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DYY-6D电脑三恒电泳仪操作全攻略:从参数设置到实验优化

作者:六一生物 发布时间:2025-12-18 09:06:31 点击:
    DYY - 6D电脑三恒电泳仪具备恒压、恒流、恒功率三种精准控制模式,适配核酸、蛋白质等多种电泳实验,下面从前期准备、参数设置、实验操作及实验优化四个方面,整理其完整操作攻略,助力实验高效开展并保障结果准确性:

一、前期准备

    1.  仪器与耗材检查:先查看电泳仪外观有无破损,7英寸触控屏显示是否正常,电极线有无老化破损。再检查电泳槽密封情况,避免后续漏液;同时备好适配实验的凝胶(如血清蛋白电泳用1.2%-1.5%琼脂糖凝胶,SDS - PAGE用5%浓缩胶和12%分离胶)、样品及对应缓冲液(如蛋白电泳常用Tris - 甘氨酸缓冲液pH8.3,核酸电泳可用TAE缓冲液)。
    2.  电路与安全准备:将电泳槽的两个电极与电泳仪直流输出端连接,务必确认正负极无误。确保仪器接地良好,避免漏电风险;同时检查仪器保险丝状态,排除短路隐患,为实验安全兜底。
    3.  样品与凝胶预处理:蛋白样品需按比例与SDS上样缓冲液混合,95℃加热5分钟变性;DNA样品可与Loading Buffer按5:1比例混合。凝胶制备后平稳放入电泳槽,蛋白电泳的凝胶需注意浓缩胶与分离胶的pH值匹配,放置时避免凝胶碎裂。

二、参数设置

    1.  模式选择:该仪器的三种模式适配不同实验场景。核酸电泳和SDS - PAGE蛋白电泳常用恒压模式,能保障条带分离均匀;低浓度凝胶电泳可选恒流模式,避免凝胶过热;对功率稳定性要求高的特殊样本分离,可选用恒功率模式。
    2.  核心参数设定:可直接调用仪器预设的10组3步程序,也手动自定义参数,不同实验参数差异较大。比如常规血清蛋白电泳可设恒压120V、恒流25mA、恒功率30W,运行40 - 45分钟;SDS - PAGE电泳建议浓缩胶80V、分离胶120V,恒流保护阈值30mA,电泳时长90分钟;核酸电泳可根据片段大小调整,小分子DNA用100 - 120V,大分子用50 - 80V,时长30 - 60分钟。
    3.  辅助参数设置:通过触控屏设定电泳终止时间,开启数据记录功能,方便后续追溯实验参数;若需多组实验并行,可利用3组独立通道设置不同参数,同时处理多样本。

三、实验操作

    1.  加样与加缓冲液:用微量移液器将处理好的样品缓慢加入凝胶加样孔,避免气泡产生,且保证各孔样品量一致。随后向电泳槽注入缓冲液,确保凝胶完全浸没在缓冲液中,防止电泳过程中凝胶干燥影响条带迁移。
    2.  启动与过程监控:确认参数无误后启动仪器,实时观察触控屏上电压、电流、功率的曲线变化。若出现缓冲液不足等异常,仪器会自动报警并暂停,此时需断电补充缓冲液后再重启。实验中禁止接触电极和电泳槽内液体,避免触电。
    3.  实验收尾:电泳结束后,先将仪器参数调至零位并关闭电源,再取出凝胶进行染色、脱色或成像处理。最后导出实验数据,清洁电泳槽和电极,避免缓冲液残留腐蚀仪器。

四、实验优化

    1.  条带清晰度优化:若条带模糊,多是电压过高导致凝胶发热,可降低10 - 20V电压,或缩短电泳时长;若条带拖尾,可能是样品浓度过高,用缓冲液稀释样品至合适浓度,同时更换新鲜缓冲液,避免离子浓度不足。针对条带扭曲,需检查电极是否平行,重新校准电极位置,确保电场均匀。
    2.  分离效率优化:若样品分离不彻底,可适当延长电泳时长,或调整凝胶浓度与电压搭配,如增加分离胶浓度并提高5 - 10V电压;利用仪器多通道特性时,需保证各通道参数偏差不超过1.5%,避免通道间差异影响实验重复性。
    3.  仪器稳定性优化:避免反复插拔输出导线插头,防止短路损坏仪器;不同介质支撑物的电泳不要同时进行,因其电阻不同会导致电流不均。定期清理电极表面氧化层,延长仪器寿命;若仪器出现过温报警,需检查散热情况,保持仪器周围通风,避免遮挡散热口。
    4.  数据重复性优化:每次实验记录详细参数,利用仪器存储功能保存10组程序,后续相同实验直接调用,减少人工设定误差;若需批量检测样本,可通过多通道同时处理,单次处理24 - 36例血清样本,提升效率的同时,保障实验条件一致性。


本文由北京六一生物编辑整理。

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