电泳仪实验操作：从新手到熟手的避坑指南

作者：六一生物发布时间：2025-08-08 09:26:29 点击：

记得第一次自己动手用电泳仪跑胶，手忙脚乱的。调电压的时候看错了数字，把100V调成了200V，加样的时候手一抖，半管样品全洒在了胶外面。最后跑出来的条带歪歪扭扭，还缺了好几个孔，被师兄笑了好几天。其实电泳实验看着复杂，掌握了门道就不难，今天把这些年总结的电泳仪实验的操作要点和避坑技巧分享给大家。

一、制胶：别让气泡毁了整块胶

刚开始制胶，最头疼的就是胶里总出现气泡。有次倒胶太快，整块胶里布满了小气泡，就像撒了一把芝麻，根本没法用，只能重新熬胶。

后来才知道，制胶有不少讲究。琼脂糖和缓冲液混合后，微波炉加热要盯着，沸腾后赶紧拿出来，别让泡沫溢出来。加热完别急着倒，放一会儿，让温度降到60℃左右，这时候胶的流动性刚好，气泡也少。

倒胶的时候，沿着玻璃板慢慢倒，让胶液顺着板流下去，别直接往中间倒。要是倒的时候进了气泡，用牙签轻轻挑一下，气泡就会浮上来。还有，梳子一定要插稳，底部别留缝隙，不然胶会漏下去，孔就不成形了。

二、上样：稳准狠是关键

上样是个技术活，新手很容易手抖。有次我给10个孔上样，有3个孔的样品都洒到了胶外面，还有2个孔戳破了胶，样品顺着破口流走了。

上样的时候，枪头要垂直对着孔，离孔口大概1毫米的距离，慢慢推，别太快。推完别急着把枪头拔出来，稍微停一下，让样品完全沉下去。要是孔里有气泡，先用枪头把气泡吸出来再上样，不然样品会漂在上面。

还有个小窍门，上样前把样品离心一下，让底部的杂质沉淀下去，别把杂质吸进枪里，不然会堵孔。上样量也得注意，别超过孔的容量，一般10孔的梳子，每孔加10-15μL就行，太多会溢出来污染旁边的孔。

三、设置参数：别凭感觉来

有次跑DNA电泳，我想快点出结果，把电压设得比平时高了50V，结果跑了20分钟，胶都发烫了，条带也糊成了一团。后来才明白，参数设置不能凭感觉，得根据样品和胶的情况来。

跑核酸一般用恒压，DNA用100-120V，RNA用80-100V，电压太高容易发热，条带会模糊。跑蛋白的话，SDS-PAGE常用恒流，浓缩胶用80V，分离胶用120V，这样条带分离得清楚。

时间也得控制好，别跑太久。可以盯着指示剂，比如溴酚蓝，跑到胶的2/3处就差不多了，再跑下去样品可能会跑出胶外面。

四、染色：别让颜色“骗人”

染色的时候也容易出问题。有次用考马斯亮蓝染色，染了2个小时就着急脱色，结果条带颜色很浅，看不清楚。后来染了4个小时，脱色后条带就很清晰了。

不同的染色剂时间不一样，考马斯亮蓝染色至少要3-4小时，银染快一点，1个多小时就行，但步骤更麻烦。染色的时候要让胶完全泡在染液里，摇床慢慢摇，让染液充分接触胶。

脱色也很重要，考马斯亮蓝脱色要换几次脱色液，直到背景变浅，条带清晰。别心疼脱色液，换得勤，背景才干净。银染的话，每一步都要洗干净，不然背景会发黑，条带就看不出来了。

五、收尾：仪器要清理干净

实验做完别光顾着看结果，仪器一定要清理干净。有次我做完实验忘了倒缓冲液，第二天缓冲液都蒸发了，槽里结了一层盐，擦了半天才擦掉。

每次用完，把胶倒掉，玻璃板和梳子洗干净，用软布擦干，别留水迹，不然会生锈。缓冲液槽里的缓冲液倒干净，用清水冲几遍，电极也要擦一擦，上面的盐渍要擦掉。

仪器的电线也要整理好，别乱糟糟的，不然下次用的时候容易绊倒人，也可能损坏电线。

结尾：多练练就顺手了

电泳实验看着步骤多，其实多练几次就熟了。刚开始别怕出错，每次出错后想想原因，下次改进。我现在闭着眼睛都能上样，条带跑得又直又清晰。

记住，制胶别让气泡进，上样稳准狠，参数别乱设，染色按规矩来，收尾清理干净。做到这几点，你的电泳实验肯定能一次成功。

本文由北京六一生物编辑整理。

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