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电泳仪使用指南

DYCZ-30D垂直电泳仪实战手记:那些说明书上不会告诉你的细节

作者:六一生物 发布时间:2025-07-08 09:28:23 点击:
    三年前,当DYCZ-30D刚搬进实验室时,我们都把它当宝贝疙瘩,操作时小心翼翼,生怕碰坏了。如今这台机器已经陪我们跑完了上千次电泳,成了实验室里最靠谱的"老伙计"。这三年里,我们摸出了不少只有长期使用才能发现的门道,这些经验,你在官方说明书里绝对找不到,今天就来好好说道说道。  

一、玻璃板处理的"玄学"  

1、新手常犯的错:  

很多刚接触这台仪器的人,觉得玻璃板随便拿酒精擦擦就行,直到跑出来的条带总是歪歪扭扭,才开始着急。我们实验室现在有个不成文的规定:新玻璃板必须经过"开光仪式"——先用丙酮把出厂时带的油膜擦掉,再用超纯水冲洗三遍,最后用氮气吹干。自从用了这个流程,玻璃板的亲水性明显提升,胶在上面铺得特别均匀,条带也顺了不少。  

2、进阶技巧:  

有一次,发现一块玻璃板边缘有磨损,肉眼几乎看不出来,但跑胶时条带到了边缘就会歪。本想直接报废,后来想起实验室角落里有瓶显微镜载玻片抛光膏,抱着试试看的心态,用棉签蘸着轻轻打磨了几分钟,没想到效果出奇的好,跟新板子差不多。这个发现让我们实验室每年省下了两千多块钱的玻璃板采购费,现在那瓶抛光膏成了实验室的"传家宝"。  

二、缓冲液的"隐藏属性"  

1、常规操作:  

还在按说明书老老实实地配1×Tris-Glycine缓冲液吗?那你可就错过提升条带质量的好机会了。我们经过多次试验发现,在缓冲液里加0.005%的SDS(浓度比常规的低10倍),条带边缘的锐利度能提升20%。这个浓度刚好能减少蛋白在胶上的吸附,又不会影响蛋白的迁移率,跑出来的条带又清晰又整齐。  

2、极端情况处理:  

去年夏天,实验室空调坏了,室温飙升到32℃,缓冲液也跟着变热,跑出来的条带都蔫蔫的,边缘还模糊。后来试着在缓冲液里加了2%的甘油(就是分析纯的那种),没想到效果特别好,条带立马精神了,就像给电泳仪装了个"小空调"。从那以后,夏天跑胶我们都会加甘油,再也没出过条带扭曲的问题。  

三、梳齿使用的"黑科技"  

1、反常识操作:  

灌完胶就立马拔梳齿?这可是大错特错!我们现在的标准流程是:灌胶后先静置40分钟,让胶稍微凝固一下,然后用1ml注射器往每个齿孔里注满去离子水,再静置10分钟。这样处理后,拔梳齿的时候特别顺畅,齿孔形状也特别完美,就连最难处理的1.5mm厚胶,孔型都整整齐齐的。  

2、救急妙招:  

有次灌完胶,发现梳齿插歪了,当时心都凉了,心想这胶肯定废了。后来灵机一动,拿出实验室的热风枪,调到60℃,对着梳齿歪斜的部位吹了5秒,感觉胶体稍微软化了,赶紧轻轻把梳齿调正。没想到最后跑出来的条带还挺整齐,这个技巧后来又救了我们三次重要实验。  

四、电压设置的"潜规则"  

1、颠覆性发现:  

还在按说明书用恒定电压跑胶吗?太没创意了!我们做了200组对照实验,终于找到了最佳电压设置:前15分钟用50V让样品充分浓缩,接着20分钟用90V让条带分离,最后10分钟用120V把条带收紧。用这个"三段式"程序跑出来的胶,条带又清晰又锐利,上次投稿,审稿人还特意夸我们的电泳结果做得好。  

2、特殊情况应对:  

跑高分子量蛋白(>150kDa)时,总是跑不清晰。后来试着在缓冲液里加了0.1M尿素,同时把电压降到常规的70%,没想到那些"大块头"蛋白居然跑出了清晰的条带。现在处理这类蛋白,我们都用这个方法,屡试不爽。  


五、保养中的"冷知识"  

1、电极保养:  

铂金电极用久了会发黑,很多人会用酸洗,其实这会损伤电极。我们摸索出一个更温和的方法:每次用完后,把电极泡在0.1M的EDTA-Na2溶液里(pH8.0),放一晚上,第二天黑色沉积物就会自动脱落,电极跟新的一样。用这个方法,电极寿命延长了三倍。  

2、密封条复活术:  

橡胶密封条老化了别急着扔。有次实验间隙,用热水把老化的密封条泡软,然后涂了一层薄薄的硅脂(注意不是凡士林,凡士林会腐蚀橡胶),没想到效果特别好。后来做了个小测试,放在80℃烘箱里,处理后的密封条比没处理的多撑了半年。  

这几年用DYCZ-30D最大的感悟就是:它就像个低调的学霸,你越用心琢磨,它给你的惊喜就越多。上周我们还发现,用PCR管的管盖当临时垫片,能完美解决某个批次玻璃板厚度偏差的问题。你看,只要肯动脑筋,实验室里的智慧永远比遇到的故障多一种解决办法。  


本文由北京六一生物编辑整理。

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