DYCP-36型等电聚焦电泳槽常见故障分析与专业处置方案

作者：六一生物发布时间：2025-10-10 09:06:10 点击：

DYCP-36型等电聚焦电泳槽常见故障分析与专业处置方案

一、聚焦过程电压无法升至预设值或电流持续过高

这是IEF实验中最令人头疼的问题之一，其根源往往并非仪器本身，而是样品或试剂体系。

故障现象：通电后，设置高电压（如2000V），但实际电压在数百伏徘徊，无法上升，同时电流下降缓慢，始终维持在较高水平（如数mA以上）。

核心原因：体系内离子强度过高。过多的带电离子在电场中迁移，产生了高导电性，消耗了大部分电力，使得用于蛋白质聚焦的有效功率不足。

专业性排查与解决：

1. 样品预处理验证：首要怀疑对象是样品盐浓度过高。请确认样品是否经过充分的透析、脱盐柱处理或稀释。可用电导率仪检测样品溶液的电导率，与超纯水进行对比。
2. 试剂纯度检查：尿素是常见的“罪魁祸首”。尿素极易潮解，吸收空气中的二氧化碳后会形成碳酸铵，引入大量离子。务必使用高纯度尿素，并将母液分装后密封保存于-20℃，避免反复冻融。配制胶液时，建议使用新鲜解冻的去离子尿素。
3. 两性电解质状态：检查两性电解质（Ampholyte）是否在有效期内，并确保保存得当。失效的两性电解质可能无法形成稳定的pH梯度。
4. 临时处置方案：如果实验紧急，可尝试在初始阶段采用“分步升压”程序：先低电压（如500V）聚焦15-30分钟，让部分离子先迁移至电极液，再手动将电压升至目标值。

二、电泳后胶条中出现异常条纹或拖尾现象

成像质量不佳直接影响实验结果的分析，其原因多与制胶过程和胶条本身状态有关。

故障现象：取出的胶条在染色后出现纵向的、非蛋白条带的直条纹，或蛋白点拖尾、不清晰。

核心原因：胶体内部存在微观不均匀性或聚合条件不佳，导致电场分布不均或蛋白质迁移受阻。

专业性排查与解决：

1. 胶液配制与脱气：配制含尿素的胶液时，剧烈摇晃会产生大量气泡，并可能使尿素复溶。应轻柔搅拌直至完全溶解。关键步骤：对配制好的胶液进行真空抽滤，不仅能去除溶解的气体，防止聚合后产生微小气泡，更能滤除可能存在的微小不溶物，确保胶体均一性。
2. 聚合条件优化：聚合温度和时间至关重要。温度过高或引发剂（AP）过量会导致聚合过快，胶体孔径不均；温度过低或AP失效则聚合不完全。应在恒温条件下（推荐25℃）聚合，并通过预实验确定最佳AP/TEMED配比。
3. 上样前离心：样品溶液必须在上样前经过高速离心（如12000 rpm，10分钟），以彻底去除不溶性颗粒物，这些颗粒物是导致拖尾和异常条纹的常见原因。

三、取胶时胶条断裂或难以推出

取胶是最后一步，也是最容易功亏一篑的环节。

故障现象：用注射器推水时，胶条在玻璃管内断裂，或无法顺利推出。

核心原因：玻璃管壁与胶体之间存在过大的摩擦力，或胶条韧性不足。

专业性排查与解决：

1. 玻璃管处理：新的或使用已久的玻璃管内壁可能不够光滑。建议定期用稀硝酸溶液浸泡清洗，再用超纯水彻底冲洗，最后用乙醇冲洗并晾干，以保证内壁光洁。
2. 水压剥离法：推水时，水流必须平稳且持续。精髓在于：将注射器紧抵管底，一边匀速推水，一边用一只手的手指在管口处轻轻迎接冒出的胶条顶端，利用水的润滑作用，顺势将胶条“引导”出来，而非强行“推出”。这个手感需要练习，一旦掌握，取胶成功率极大提高。
3. 胶条韧性：确保胶体充分聚合是保证韧性的基础。聚合不完全的胶条软烂易碎。可适当延长聚合时间或在聚合完成后，将胶条在玻璃管内于4℃放置一小段时间，以增强其机械强度。

通过以上针对性的专业分析和解决方案，大部分DYCP-36型电泳槽的常见故障都能得到有效排除。关键在于养成规范的操作习惯和细致的观察能力，将问题预防在发生之前。

本文由北京六一生物编辑整理。

北京六一生物科技有限公司创建于1970年，50多年的历史，公司先后3次承担电泳装置产品国家、行业标准的起草、修订工作，2009年负责《基础电泳装置》国家标准已发布实施。专业生产生物化学与分子生物学检验分析仪器的科技型国有企业。

主要生产包含电泳仪、紫外分析仪、凝胶成像分析系统、酶标仪、化学发光成像系统、基因扩增仪等检验分析设备。

如果您对我们的产品有任何问题，欢迎您的来电：400 960 6117

我们的目标是：做生物化学分析仪器行业海尔

标签：