泡。现在我装完胶槽都会倒点水试漏，静置5分钟没漏水再灌胶；配胶严格按顺序加试剂，不敢乱来；擦玻璃板更是细致，擦完必对着光检查。

其实DYCZ-24DN电泳仪的原位制胶没那么难，摸清它的“脾气”就好办。新手刚开始可以用清水模拟灌胶练手感，熟悉了再用真试剂。制胶成功的胶跑出来的条带又直又清晰，看着都舒心，这可是蛋白电泳成功的第一步啊！要是实在没头绪，跟着我的步骤多练几次，很快就能一次成功。

本文由北京六一生物编辑整理。

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