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DYCP-32C水平电泳仪常见问题与解决方法:条带异常、漏液等
作者:六一生物
发布时间:2025-12-17 09:29:32
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下面将DYCP - 32C水平电泳仪的条带异常、漏液及其他仪器相关故障,以纯文字形式说明其可能原因和对应解决办法:
一、条带异常
1. 条带模糊:电压过高会让凝胶发热,进而导致条带模糊;若样品上样量过多,也会使条带边界不清晰;凝胶未完全凝固或缓冲液反复使用后离子浓度下降,同样会造成这一问题。解决时可将电压调至50 - 70V的恒压模式,减少上样量至10 - 15μL,延长凝胶凝固时间至30分钟以上,同时更换新配制的1×TAE或1×TBE缓冲液。
2. 条带扭曲/呈弧形:凝胶厚度不均、电极位置偏移,或是缓冲液液面未没过凝胶、液面不水平,都会导致电场不均,让条带出现扭曲或弧形。此时要重新制胶,控制凝胶厚度在3 - 4mm,校准电极位置保证其平行,补充缓冲液至液面高于凝胶表面2 - 3mm,且调整电泳槽摆放位置确保液面水平。
3. 条带拖尾:样品中杂质过多、浓度过高,或是Loading Buffer不足、失效,会使条带出现拖尾。可以用TE缓冲液将样品稀释至合适浓度,若含蛋白等杂质,通过酚/仿抽提等方式纯化样品;同时按样品与6×Loading Buffer 5:1的比例补加,若Buffer失效则直接更换。
4. 条带不迁移/迁移缓慢:电极接反会导致条带无法正常迁移,凝胶浓度过高会阻碍DNA片段移动,缓冲液浓度过低则会使电泳动力不足。先调换电极接线,确保加样孔侧接负极;再根据DNA片段大小调整凝胶浓度,大片段可选用0.8%的凝胶;最后重新配制标准浓度的缓冲液保障电泳动力。
5. 条带缺失:电极插反可能让DNA走出凝胶,DNA降解或形成聚合物也会导致条带缺失,梳子变形使点样孔不在同一水平线,同样会影响条带显示。先检查电极极性并纠正,避免DNA跑出凝胶;若为样品问题,可加热处理或重新制备样品;同时更换变形的梳子,保证点样孔处于同一水平。
二、漏液问题
1. 胶室托盘漏液:托盘存在细微裂纹、制胶时托盘未放平,或是胶板与托盘边缘密封不严,都可能引发漏液。先检查托盘,若有裂纹需及时更换;制胶时将托盘放在水平台面,可用水平仪校准;倒入凝胶液后轻轻按压托盘边缘,让凝胶与托盘紧密贴合,防止渗漏。
2. 电泳槽漏液:槽体与槽盖的密封垫老化、胶板未卡紧,或是内槽安装错位,会导致缓冲液渗漏。可更换老化的密封垫,重新安装胶板并卡紧两侧卡扣;安装完内槽后,可先向内槽加缓冲液静置5分钟,确认无渗漏后再向外槽加液,若内槽错位则调整位置使其与外槽贴合无缝。另外也可同时补满内外槽缓冲液,通过平衡压力减少漏液。
三、其他仪器相关故障
1. 无电流/电源无输出:电极接线松动、短路,缓冲液未覆盖电极,或是电源保险丝损坏,都会导致无电流。先重新插拔电极线,清理电极表面氧化层,补充缓冲液至没过电极;再检查电源保险丝,若损坏则更换同规格的,若保险丝反复损坏,需联系售后检修电源。
2. 仪器高温自动停机:散热风扇积灰堵塞、仪器周围通风不良,或是散热孔被遮挡,会导致散热不畅而停机。断电后用软毛刷或压缩空气清理风扇和散热孔的灰尘;使用时让仪器与墙面、其他设备保持10cm以上间距,也可垫高仪器底部,优化进风风道以提升散热效果。
3. 漏电跳闸:缓冲液溅入仪器内部、电源线破损,或是仪器外壳未接地,均可能引发漏电跳闸。断电后用干布擦拭仪器内部并晾干,更换破损的电源线;同时确保仪器接地良好,避免在潮湿环境中操作仪器,减少漏电风险。
4. 过压报警:若仪器出现过压报警,大概率是空载使用、电泳槽未加缓冲液,或是电泳槽内铂金丝断裂导致的。先检查是否为空载,及时放入凝胶并添加缓冲液;若铂金丝断裂,需联系售后更换或维修电泳槽。
本文由北京六一生物编辑整理。
北京六一生物科技有限公司创建于1970年,50多年的历史,公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作,2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。
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