DYCZ-20C序列分析电泳仪操作精要：从手忙脚乱到从容不迫的实战心得

作者：六一生物发布时间：2025-11-20 09:11:19 点击：

第一次面对DYCZ-20C的玻璃板、 spacers 和梳子时，你是否感到无从下手？本文没有枯燥的说明书式教程，只有一名过来人从无数次“漏胶”、“跑歪”中总结出的实战流程与避坑指南，带你平稳度过新手期。

如果说操作DYCP-31BN是“烹饪入门”，那驾驭DYCZ-20C简直就是“分子料理实验室”。它用于DNA序列分析，需要灌制垂直的聚丙烯酰胺凝胶，精密程度和要求都上了一个大台阶。我至今记得第一次使用时，胶液从玻璃板间哗哗流出的狼狈场景。现在，我把这份用“教训”换来的精要分享给你。

第一部分：准备工作——“工欲善其事，必先利其器”

DYCZ-20C的零件更多，清洗是第一位也是最重要的一步。

1、彻底清洗：玻璃板、 spacers（垫片）、梳子，必须用实验室专用洗涤剂和无水乙醇彻底清洗干净，任何指纹或污渍都会导致灌胶时产生气泡或脱胶。我的习惯是：戴着手套操作，洗完对着光检查，确保水膜均匀不挂水珠。
2、组装：这是第一个大坑。将两块玻璃板（一大一小）与 spacers 对齐，用夹子牢牢固定。关键检查点：用手轻轻挤压玻璃板底部，从侧面看两条 spacers 是否对齐。如果错位，这里就是漏胶的起点。

第二部分：灌胶——“与时间和凝固剂赛跑”

1、配制凝胶溶液：根据你的测序片段大小选择合适的胶浓度（如6%的聚丙烯酰胺-尿素胶）。这一步需要精准计算和快速操作，因为加入TEMED后，凝胶就开始聚合了。
2、真实案例与思考：我第一次灌胶时，因为害怕，动作太慢，胶液在烧杯里就开始凝固了，结果灌进去的是一团“果冻”，彻底失败。教训：所有准备工作就绪后，再配制最后的工作液，加入TEMED后，要果断、迅速！
3、灌胶技巧：将组装好的玻璃板装置倾斜约45度，用移液器或注射器沿着一侧玻璃板的缝隙，缓缓地将胶液注入。核心技巧：利用毛细作用让胶液自然流下，可以极大减少气泡的产生。当胶液流到底部后，将其放平。
4、插入梳子：立即插入合适的梳子。插入时要从一侧平稳地推进，防止带入气泡。然后，用夹子从顶部将梳子夹紧，确保齿深一致。

第三部分：电泳——“细节决定成败”

1. 安装与预电泳：凝胶凝固后（通常需要1-2小时），小心取下底部的 spacers 和夹子，将凝胶板安装到电泳槽上。上下槽加入1x TBE缓冲液。至关重要的一步：进行预电泳（通常300V，30分钟）。我的理解：这能清除凝胶中的过硫酸铵等杂质，平衡凝胶温度，让后续的DNA条带更清晰、更平直。跳过这一步，你的序列图背景可能会很深。
2. 上样：这是最考验“手上功夫”的环节。用微量进样器（针头要足够细），吸取变性后的DNA样品。技巧：轻轻擦去针头外的液体，快速而平稳地将针头插入加样孔底部，缓慢推出样品。因为样品密度大，会沉在孔底。切忌：戳破孔壁或插入过深碰到胶面。
3. 电泳参数设置：根据你的实验方案设置恒功率进行电泳。过程中，凝胶会产热，所以仪器通常配有冷却系统。确保冷却水循环正常，否则热量会导致条带“微笑”甚至DNA变性。

“翻车”现场复盘：

1、漏胶： 100%是因为玻璃板没夹紧或 spacers 没对齐。
2、条带弯曲/歪斜：梳子插入时深度不一；玻璃板底部不干净，导致凝胶聚合厚度不均。
3、背景噪音高：大概率是预电泳没做或时间不够；凝胶配制时间过长，试剂部分降解。

结语：

操作DYCZ-20C是一个精细活，需要练习和耐心。但一旦你掌握了上述核心要点和避坑技巧，它就能为你提供极为清晰的DNA序列信息。这份从容，正是从最初的手忙脚乱中历练出来的。

本文由北京六一生物编辑整理。

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