DYCZ-20F在SSCP分析中的应用，精准检测基因点突变的利器

作者：六一生物发布时间：2025-11-27 09:07:24 点击：

你以为DYCZ-20F只能用于桑格测序？那就太小看它了。通过巧妙的“模式切换”，它能够变身为一台高分辨率的SSCP分析仪，无需测序即可快速、低成本地筛查基因点突变，在遗传病研究和癌症诊断中大显身手。

我们的课题涉及筛查一个肿瘤相关基因的点突变。面对大量样本，全测序成本高昂且耗时。当我在文献中看到SSCP（单链构象多态性）技术时，我立刻想到了闲置的DYCZ-20F——它那精密的温控系统和均匀的电场，不正是进行SSCP分析的理想平台吗？

一、方案改造：从变性世界到非变性世界

SSCP分析的核心是：在非变性条件下，单链DNA会形成独特的空间构象，一个碱基的突变就会改变其构象，进而导致在凝胶中的迁移速率发生变化。

二、核心改造：

1. 去除尿素：配制6%-8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶，凝胶和电泳缓冲液中均不添加尿素和SDS。
2. 更换缓冲液：使用0.5x或1x TBE作为电泳缓冲液。
3. 取消加热：这是与测序电泳最根本的区别。SSCP分析必须在低温（4-10℃）下进行，以维持单链DNA构象的稳定。

三、我的实战流程与案例：

目的：筛查一批肺癌细胞样本中TP53基因外显子的突变。

样本处理：通过PCR扩增目标外显子，然后将PCR产物进行变性处理（95℃加热5分钟，立即冰浴），使其双链打开成为随机卷曲的单链。

四、电泳条件：

1、将DYCZ-20F放置在4℃冷房中。
2、设置低功率恒功率电泳（例如8-10W），以确保凝胶在低温下运行，防止产热导致构象改变。
3、电泳时间较长，通常需要4-6小时，直到溴酚蓝跑至胶板底部。

五、结果判读与发现：

1、在银染后的凝胶上，野生型样本通常呈现两条清晰的条带（代表正义链和反义链）。
2、当我在某个样本的泳道中，看到了与野生型迁移位置明显不同的异常条带模式时，我心里的警报响了。这强烈提示该样本中存在点突变。
3、后续我们对这个异常样本进行了测序验证，果然发现了一个确切的错义突变。

六、思考与价值：

这次成功的“跨界”应用，让我们团队建立了一套高效、低成本的突变初筛方案。大批量样本先经DYCZ-20F进行SSCP分析，只对异常样本进行测序确认，极大地节约了时间和经费。

它让我深刻地认识到，一台优秀的仪器，其价值远不止于说明书上的那几项功能。当你真正理解了技术原理，你就获得了重新定义仪器用途的能力。 DYCZ-20F不仅是测序仪，更是一个强大的核酸构象分析平台，等待着我们去发掘它更多的潜能。

本文由北京六一生物编辑整理。

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