DYCZ-24DN加样梳选10齿还是15齿？

作者：六一生物发布时间：2025-09-22 09:15:20 点击：

老实验24DN做蛋白电泳的这两年，光加样梳就踩过不少坑。刚开始对着10齿和15齿的梳子犯愁，总觉得“齿越多能跑的样越多，效率越高”，每次都一股脑选15齿，结果好几次都把实验搞砸了；后来赌气换成10齿，又遇到样本太多跑两批太耗时的问题，硬生生多熬了好几个晚上。慢慢才摸透，这两种梳子根本没有“绝对好坏”，全看实验场景怎么搭，每一次选择背后都是实打实的教训。

一、初次踩坑：贪多选15齿，12个样本全废了

刚进实验室那阵，我手里攒了12个细胞样本，想着15齿梳子能多跑3个孔，留两个孔加marker，刚好一次跑完，省得等第二轮制胶。当时还美滋滋地跟师兄炫耀“省时间”，结果点样时就慌了神。

15齿的梳孔比10齿的窄一圈，我用10μL的枪头加样，稍微手抖就溢到隔壁孔，有的孔甚至直接和旁边的孔连成了一片。最后跑出来的条带互相粘连，像一团乱麻，根本没法分析。师兄过来一看，没好气地说：“贪多嚼不烂，这胶废了，重新做！”没办法，只能拆成两批用10齿梳子跑，硬生生多花了两个小时，那天晚上还被导师问为什么效率这么低。这是我第一次真切感受到，选梳子真不是“越多越好”。

二、核心逻辑：先看样本数，再盯实验目的

吃了那次亏后，我开始慢慢总结规律，发现选梳子的关键就俩：样本数量和实验目的，两者结合着看，基本不会错。

从样本数来说，5、6个样本加1-2个marker孔，选10齿梳子刚好。10齿的梳孔宽，每个孔能轻松加15-20μL样本，点样时不用小心翼翼盯着，就算枪头稍微歪一点也没事，跑出来的条带分得特别开。上周跑6个PCR产物样本，用10齿梳子加18μL/孔，条带边缘整整齐齐，拍照直接能用，一点都不用修图。

但要是样本数到了10个左右，15齿梳子就成了刚需。上周帮师妹跑11个转染样本，用15齿梳子加8μL/孔，刚好留两个孔加marker，一次就成功了，条带清晰又不拥挤。不过有个铁律：15齿的加样量绝对不能超10μL，不然肯定溢液，我之前试过加12μL，好好的样本全浪费了。

实验目的更关键。要是只是做定性分析，比如看看蛋白有没有表达、有没有杂带，15齿梳子性价比真的高。上次师妹做细胞转染后的初步鉴定，12个样本加2个marker，用15齿梳子一次跑完，20分钟就出结果了，虽然孔窄，但一点不影响判断条带有无，省了不少制胶的丙烯酰胺和APS。

可一旦涉及定量分析，比如测蛋白表达量的灰度值，10齿梳子就是唯一选择。之前做药物处理实验，需要精确算灰度值，一开始图省事用15齿梳子跑，结果条带太窄，每次测的灰度值波动都很大，重复了三次数据都不一致。师兄看了结果，直接把15齿梳子扔到一边：“用10齿重新跑，孔大样本加载均匀，条带才规整。”我半信半疑试了，每个孔加15μL样本，跑出来的条带明显变宽，灰度值的CV值从15%降到5%，数据一下子就能用了。

还有珍贵样本，比如临床组织样本，提取一次特别费劲，我也只敢用10齿梳子。孔大容错率高，就算点样时稍微偏差，也不会浪费样本。上次用15齿梳子跑临床样本，不小心溢液浪费了两管，现在想起来还心疼。

三、操作适配：新手先练10齿，熟手再用15齿

除了样本和目的，自己的操作水平也得考虑，新手真别一上来就挑战15齿。

10齿梳子的梳齿粗，插梳时不容易歪，就算稍微用力，胶孔也不容易变形。我刚开始练制胶时，用10齿梳子插歪了好几次，拔出来胶孔还能勉强用；但换成15齿梳子，稍微没对准，拔出来就是一排斜孔，直接废胶。而且15齿的孔太窄，对加样技巧要求高，新手往往控制不好枪头角度，很容易把样本加到孔外。我师妹刚来时，用15齿梳子加样，溢液率快到50%，练了一个月才好点，前期全靠10齿梳子练手感。

不过熟手用15齿效率是真高。我现在用15齿加样，8μL样本一推到底，不会溢液也不会留气泡，一次跑13个样本，比用10齿省一半时间。这就是“先练基础再求效率”的道理。

四、避坑总结：这三个错，我全踩过

这两年踩过的“想当然”的坑也不少，列出来帮大家避避雷：

一是别为了省胶强行挤样。有人觉得“多跑几个样能省一块胶”，在15齿的孔里加过量样本，结果条带全废，反而浪费更多试剂。我之前就这么干过，一块胶加了14个样本，最后只跑出3个能用的条带，后悔莫及。

二是别忽略梳齿厚度。DYCZ-24DN的梳子有0.75mm和1.0mm两种，得和凝胶厚度匹配。上次我拿错0.75mm的15齿梳子配1.0mm的胶，跑出来的条带全是歪的，查了半天才发现问题。

三是旧梳子别将就用。梳齿变形的旧梳子哪怕齿数合适也别用。我之前用了一把15齿旧梳子，梳齿弯了几根，制出来的胶孔大小不一，加样时有的孔加8μL就满，有的能加12μL，条带跑出来高低不齐。

其实DYCZ-24DN的加样梳选择就看“样本数+实验目的+操作水平”这三点，没那么复杂。新手可以先备一把10齿梳子练手，等样本量多了、操作熟了再添15齿的。我现在实验室里两种梳子都常备，早上看一眼当天的实验计划，就知道该用哪把了，效率又高效果又好。要是实在拿不准，告诉我你的样本数量和实验目的，我直接帮你定，省得你走我之前的弯路！

本文由北京六一生物编辑整理。

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