DYCZ-27B 圆管凝胶制作：从“翻车”到成功的实战手记

作者：六一生物发布时间：2025-11-03 09:05:16 点击：

还记得我第一次独立制作DYCZ-27B的圆管凝胶时，那场面堪称灾难现场：漏胶、气泡、取胶时凝胶断裂……所有能遇到的问题，我几乎都遇了个遍。现在回想起来，那些失败恰恰是最好的老师。这份手记，就是我踩过所有坑后，总结出的最实用的圆管凝胶制作指南。

第一章：准备工作——“磨刀不误砍柴工”

和常见的平板凝胶不同，圆管凝胶是在一根细细的玻璃管里完成的，这要求更高的精细度。

核心材料：

玻璃管：确保洁净、干燥、无裂痕。管口平整是关键。

橡胶塞（O型圈）：这是防漏的灵魂！用手捏一下，必须有弹性。老化发硬的橡胶塞会直接导致漏胶，务必更换。

封底材料：Parafilm封口膜是首选，也可以用专门的橡胶帽。

心理准备：耐心，还是耐心。操作要慢而稳。

第二章：实战六步走——步步惊心，步步为营

第一步：密封管底——最简单的步骤，最易犯的错

用Parafilm封底时，很多人只是简单一裹。正确做法是：剪下一小块Parafilm，紧紧包裹住玻璃管底部，然后用手捏紧，让其牢牢贴合在管壁上，形成一个平滑的密封面。拙劣的密封是漏胶的第一大元凶。

第二步：灌制分离胶——与时间和气泡赛跑

1. 用细长滴管吸取分离胶溶液，将滴管尖端伸入玻璃管底部。
2. 缓慢、均匀地推出胶液，让液面从底部缓缓上升，直至达到预定高度（通常是管长的2/3）。
3. 关键技巧：水封！紧接着，用另一个滴管，沿着管壁非常缓慢地叠加一层水或水饱和的正丁醇。目的有二：一是隔绝空气，使胶面平整聚合；二是形成一个清晰的界面，方便观察凝固情况。动作一定要轻缓，避免水流冲击破坏胶面。

真实案例：我的“气泡凝胶”
我第一次灌胶时，求快，猛地将胶液挤入管中，结果胶液里混入了好多小气泡。灌完水封时又太猛，水和胶混在一起了。最后凝出的凝胶里面全是气泡，界面歪歪扭扭。

反思：“慢”是灌胶的唯一诀窍。匀速推进胶液，才能最大程度避免气泡。水封时，让液体顺着管壁流下，如同倒啤酒一样。

第三步：灌制浓缩胶——成败在此一举

等待分离胶完全凝固后（可见明显的水胶界面），倒掉上层的水，并用滤纸吸干残留水分。

1. 灌入浓缩胶至管口。
2. 插入样品梳：使用圆形的样品梳（与平板电泳的梳子不同）。插入时同样要慢，避免带入气泡。由于表面张力，胶液会形成一个弯月面，这是正常的。

第四步：取胶——整个流程最大的挑战

这是新手和老手的分水岭。蛮力是绝对不行的。

错误示范：直接用洗耳球对准管口猛吹。后果往往是凝胶“啵”地一声断成两截，或者像子弹一样射出去摔得粉碎。

正确工具与方法：依赖DYCZ-27B配套的长针头和注射器。

1. 用蒸馏水润湿玻璃管内侧。
2. 将长针头（针尖磨钝的）从凝胶和管壁的缝隙中轻轻插入。同时，用注射器向缝隙中缓缓注水，起到润滑作用。
3. 此时，再用洗耳球在管口给予均匀、温和的压力，你会发现凝胶被水和压力共同作用，完整地、滑润地被推了出来。

真实案例：师兄的“完美取胶”

在我多次取胶失败后，师兄给我演示了一遍。他并不着急，先是注水，然后用手轻轻转动针头，让水充分浸润整个接触面。最后，他几乎没用什么力，凝胶就乖乖地滑到了试管里，完整如初。他告诉我：“让水去做功，你不是在‘推’胶，而是在‘请’它出来。”

第五步：安装凝胶

将取出的圆盘状凝胶，小心地安装到以上好橡胶塞的上槽底部。确保凝胶底部与橡胶塞接触良好，没有歪斜。

第六步：电泳

向上、下槽中加入缓冲液，确保凝胶完全浸没。然后小心地用微量注射器将样品加到凝胶顶部的样品孔中，即可开始电泳。

第三章：常见问题快查手册

1、问题：灌胶时漏液。

原因99%：橡胶塞老化或破损；Parafilm没封好。

2、问题：凝胶中有气泡。

原因：灌胶速度太快；或凝胶配方问题（如AP或TEMED量不准）。

3、问题：取胶时凝胶断裂。

原因：润滑不足（水没注够）；用力过猛；或者凝胶聚合不好，太脆。

结语：经验之谈

制作圆管凝胶，更像是一门手艺，而不是简单的操作。它要求你对每一个细节都有感知：捏橡胶塞的手感、推胶液的速度、注水时的轻柔。它教会我们的，是一种对实验材料的尊重和耐心。当你终于能熟练地制出一根根完美的圆柱形凝胶时，你会对“电泳”这件事，有更深的理解。祝你成功！

本文由北京六一生物编辑整理。

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