DYCZ-30C型双板夹芯式垂直电泳仪操作规范与常见问题解析

作者：六一生物发布时间：2025-12-22 09:14:50 点击：

本文详细介绍了DYCZ-30C型垂直电泳仪从安装、制胶、上样到电泳、拆洗的标准化操作流程，并汇总了实验过程中常见的异常现象及其解决方案，旨在帮助用户，特别是新用户，安全、高效地获得可靠的蛋白电泳结果。

一、安全与准备

1. 个人防护：操作全程需佩戴手套、实验服及护目镜。丙烯酰胺单体具有神经毒性，务必小心。
2. 仪器检查：确认电泳槽、玻璃板、梳子、垫片洁净无破损。检查电源线、电极连接是否正常。
3. 试剂准备：提前配制好分离胶、浓缩胶缓冲液、电泳缓冲液等，并置于适宜温度。

二、标准化操作流程

步骤1：组装制胶模具

将长、短玻璃板与1.0mm厚垫片对齐，放入制胶夹中卡紧，确保底部对齐。将夹子垂直固定在制胶架上。

步骤2：灌制分离胶与浓缩胶

按配方迅速混匀分离胶溶液，用移液枪沿玻璃板一侧间隙平稳注入，约至短板上缘2/3处。
立即在胶面上轻轻覆盖一层无水乙醇或异丁醇，以压平胶面并隔绝空气。室温聚合20-30分钟。
倒去上层液体，用滤纸吸干。同理灌制浓缩胶，并立即插入洁净的梳子，避免产生气泡。聚合15-20分钟。

步骤3：上样与电泳

将聚合好的胶板装入电泳槽，长板对外。槽内加入足量1×电泳缓冲液，内槽液面需超过短板上缘。
双手垂直向上轻轻拔出梳子，可见清晰的加样孔。
用微量上样枪将已与上样缓冲液混合并煮沸变性的蛋白样品，缓慢注入加样孔底部。
盖好电泳槽盖，连接电源（红对红，黑对黑）。设置电泳参数：浓缩阶段恒压80V，待溴酚蓝指示剂进入分离胶后，改为恒压120V。待溴酚蓝迁移至凝胶底部约0.5cm处，关闭电源。

步骤4：拆卸与后续处理

断开电源，倒出电泳缓冲液。撬开玻璃板，取出凝胶，进行后续的染色、转膜等操作。
及时彻底清洗玻璃板、垫片和电泳槽，晾干备用。

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