DYCP-32C核酸电泳电压电流怎么设？

作者：六一生物发布时间：2025-09-19 09:17:43 点击：

用DYCP-32C跑核酸的这两年，现在闭着眼都能报出参数，但刚开始那阵子，真的是连仪器面板都看不顺眼。总觉得网上的教程说得云里雾里，什么“恒压恒流按需选择”“电压与凝胶匹配”，看着挺有道理，一上手全乱套，条带要么拖得像烂面条，要么跑半天没动静，最崩溃的一次，凝胶直接被烧得黏在胶槽上，刮都刮不下来。

一、第一步先踩对模式：恒压才是“本命”，恒流坑死人

第一次用这台仪器时，我对着面板上“恒压”“恒流”那两个小按键愣了好几分钟。当时刷到一篇帖子说“恒流模式电流稳定，条带更整齐”，心想“稳定”肯定没错，就选了恒流，随手设了30mA。刚开机没两分钟，就觉得仪器有点发烫，手凑过去摸了摸胶槽边缘，居然有点烫得慌。我赶紧盯着屏幕看，电压数值蹭蹭往上涨，从80V一路窜到130V！那时候还不知道要断电，就眼睁睁看着凝胶慢慢变透明，最后拆下来一看，条带糊成一片，连marker都成了模糊的色块，当天要交的实验结果直接泡汤。

我蹲在地上盯着废胶发愁，老实验员路过踢了踢仪器腿：“傻丫头，这机子跑常规核酸，就得用恒压！恒流是跑超稀胶才用的，你瞎凑什么热闹。”半信半疑试了次恒压，设了100V，电流自己跳到25mA就稳住了，跑出来的条带居然立马规整了不少。

现在总算摸透了这台仪器的“脾气”：恒压模式能把电场稳住，核酸迁移时不会忽快忽慢，电流会跟着凝胶电阻自己调整，根本不用咱们瞎操心。只有一次帮师兄跑0.5%的超稀胶，怕胶被水流冲垮才用了恒流，平时那模式我碰都不碰。现在开机第一件事就是确认模式，那按键在面板左侧，小小的一个，好几次我都差点按错，还好反应快及时改过来，这习惯真救了我好几次。

二、电压得跟胶“配对”：浓胶低压慢跑，稀胶中压稳跑

电压设置更是踩了无数坑才摸清门道。师妹去年刚进实验室，要跑100bp的miRNA，配了2.0%的高浓度胶，看网上说“跑小片段电压高点快”，就把电压设到120V。我俩还特意定了闹钟，想着二十分钟就能出结果，结果刚转身聊了两句，闹钟还没响，就看见marker快跑到胶外面去了。拆下来一看，条带挤得像一串糖葫芦，根本分不清谁是谁。师妹急得眼圈都红了，那批样本她提取了好几天，就这么毁了。

后来我们换了80V再跑，这次没敢走开，搬了个凳子坐在旁边盯着胶看。45分钟后拆下来，终于看到清晰的条带，连相差20bp的片段都分得明明白白。这才恍然大悟，胶越浓电阻越大，电压就得往下调，不然小片段跑得太快，根本来不及分离。

还有次跑基因组DNA，配了0.8%的稀胶，我顺手设了80V，结果从下午两点跑到三点半，条带才刚离开点样孔一点点。那天本来要赶在下班前出结果，硬生生拖到晚上八点，最后只能在实验室吃泡面。后来试着把电压调到90V，70分钟就跑完了，条带还是好好的，没降解也没模糊。

现在我们实验室里都形成默契了：1.0%-1.2%的胶最常用，跑PCR产物就固定100V，35分钟准出结果；1.5%-2.0%的胶跑小片段，80V跑45分钟足够；0.8%的胶跑大片段，90V一小时多一点刚好，再也没人瞎设参数了。

三、电流不用盯但要防异常：飙高降压，偏低查接线

刚开始我以为选了恒压就万事大吉，电流根本不用管，结果上次又栽了跟头。那天跑0.8%的胶，电压设100V，刚开始电流25mA挺稳定，没过十分钟突然跳到40mA，仪器外壳烫得厉害。我吓得赶紧喊老实验员，他跑过来一看，让我先把电压降到80V，过了几分钟再看，电流慢慢回落到28mA，最后条带也没受影响。

后来他跟我说，电流飙升大多是胶太稀或缓冲液加太多，降点电压就能稳住；要是电流低于15mA，先别慌着调参数，看看电极线有没有插紧。果然没过多久，我就遇到电流只有12mA的情况，折腾半天参数没用，最后发现是负极线没插到底，重新插紧听到“咔嗒”一声，电流立马回到25mA。

现在跑胶时我会偶尔瞥一眼电流，只要在20-35mA之间就放心，超出这个范围再动手调整，比瞎调参数管用多了。

四、那些“想当然”的坑，一个都别踩

这两年踩过的“想当然”的坑更是不少。之前有个同事刚从别的实验室过来，习惯了用DYCP-31E，直接把120V的参数用到32C上，结果电流一下子飙到50mA，凝胶当场融化，样本全废了。后来才知道，这两台仪器的功率负载不一样，32C的参数得稍低些，千万别偷懒直接抄。

我自己也犯过急功近利的错，刚用仪器时急着出结果，把电压设到150V，20分钟就跑完了，结果条带拖尾得像“彗星”，只能重新跑，反而更浪费时间。还有次为了省缓冲液，用了反复回收的旧液，就算参数设得再准，电流也忽高忽低，条带忽深忽浅，换了新配的1×TBE后，效果立马稳定了，这钱是真不能省。

其实用久了就发现，DYCP-32C的参数设置真没那么玄乎，无非就是摸透它的“脾气”：选对恒压模式，跟着凝胶浓度定电压，偶尔盯下电流异常。新手刚开始不用慌，就从“1.0%胶+100V+35分钟”的组合练手，跑几次看看条带效果，慢慢就能找到感觉。要是实在没头绪，告诉我你跑的是啥样本、配了多少浓度的胶，我保准给你出个能跑清晰的方案，毕竟这些都是用无数废胶换来的经验啊！

本文由北京六一生物编辑整理。

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