新手别怕！做电泳仪实验我踩过的 7 个坑

作者：六一生物发布时间：2025-07-30 09:17:02 点击：

第一次独立跑胶那天，我站在电泳仪前愣了 20 分钟：玻璃板怎么装？APS 加多了会怎样？上样时手一抖，样品洒了半管。现在带过 3 个新人，发现大家踩的坑都差不多。这篇就扒扒我当年的 “黑历史”，每个错误后都附解决方案，新手照着避坑，3 个月就能出师。

一、组装玻璃板：从 “漏胶大王” 到 “零漏胶”

第一次装板，我以为 “使劲拧螺丝就行”，结果胶从缝里漏了半槽，流到实验台上演变成 “胶体瀑布”。师兄过来看了眼，说：“你听，好的组装会响‘咔嗒’声。”
正确步骤得像拼乐高：

1、密封垫要卡进大玻璃板的凹槽，有缺口的朝上（别装反，反了必漏）；

2、小玻璃板对齐后轻推，听到 “咔嗒” 再拧螺丝（力度像拧矿泉水瓶，太紧会裂板）。我现在有个强迫症：装完必晃一下，玻璃板不动才算合格。实在怕漏，就在密封垫边缘抹层凡士林（像涂润唇膏那么薄），亲测 30 次零漏胶。

二、配胶：那些年被 APS 和 TEMED 坑过的日子

刚开始配胶全凭感觉：“APS 加一丢丢，TEMED 滴两滴……” 结果有次胶 5 分钟就凝了，移液管里的胶像冻住的鼻涕，甩都甩不掉 —— 后来才知道 TEMED 加多了（该加 0.003ml，我手抖加了 0.01ml）。
现在记了个 “季节配方表”：

1、夏天（25℃以上）：TEMED 减到 0.002ml，不然没灌完就凝；
2、冬天（15℃以下）：TEMED 加到 0.004ml，再放 37℃温箱加速，不然等 1 小时胶还软塌塌。

配胶时别聊天！有次跟师妹说话分心，把 APS 当成 TEMED 加，胶死活不凝，浪费了一管丙烯酰胺（死贵）。

三、上样：从 “手抖星人” 到 “稳如老狗”

第一次用 10μl 枪上样，手比打游戏时还抖，20μl 样品洒了一半，孔里只剩个底。现在摸到规律：枪头斜着插 1mm，推推杆像挤番茄酱 —— 慢推 2 秒，停 1 秒再拔，样品会乖乖沉底。
最容易犯的错是 “上样太满”。1.5mm 厚的胶，每孔最多 20μl，超过 30μl 必拖尾。上次师弟想 “条带亮一点”，加了 35μl，结果相邻 3 个孔全被污染，白跑一板。
气泡是 “隐形杀手”。上样后用 10μl 枪头轻轻吸掉孔里的小气泡，不然条带中间会凹一块。有次没吸气泡，Marker 的 50kDa 条带像被啃过，还以为是胶有问题。

四、跑胶：别信 “文献参数”，信自己的眼睛

刚入门时，我严格按文献写的 “120V 跑 1 小时”，结果条带总跑歪。后来发现实验室电压不稳，上午 120V 实际是 110V，下午能飙到 130V。
现在我有个 “笨办法”：盯着溴酚蓝跑。它进分离胶前（大概 20 分钟）用 80V，进去后调到 120V，什么时候它离胶底 1cm 了就停。这个方法比看时间靠谱，尤其跑新样品时。
夏天必加冰袋！没降温的胶像被煮过，条带边缘发虚。我会在槽子周围围一圈冰袋（用毛巾隔开，别让水渗进去），胶内温度能稳住 25℃，条带直得像尺子。

五、拆胶：别用蛮力！胶会 “自己跑出来”

第一次拆板，我用金属刀撬，结果胶裂成三块。正确做法是：用塑料铲从顶端插进去，左右晃两下，听到 “啵” 的一声，胶就自己跟玻璃板分开了，比开罐头还轻松。
胶太黏？泡 5 分钟去离子水。上次跑完胶忘了及时拆，胶跟板粘成一体，泡了会儿水，轻轻一揭就下来了。

现在带新人，我总说：“别怕犯错，我当年漏的胶能装满一烧杯。” 其实新手和熟手的差距，就在于能不能从 “这次又搞砸了” 里攒出 “下次这么做就对了”。下次跑胶再慌，就想想：我当年第一次跑出整齐条带时，激动得拍了张照发朋友圈 —— 你也会有这天的。

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